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《湖南师范大学自然科学学报》 2016年06期
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锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性比较

彭治桃  蒋国民  邹利  李金龙  程小飞  房丽娟  王晓清  刘丽  
【摘要】:为研究锦鲫Clock基因表达量分析中的内参基因稳定性,采用qRT-PCR技术进行实时荧光定量分析,并用Ge Norm和Norm Finder软件对5个内参基因(RPL13,GAPDH,18 S rRNA,β-actin和RPS29)进行稳定性评估,筛选出不同组织中最适合的内参基因,以准确定量Clock基因的相对表达水平.实验结果表明,5个内参基因中,18 S rRNA在锦鲫的肌肉、心脏、肝脏中表达最稳定,β-actin在肠中表达最稳定,RPL13在肾中表达最稳定;根据筛选的内参基因定量Clock基因的相对表达水平发现,Clock基因在锦鲫肌肉中相对表达量最高,其次依次是肝脏、肾、肠,心脏中最低.本研究准确定量Clock基因,为锦鲫生物钟节律机制的下一步研究奠定了理论基础.
【作者单位】湖南农业大学动物科学技术学院;湖南省水产原种场;湖南省水产科学研究所;中南大学基础医学院;
【关键词】内参基因 qRT-PCR 锦鲫 Ge Norm程序 Norm Finder程序
【基金】:国家自然科学基金资助项目(31372530)
【分类号】:S917.4;Q78
【正文快照】:
实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术因具有灵敏度高、重复性好以及定量准确等优点,被广泛用于生物科学的各个研究领域.但这一技术能否准确定量取决于很多因素,如实验材料质量、RNA质量、c DNA第一链合成效率及内参基因的选择[1].其中,选择合适的内参基因对试验数据进行校正和标准化

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