酶联免疫法检测MTHFRC677T位点基因多态性

姚群峰宁勇吴晓明周宜开

【摘要】：目的建立一种基于错配杂交及酶联免疫检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将两条地高辛标记的探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后显色检测,根据两条探针的吸光度值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果三种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

【作者单位】：湖北中医学院医学检验与技术系湖北中医学院医学检验与技术系华中科技大学同济医学院公共卫生学院华中科技大学同济医学院公共卫生学院
【关键词】： 亚甲基四氢叶酸还原酶 基因多态性 酶联免疫法
【基金】：湖北省教育厅优秀中青年项目,[Q200516001]
【分类号】：Q78
【正文快照】：

亚甲基四氢叶酸还原酶催化5,10-亚甲基四氢叶酸还原为5-亚甲基四氢叶酸,是一种调节叶酸和蛋氨酸代谢的限速酶。MTHFR基因定位于染色体1p36·3[1],包含有11个外显子和10个内含子。研究发现MTHFR具有基因多态性,较为常见的多态位点是C677T,即在677位点发生C→T颠换,导致其编码的

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