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《江西医药》 2006年02期
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人表皮干细胞体外分离和培养的研究

邱泽亮  曾元临  辛国华  楼天正  罗旭  
【摘要】:目的建立人表皮干细胞体外分离和培养的技术方法。方法用DispaseⅡ酶和胰蛋白酶两步法分离出角朊细胞和成纤维细胞,并以人成纤维细胞条件培养基为基础制备表皮干细胞培养液,用以人表皮干细胞(Ⅳ型胶原快速粘附法富集分离)的体外培养,通过检测β1整合素和角蛋白19的表达水平及其克隆形成率和克隆维持时间对其进行鉴定,角朊细胞作对照。结果表皮干细胞体外培养,可见细胞呈克隆样生长、β1整合素及角蛋白19免疫组织化学染色呈阳性,且其克隆形成率和克隆维持时间分别为(17.04±1.01%)和15~18d,明显高于对照组的(8.72±0.73%)和9~10d(P0.01)。结论应用Ⅳ型胶原快速粘附法及人成纤维细胞条件培养基,对人表皮干细胞成功进行了体外分离和培养,为表皮干细胞体外的大量扩增奠定了基础。

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 韩雅婷;Nanog基因转染表皮干细胞及对其生物学特性影响的研究[D];西北农林科技大学;2006年
2 罗旭;改良五黄油治疗烧伤创面的实验研究[D];南昌大学;2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 付小兵,李建福,盛志勇;表皮干细胞:实现创面由解剖修复到功能修复飞跃的新策略[J];中华烧伤杂志;2003年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李海红,付小兵,周岗,白晓东,陈伟,朱国俊,蔡存良,孙同柱;人骨髓间充质干细胞体外分离培养、鉴定及标记[J];创伤外科杂志;2005年04期
2 王权胜,唐乾利;表皮干细胞的研究近况[J];中国烧伤创疡杂志;2004年02期
3 李凡,陈开翠,李佩芝;MEBT/MEBO治疗耐药金葡菌感染残余创面87例临床分析[J];中国烧伤创疡杂志;2005年01期
4 刘亦峰;黄金华;周荣芳;刘森;徐刚;周杰;;严重烧伤残余创面MRSA感染的整体化治疗[J];中国烧伤创疡杂志;2007年03期
5 付小兵;进一步重视体表慢性难愈合创面发生机制与防治研究[J];中华创伤杂志;2004年08期
6 付小兵,程飚;创伤修复和组织再生几个重要领域研究的进展与展望[J];中华创伤杂志;2005年01期
7 贾赤宇;重视创面愈合研究提高烧伤救治水平[J];中华烧伤杂志;2003年06期
8 龙剑虹,祁敏,黄晓元,雷少榕,任利成;兔骨髓间质干细胞修复肌腱缺损效果观察[J];中华烧伤杂志;2005年03期
9 刘育杰;赖西南;王正国;黄晖;艾军华;王丽丽;;感觉神经肽P物质特异性受体在表皮干细胞上的表达[J];中华烧伤杂志;2006年03期
10 李海红,付小兵,周岗,费沛,陈伟,白晓东,蔡存良,孙同柱;人骨髓间充质干细胞与汗腺细胞共同培养诱导细胞表型转化的初步研究[J];中华医学杂志;2005年27期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 丁国斌;人胎儿表皮干细胞的分离培养、基因转染及向毛囊的定向分化[D];第四军医大学;2004年
2 周建大;原代成体皮肤角质形成细胞、成纤维细胞的培养和转基因研究[D];中南大学;2004年
3 张宗学;愈创营养油促进大鼠皮肤缺损创面愈合的实验研究[D];辽宁中医药大学;2007年
4 郭永峰;人表皮细胞去分化的实验研究[D];中国医科大学;2007年
5 陶克;人胎儿皮脂腺细胞和汗腺细胞的体外分离培养和人胎儿表皮干细胞向毛囊、皮脂腺和汗腺诱导分化的初步研究[D];第四军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 邱泽亮;人表皮干细胞的分离和培养的研究[D];江西医学院;2005年
2 谢晓繁;成体表皮干细胞分离培养、鉴定及表皮细胞向干细胞方向逆分化的初步研究[D];第四军医大学;2006年
3 刘大勇;山羊皮肤干细胞及绿色荧光蛋白基因转染研究[D];西北农林科技大学;2006年
4 陈刚泉;应用表皮干细胞及脱细胞真皮构建组织工程皮肤及其移植实验研究[D];南昌大学;2006年
5 王俊;玉米幼芽提取物凝胶的制备及其抗皮肤损伤作用的研究[D];西北农林科技大学;2007年
6 王慧君;毛囊培养上清液诱导骨髓间充质干细胞分化的初步研究[D];中国医科大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 洪清琦;杨斌;;表皮干细胞的定位、标记物及其分离培养的研究进展[J];广东医学;2006年01期
