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《泸州医学院学报》 2011年05期
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新基因PRR11的克隆、真核表达载体的构建及鉴定

徐瑲  卜友泉  郭勇  崔涛  兰欢  
【摘要】:目的:克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法:以HeLa细胞cDNA为模板,半定量RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组真核表达载体pcDNA3.1-PRR11。然后将pcDNA3.1-PRR11重组载体转染入HeLa细胞中,收集细胞,制备总RNA和细胞裂解液,采用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测目的基因表达情况。结果:成功扩增了PRR11基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,测序结果表明序列完全正确,pcDNA3.1-PRR11真核重组表达载体构建成功。半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹法证实了转染入HeLa细胞中的目的基因表达成功。结论:成功构建了PRR11基因的真核表达载体,并可在HeLa细胞中成功表达,为进一步研究PRR11基因的功能奠定了基础。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 崔涛;兰欢;杜刚;刘革力;易发平;卜友泉;宋方洲;;新基因PRR11的克隆、原核表达及鉴定[J];生物技术通报;2009年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 艾青;卜友泉;刘竹;兰欢;吉颖;杜刚;杨正梅;刘革力;宋方洲;;人PRR11启动子的结构与功能初步分析[J];中国生物化学与分子生物学报;2011年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 艾青;人PRR11和FAM33A基因双向启动子的初步鉴定与分析[D];重庆医科大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 潘巍巍;赖国旗;宋方洲;易发平;马永平;左国伟;;构建人乳头瘤病毒关键基因的原核重组载体[J];中国现代医学杂志;2006年21期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 朱金武;钱之玉;关勇彪;;pcDNA3.1/eIF5A真核表达载体的构建及其在真核细胞CCRF-CEM中的表达[J];中国新药杂志;2007年07期
2 段晓燕,金岩,李鑫,金明;mcpr1基因的真核表达载体的构建与鉴定[J];实用口腔医学杂志;2005年01期
3 鲁照明;王莉莉;张爱琴;许培荣;刘红涛;薛乐勋;;Notch1基因C端特征结构域pcDNA3.1-AN真核表达载体的构建[J];郑州大学学报(医学版);2007年02期
4 夏荣;黎燕;林周;沈倍奋;;白细胞介素-6诱导相关新基因LX3的细胞定位研究[J];免疫学杂志;2006年03期
5 郭勇,张西正,李娜,赵红斌,曾强成;人骨形成蛋白2基因克隆及真核表达载体的构建[J];生物医学工程研究;2004年03期
6 唐胜建,王小柯,吕晓杰,刘霞,张鹏,张军,周晓燕;pcDNA3.1/RPs15载体构建及对皮肤成纤维细胞作用的实验研究[J];中华整形外科杂志;2005年01期
7 邓洪波,杨宇,杨进福,唐滔,周文武,刘剑;真核表达载体pcDNA3.1(+)TPA的建立及其在人皮肤成纤维细胞的表达活性(英文)[J];中南大学学报(医学版);2005年04期
8 詹升华,张徽,刘纯;pcDNA3.1/hTSHR真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年04期
9 雷燕;张彦;汪永强;;针对IER3IP1基因的shRNA真核表达载体的构建和鉴定[J];重庆医科大学学报;2009年05期
10 刘四喜,方建培,徐宏贵,陈国华,黄绍良;HLA-E真核表达载体的构建及其在K562细胞中的表达与鉴定[J];中国实验血液学杂志;2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵永波;李钰;王枫;王乔树;张贵寅;关振中;;pcDNA3.1(+)GDNF真核表达载体的构建及其在真核细胞中的表达[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
2 祁澜;孔北华;曲迅;;人MUC1/Y基因真核表达载体的构建及其在COS/7细胞中的表达[A];山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会论文集(上)[C];2004年
3 肖希斌;谢兆霞;;shRNA表达载体逆转K562/A02细胞多药耐药的研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年
