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镍化磁性琼脂糖凝胶微球的制备及其在蛋白纯化中的应用研究

梁媛媛  张海利  杨鲁萍  焦艳华  
【摘要】:以自制磁性琼脂糖微球为基质,环氧氯丙烷为活化剂,亚氨基乙二酸作为螯合剂,制备了表面螯合Ni 2+的磁性凝胶微球(Mag-Agarose-Ni).IR结果表明Ni 2+成功螯合到了磁性凝琼脂糖胶微球上;SEM结果显示在螯合Ni 2+后,Mag-Agarose-Ni形貌没有发生明显变化,且平均粒径为23μm;原子吸收光谱结果表明MagAgarose-Ni表面螯合的Ni 2+的量为2.12×10-5 mol/mg;磁性能测试表明Mag-Agarose-Ni具有超顺磁性,其磁饱和强度为20.8emu/g,具有良好的磁响应性.将Mag-Agarose-Ni用于六聚组氨酸融合蛋白K8的纯化研究,SDS-PAGE结果表明Mag-Agarose-Ni较市售Ni-NTA对K8具有更优的亲和分离效果,经15min的孵育后,Mag-Agarose-Ni对K8的吸附容量可达到8.8μg/mg.

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