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《华南农业大学学报》 2011年01期
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猪α干扰素基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达

刘健  陈瑞爱  刘珊珊  朱杰仪  唐明森  罗满林  
【摘要】:根据毕赤酵母Pichia pastoris表达系统对于密码子的偏嗜性,将去除信号肽的猪α干扰素(PoIFN-α)基因重新设计改造并合成一段新的核苷酸序列,置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体,电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中,经Zeoc inTM抗性筛选后获得大量多拷贝重组子,SDS-PAGE和W estern-b lot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出相对分子质量约为19 000的PoIFN-α特异蛋白,其有效蛋白表达量较高达54.105 mg/L.经Vero-VSV系统测定,PoIFN-α效价达到5.87×107U/L.试验将PoIFN-α成熟肽全基因密码子进行改造,并实现了其在毕赤酵母菌表达系统中的高效分泌表达.

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前2条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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10 李绍祥;携蜂毒素基因腺病毒载体的构建及体外抑瘤实验研究[D];第二军医大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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8 张佳瑜;软化芽孢杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶在毕赤酵母和枯草杆菌中的表达[D];江南大学;2010年
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10 韩笑;黑曲霉β-葡萄糖苷酶的基因克隆与表达研究[D];中南林业科技大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沈阳;萧允艺;徐元博;;基因克隆研究方法综述[J];安徽农学通报(上半月刊);2012年01期
2 汤仁树;赵俊;王明丽;;重组猪α干扰素理化性状及其体外抗病毒活性研究[J];安徽农业科学;2010年08期
3 苏世云;夏俊保;赵俊;吴琼;王明丽;;重组猪干扰素α的纯化工艺研究[J];安徽农业科学;2010年14期
4 谢海燕,郭霄峰;猪α-干扰素基因的分子克隆与序列分析[J];动物医学进展;2002年06期
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6 黄良宗;张婧琳;王淑敏;司兴奎;马春全;顾万军;;猪β干扰素基因17位丝氨酸突变体重组酵母表达载体的构建[J];佛山科学技术学院学报(自然科学版);2011年04期
7 陈颖;沈敏;刘宝林;;包涵体蛋白纯化方法的探讨[J];放射免疫学杂志;2011年01期
8 王朝文;吴润;王一成;袁秀芳;徐丽华;李军星;路斌;;大肠杆菌LTB增强PRRSV-GP5蛋白免疫反应的研究[J];甘肃农业大学学报;2010年06期
9 曲建慧;张玲霞;;干扰素的分子生物学机制研究进展[J];国际流行病学传染病学杂志;2006年01期
10 李晓阳;郭学青;;人β干扰素基因定点突变及在sf9细胞中的表达和活性研究[J];国际检验医学杂志;2010年10期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谢海燕,郭霄峰;猪α-干扰素基因的分子克隆与序列分析[J];动物医学进展;2002年06期
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6 陈涛,于瑞嵩,刘惠莉,李震,曹祥荣;重组猪α干扰素基因定点突变及在大肠杆菌中的表达[J];生物工程学报;2002年03期
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【相似文献】
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1 曹永长,吕英姿,毕英佐;鸡α干扰素基因的克隆和鉴定[J];中国预防兽医学报;2001年04期
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7 梁重阳;张淑芹;刘志屹;孙非;;灵芝免疫调节蛋白(Lz-8)在毕赤酵母中的表达及其免疫活性鉴定(英文)[J];生物工程学报;2009年03期
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9 宋庆凤;暴立娟;李杰;;新型毕赤酵母分泌表达载体的构建与功能验证[J];东北农业大学学报;2009年07期
10 陈国华;贾怀杰;曾爽;房永祥;李小庆;景志忠;才学鹏;;猪IL-2基因在毕赤酵母中的高效表达及生物活性分析[J];畜牧兽医学报;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘健;陈瑞爱;朱杰仪;唐明森;罗满林;;猪干扰素-α基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
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5 曹永长;吕英姿;毕英佐;;鸡α干扰素基因的克隆和鉴定[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
6 王云霞;蒋春雷;;阿片受体介导α干扰素致热作用[A];中国生理学会肥胖的临床与基础暨神经免疫内分泌学术研讨会论文摘要汇编[C];2003年
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5 凌爱龙;孩子得了病毒性肝炎怎么办?[N];中国中医药报;2003年
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9 本报记者刘福兴;“非典”点燃干扰素战火[N];中国经营报;2003年
10 吴杨 杨苏河;合理使用干扰素[N];医药经济报;2001年
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9 杨珺;重组人白细胞介素24的表达及其生物学活性鉴定[D];重庆大学;2005年
10 杨晓峰;IFN α A-HBV Pre-S融合基因克隆及在大肠杆菌中的表达[D];第四军医大学;1996年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 杨凯;HBV及其抗原成分拮抗α干扰素抗病毒活性的初步研究[D];安徽医科大学;2010年
3 郭芝光;葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆及转基因番茄、酵母表达系统的建立[D];西北大学;2006年
4 盛祖勋;印第安纳型水泡性口炎病毒RT-PCR检测方法的建立及核衣壳蛋白重组抗原的表达[D];扬州大学;2005年
5 谷新晰;人源弹性蛋白酶2B基因的克隆及其原核、真核载体构建和表达[D];河北农业大学;2009年
6 郭贺;肿瘤坏死因子及白细胞介素-10单核苷酸多态性对干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效的影响[D];第二军医大学;2004年
7 王俊丽;鸡α干扰素(ChIFN-α)的克隆和原核表达[D];山西医科大学;2010年
8 张树军;人Neuritin毕赤酵母表达系统的构建及表达产物的功能研究[D];石河子大学;2007年
9 苏丁丁;鹌鹑α-干扰素及热休克蛋白HSP70 cDNA克隆与表达[D];湖南农业大学;2007年
10 金慧;β-1,4-半乳糖基转移酶在毕赤酵母中的克隆、表达及活性测定[D];浙江大学;2005年
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