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《华北农学报》 2011年S2期
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鲫鱼肝细胞分离与原代培养方法的优化

贾睿  曹丽萍  丁炜东  杜金梁  徐跑  殷国俊  
【摘要】:通过不同的分离方法和培养条件探索鲫鱼肝细胞的原代培养,以建立稳定的鲫鱼肝细胞原代培养模型。用台盼蓝染色检测细胞存活率;用WST-1检测细胞活力,同时观察长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果显示:组织块培养4~5 d后肝细胞从组织块中迁出并增殖,但这种方法所需时间长且细胞不易收集;机械分散法收集的细胞少,细胞存活率低;而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的分离和培养效果。用0.1%胰蛋白酶消化30 min,每克肝重可收集1.47×108个细胞,平均存活率为91.43%。培养基和血清浓度均会影响肝细胞的贴壁和生长。在含有10%(V/V)胎牛血清(FCS)M199培养基中,4%CO2、28℃,肝细胞培养8~9 d后传代。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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9 景毅;条斑星鲽(Verasper moseri)卵巢细胞系的建立及几种内分泌干扰物对其生殖与遗传毒性作用的研究[D];中国海洋大学;2010年
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国重要报纸全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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9 李世军;胸腺五肽的化学—酶法合成及其脂质体缓释剂型研究[D];吉林大学;2008年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗灿;激肽释放酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶联产工艺的研究[D];四川大学;2007年
2 张亮亮;胃蛋白酶、胰蛋白酶对大豆凝集素稳定性的影响[D];吉林农业大学;2007年
3 王文亮;黄粉虫氨基酸保健口服液的研究[D];山东农业大学;2006年
4 张辉;太平洋牡蛎(Crassostrea gigas Thunberg)中氨基酸和寡肽的提取及活性初步研究[D];中国海洋大学;2005年
5 赵密锋;利用一种新颖的化学法合成细胞粘附三肽RGD和胰酶催化合成Bz-RGD-(OEt)_2[D];吉林大学;2006年
6 刘芬;基于富勒烯(C_(60))构建新型荧光探针用于生物活性物质的检测[D];山东师范大学;2009年
7 耿莉娜;鲫鱼和黄鳝肝胰脏中胰蛋白酶的纯化、性质及蛋白分解活性的比较研究[D];重庆师范大学;2008年
8 杨锋;鲫鱼肝胰脏中胰蛋白酶和胰凝蛋白酶的分离纯化及性质研究[D];集美大学;2009年
9 张强;不同组合益生菌对鲫鱼生长性能、免疫功能及肠道菌群结构影响研究[D];四川农业大学;2010年
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