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《麦类作物学报》 2017年06期
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麦麸酯酶的分离纯化及酶学性质研究

杨雪  叶麟  高玮  申光辉  黎杉珊  张志清  
【摘要】:为了能更好地将麦麸酯酶用于检测食品中的农药残留,采用硫酸铵分段沉淀、透析、SephadexG-200凝胶层析、超滤浓缩等方法对麦麸中提取的酯酶粗液进行了分离和纯化,并对其酶学性质进行了研究。结果表明,得到的麦麸酯酶比活力为289.14U·mg~(-1),回收率为47.7%,纯化倍数为16.17。麦麸酯酶的分子量约为26.0kDa,最大紫外吸收峰为224nm和280nm,最适反应温度为30℃,稳定范围为25~40℃;最适pH为8.0,pH稳定范围为4.0~8.0。Cu~(2+)、Mg~(2+)、Ca~(2+)、Al~(3+)、柠檬酸钠、四硼酸钠均对麦麸酯酶有抑制作用,而Fe~(2+)、Mn~(2+)、柠檬酸、硫酸铝钾对该酶有促进作用;以α-乙酸萘酯为底物的动力学参数K_m和V_(max)值分别为0.85mg·mL~(-1)和0.93mg·mL~(-1)·min~(-1)。4℃时,麦麸酯酶半衰期为10.4d,而25℃时,酯酶半衰期为8.6d。本研究结果对麦麸酯酶的应用具有一定参考价值。
【作者单位】四川农业大学食品学院;攀枝花市食品药品监督管理局;
【分类号】:Q814.9
【正文快照】:
麦麸是小麦加工的副产品,在加工中其产量约为小麦加工量的五分之一[1]。植物酯酶(plantesterase,PE)是植物不同部位、各个成长时期的细胞组成成分[2],是羧酸酯水解酶类的一种[3]。以植物酯酶作为农残检测的酶标记物[4],与胆碱酯酶相比,具有价格低廉、来源广泛、检测时间短、检

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