2 刘德伍,李国辉,刘德明,刘立强,曹勇;粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用[J];江西医学院学报;2001年03期
3 刘德伍;瘢痕的发病机制和治疗进展[J];中国美容医学;2003年02期
4 张杰,刘伟,丛笑倩,徐展远,马东瑞,滕晓进,崔磊,曹谊林;人表皮干细胞在两种培养体系中生长增殖的比较研究[J];上海第二医科大学学报;2004年04期
5 刘坡;祁少海;谢举临;黄冰;舒斌;徐盈斌;利天增;;两种不同消化方法对表皮细胞表面抗原α_6整合素和转铁蛋白受体表达的干预[J];中国临床康复;2005年46期
6 王要军,孙自勤,权启镇,张南坚,刘晓峰,江学良,潘雪;汉防己甲素对实验性大鼠肝纤维化Ⅳ型胶原及储脂细胞的影响[J];世界华人消化杂志;1994年02期
7 后盾,吴正翔;黄芪、白术对再生障碍性贫血骨髓红系造血祖细胞促增殖作用的实验研究[J];江西中医学院学报;1999年01期
8 孙自勤,王要军,权启镇,张志坚;汉防己甲素与秋水仙碱抗肝纤维化作用的比较[J];中国药理学通报;1996年04期
9 汪德清,沈文梅,田亚平,董振南,刘国廉,孙仲怡,杨素霞,周淑珍;黄芪总黄酮对羟自由基所致哺乳动物细胞损伤的防护作用[J];中国中药杂志;1995年04期
10 黄晖,赖西南,王正国,王丽丽;创伤愈合中P物质对表皮干细胞迁移及受体表达的作用[J];中华创伤杂志;2004年03期
【二级引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 葛秀国;山羊胚胎干细胞的分离与培养[D];西北农林科技大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 李建福,付小兵,盛志勇;人胚胎期表皮干细胞与汗腺发生过程关系的研究[J];中华烧伤杂志;2002年06期
2 赵志力,付小兵,孙同柱,陈伟,孙晓庆;成人正常皮肤和瘢痕组织表皮干细胞定位与表达特征的研究[J];中华烧伤杂志;2003年01期
3 陈希炜,吴军,罗高兴,罗奇志,王锡华,易绍萱,贺伟峰,马兵,王儒鹏,唐进;间接抗原递呈途径在表皮细胞免疫原性中作用的实验研究[J];中华烧伤杂志;2003年01期
4 方利君,付小兵,孙同柱,李建福,程飚,杨银辉,王玉新;骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的实验研究[J];中华烧伤杂志;2003年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 霍龙;张岩;吴应积;;微滴培养技术的新应用[J];生物技术通报;2011年09期
2 吴卫妮;任妮;王志豪;范洁;徐永平;;山羊背根神经节神经细胞的原代培养及鉴定[J];中国兽医科学;2011年09期
3 于国华;孔令玲;曲桂梅;冯国营;姚卫东;林春华;;人肾间质成纤维细胞体外增殖及胶原的合成[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年20期
4 李洪伟;郭开今;周冰;辛兵;陈向阳;葛保健;;人骨髓间充质干细胞体外培养及其生物学特性分析[J];山东医药;2011年26期
5 李玉;但齐琴;习杨彦彬;;成年小鼠海马神经细胞培养及其鉴定[J];昆明医学院学报;2011年06期
6 何懿;栾杰;;PDMS微孔阵列细胞培养实验平台的初步构建与评测[J];组织工程与重建外科杂志;2011年03期
7 庄金秋;梅建国;王文秀;沈志强;;细胞永生化技术及其应用研究进展[J];生命科学研究;2011年04期
8 郭玉萍;赵洪涛;王玮;张世庆;李澜;李恩中;李德雪;;小鼠Bmi1基因的克隆及其在支持细胞中的表达[J];天中学刊;2011年05期
9 李霞云;侯玲玲;王开功;关伟军;马月辉;;精原干细胞研究进展[J];畜牧与兽医;2011年06期
10 卓丽玲;刘宗平;;钙对成骨细胞活性、[Ca~(2+)]_i及GJIC的影响[J];中国兽医学报;2011年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 廖立新;陈刚泉;李国辉;李剑;;以表皮干细胞及脱细胞真皮构建组织工程皮肤[A];第四届全国烧伤救治专题研讨会烧伤感染救治新进展论文汇编[C];2006年
2 王冰梅;葛香连;林程琳;宋颖楠;张彦定;;诱导人表皮干细胞向成釉质细胞分化[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
3 胡葵葵;戴育成;李剑;雷英;袁敬东;李洁;吴琼;;含表皮干细胞组织工程皮肤的构建研究[A];第四届华东六省一市整形外科学术会议暨2007年浙江省整形、美容学术会议论文汇编[C];2007年