4 尹郸丹;梁英民;韩骅;侯丽宏;王耀春;胡兴斌;张萍;康志杰;时宏伟;;RBP-J与KyoT2真核表达载体的构建与鉴定[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
5 郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
6 杨英;刘树铮;;pNEgr-mIL-12真核表达载体的构建及其在体外和体内生物学活性的检测[A];中华医学会放射医学与防护学分会第三次全国中青年学术交流会论文汇编[C];2001年
7 高蕾;张曦;陈幸华;彭贤贵;刘耀;高力;张诚;司英健;王存邦;;VCAM-1真核载体的构建及其在人脐血源基质细胞的表达[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年
8 王郡甫;许晓群;张彩;张建华;高春义;;人白细胞介素21真核表达载体的构建及其在NK92细胞中的表达[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
9 郭鹏;闫承慧;郭亮;康建;韩雅玲;;小鼠E1A激活基因阻遏子RNA干扰表达载体的构建及鉴定[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
10 蔺丽慧;崔玉宝;李莉;;Fcγ-Der f2载体构建及融合蛋白表达[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 吴一福;第四军医大学发现抑癌新基因[N];中国医药报;2008年
2 佘超龙;川籍女大学生血液中发现一新基因[N];科技日报;2004年
3 孙晓素宁习源 黄治才;也可能这种新基因什么作用都没有[N];南方日报;2008年
4 康文远;从口腔中克隆6个新基因[N];健康报;2000年
5 记者贾晓惠 通讯员黄显斌 唐明山;我国首次发现丙型肝炎病毒新基因[N];科技日报;2002年
6 吴志军;肝细胞生成素等人胎肝来源新基因获创新成果[N];科技日报;2006年
7 吴一福;四军医大首次发现人脑抑癌新基因[N];中国医药报;2005年
8 陈勇;美发现影响胚胎发育新基因[N];光明日报;2005年
9 黎明 译;基因治疗:新基因会传给下一代吗[N];科技日报;2002年
10 陈茂梁 朱炜 王跃芳;两个人类白细胞抗原新基因被发现[N];健康报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王小芳;重组肾上腺髓质素真核表达载体的构建及实验研究[D];复旦大学;2004年
2 郭凯文;ASAP3对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响[D];华中科技大学;2011年
3 吴季霖;pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒的制备及抗肿瘤免疫效应研究[D];中南大学;2010年
4 郭军;HCCR-2反义真核表达载体及RNA干涉对肝癌HepG2细胞生物学行为影响的研究[D];第三军医大学;2008年
5 兰欢;新基因PRR11在细胞增殖和细胞周期中功能的研究[D];重庆医科大学;2011年
6 廖婵;抗人CD45亚类新单抗ZCH-6-3A4识别抗原表位的研究[D];浙江大学;2011年
7 袁劲松;肺癌相关新基因的克隆与筛选及新的候选原癌基因OLC1的功能研究[D];中国协和医科大学;2006年
8 孙宇辉;人Ang-2基因真核表达载体的构建及对宫颈癌肿瘤血管形成的影响[D];吉林大学;2004年
9 李健;miR-155真核表达载体的构建及其在胰腺癌中功能的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
10 许贞书;人血液血管细胞生成素对骨髓基质细胞生物学作用的实验研究[D];福建医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 崔涛;肿瘤候选基因PRR11原核、真核表达载体构建、细胞定位及功能的初步研究[D];重庆医科大学;2009年
2 吕平;猪干扰素α、β、γ在293T细胞中的表达研究[D];华中农业大学;2008年
3 宋晖;KAI1基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞侵袭抑制作用的体外研究[D];第四军医大学;2004年
4 左国伟;人乳头瘤病毒11型E6基因的克隆、真核表达及其功能的初步研究[D];重庆医科大学;2005年
5 涂亦娴;猪瘟病毒E2基因的克隆及其DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2005年
6 周丹;猪细小病毒SC1株VP2基因表达载体的构建及其表达的研究[D];四川农业大学;2005年
7 李一冬;hTERT真核表达载体的构建与表达[D];郑州大学;2005年
8 李强;重症肌无力抗乙酰胆碱受体单链抗体A7基因真核表达载体的构建[D];延边大学;2006年
9 王青;新城疫病毒F基因在真核及原核表达系统中的表达[D];西北农林科技大学;2007年
10 许子志;乳腺癌细胞Id1 miRNA真核表达载体构建转染及对MMP9的影响[D];福建医科大学;2009年
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