万寿菊RAPD分子标记优化体系的建立
【摘要】：以雄性不育和可育万寿菊及其子代为材料,在PE-2400型PCR仪上进行扩增,通过3次正交试验设计,优化得到了最佳的RAPD反应体系,确定了各个因素的最佳水平。在20 μL反应体系中,最佳的浓度配比为:10×Buffer中含10．00 mmol·L-1Tris-HCl、50．00 mmol·L-KCl、0．001％gelatin、dNTP0．25 mmol· L-1、TaqDNA聚合酶1．5 U、MgCl2 1．25 mmol·L-1、DNA20-60 ng、引物0．60 pmol·μL-1,预变性时间5 min, 退火温度37℃较好,1 min的延伸时间也满足了2 kb以下的DNA片段合成,循环35次能得到较好的 RAPD图谱。
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