4 程树军;黄锦桃;李海标;;ES源性表皮干细胞在腹腔微环境中分化潜能的初步研究[A];中国实验动物学会第六届学术年会论文集[C];2004年
5 周家喜;Ting Xie;段恩奎;;人类和小鼠表皮干细胞的分离与生物学特性研究[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年
6 谢举临;利天增;黄冰;陈系古;祁少海;;应用表皮干细胞构建组织工程皮肤的研究[A];全国烧伤创面处理、感染专题研讨会论文汇编[C];2004年
7 谢举临;利天增;祁少海;黄冰;陈系古;徐盈斌;;体外培养表皮干细胞构建组织工程皮肤的研究[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年
8 周家喜;贾莉玮;刘为敏;刘爽;曹宇静;段恩奎;;Sonic hedgehog维持人胎儿表皮中干细胞增殖的潜在作用[A];第十届全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2005年
9 揭彬;罗向东;伍素华;;人表皮干细胞体外培养及分化特性的研究[A];第七届全国生物力学学术会议论文集[C];2003年
10 赵冬梅;金帆;黄荷凤;;小鼠植入前胚胎GCN5和HDAC1表达模式及体外培养对其表达影响[A];2005年浙江省妇产科学暨计划生育学术会议论文汇编[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 涂端玉 通讯员 陈景荣 钟志勇;巨型老鼠体内注有马骝基因[N];广州日报;2007年
2 蒋明;女教授研究血吸虫创世界之最[N];科技日报;2002年
3 李彬;鼠脑代替人脑[N];科技日报;2004年
4 壮锦;人工培育器官:中国科学家打下坚实基础[N];新华每日电讯;2007年
5 方舟子 留美学者,生物化学博士;“不死的细胞”疑云[N];经济观察报;2007年
6 吴一福;西安交大:用人胎儿软骨细胞培养成功软骨组织工程种子细胞[N];中国医药报;2006年
7 吴一福;四军医大构建HBV全基因克隆质粒细胞系[N];中国医药报;2006年
8 本报记者  张亮;黄禹锡干细胞研究的价值何在[N];科技日报;2005年
9 生物通;Invitrogen公司推出间充质干细胞无血清培养基[N];中国医药报;2008年
10 董良;生物科技赋予“五官”新功用[N];光明日报;2005年
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1 李孝建;鼠表皮干细胞培养体系及构建组织工程皮肤的研究[D];暨南大学;2009年
2 张学明;小鼠精原干细胞培养体系的优化及体外基因转移[D];吉林大学;2005年
3 赵清梅;山羊角膜上皮细胞与角膜内皮细胞分离培养研究[D];西北农林科技大学;2008年
4 赵晓娥;转人t-PA指形区缺失突变体基因山羊体细胞核移植研究[D];西北农林科技大学;2005年
5 孙黎明;繁茂膜海绵原细胞的鉴别、分离纯化和体外培养研究[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2006年
6 刘淑华;以人毛囊外根鞘细胞和成纤维细胞构建皮肤替代物的实验研究[D];华中科技大学;2007年
7 冯贵雪;卵母细胞体外成熟及人胚胎玻璃化冷冻的研究[D];广西大学;2006年
8 王琪;人脐带血间充质干细胞复合β-磷酸三钙的骨组织工程学实验研究[D];第二军医大学;2007年
9 张云松;人脂肪来源干细胞构建组织工程化脂肪组织的体内外实验研究[D];第一军医大学;2007年
10 侯秋莲;应用SSH技术研究氧化胁迫下细粒棘球蚴基因的表达[D];新疆大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 丁月红;IL-1β对体外培养小鼠早期胚胎发育的影响[D];昆明医学院;2004年
2 蔡琳琳;鸡胚原始生殖细胞体外培养及其诱导分化的研究[D];扬州大学;2005年
3 吴洪;鸡精原细胞分离纯化与体外初步培养[D];扬州大学;2006年
4 吴庆侠;山羊子宫内膜基质细胞的分离培养[D];西北农林科技大学;2006年
5 高美丽;人胎儿角膜上皮细胞的体外培养和性质鉴定[D];青岛大学;2009年
6 白文芳;低频电磁场对两种不同支架培养的表皮干细胞增殖的影响[D];暨南大学;2009年
7 赵红岩;不同添加成分对冻融后人原始卵泡体外培养的研究[D];郑州大学;2010年
8 李伟;山羊表皮干细胞分离纯化的研究[D];西北农林科技大学;2005年
9 顾华;人工皮肤种子细胞体外分离、培养及鉴定的实验研究[D];昆明医学院;2004年
10 蒋杉杉;1α,25-二羟维生素D_3对体外培养大鼠成骨细胞的影响[D];扬州大学;2010年
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