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《华中农业大学学报》 2011年05期
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苏云金芽胞杆菌质粒p26复制功能区的克隆

季思思  朱义广  彭东海  阮丽芳  孙明  
【摘要】:利用特异引物从基因组BAC文库筛选到1个35kb的片段,对该片段测序比对分析发现可能含有p26的复制区。为了验证该片段中是否含有p26的复制区,首先,将大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT304用EcoRⅠ酶切切掉苏云金芽胞杆菌复制子后自连,获得复制子克隆载体pHT304E;随后,将12kbEcoRⅠ片段亚克隆到载体pHT304E上电转化无晶体突变株BMB171,获得具有抗性的转化子,证明该片段具有复制功能。缺失实验证明最小复制功能区包含2个必需的ORF。经过40代无抗培养,最小复制区复制稳定性达到90%以上。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 巫益鸣;阮丽芳;彭东海;刘国强;孙明;;苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1518的插入突变体库的构建及芽胞萌发突变株的筛选[J];华中农业大学学报;2010年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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2 周耘冰;何志学;;细菌芽孢:自然界抗性最强的生命体[J];陕西师范大学学报(自然科学版);2006年S1期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要报纸全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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3 武兆宇;北极海冰及胶州湾沉积物中细菌新型质粒的筛选、序列分析以及性质研究[D];山东大学;2010年
4 胡伶俐;牛杀菌—通透性增加蛋白和防御素基因融合质粒的构建及其在大肠杆菌中表达[D];华中农业大学;2010年
5 胡伶俐;牛杀菌—通透性增加蛋白和防御素基因融合质粒的构建及其在大肠杆菌中表达[D];华中农业大学;2010年
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9 田海山;酸性成纤维细胞生长因子发酵工艺的优化[D];吉林大学;2007年
10 高卓;侧脑室注射质粒pLXSN介导Bcl-2基因对大鼠脑梗塞及BDNF影响的研究[D];中国医科大学;2004年
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