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《基因组学与应用生物学》 2017年01期
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实验兔骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定

马笃军  彭力平  王立新  余阗  裴军宇  李明华  徐宁达  肖伟  
【摘要】:探讨建立兔骨髓间质干细胞(BMSCs)的体外分离纯化、扩增和鉴定的方法,为BMSCs的进一步诱导分化和应用奠定基础。首先抽取兔髂骨骨髓,采用Percoll密度梯度离心法得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁细胞,经胰蛋白酶消化后传代培养扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长状态,细胞免疫组化检测CD73、CD34。结果表明,成功建立了兔BMSCs体外分离及培养扩增的方法,发现BMSCs表现贴壁生长,P0代时呈集落生长,细胞呈梭形,传代后细胞增殖速度加快,形态开始多样化;细胞免疫组化显示BMSCs表达CD73,未表达CD34,反复传代后CD73表达效率增高。上述研究表明,Percoll密度梯度离心联合骨髓贴壁法,能有效分离、纯化和扩增BMSCs,提取的细胞具有BMSCs的生长特性和抗原表型,其中P3~P6代细胞增殖能力强,可用于进一步的研究工作。
【作者单位】广州中医药大学深圳临床医学院;深圳北京大学香港科技大学医学中心生物医学研究所;广州中医药大学深圳医院;
【关键词】骨髓间充质干细胞 细胞培养 密度梯度离心法
【基金】:深圳市科技计划(卫生系统)科研项目(项目编号:201302124) 深圳市福田区卫生公益性科研项目(项目编号FTWS201318)共同资助
【分类号】:R329.2
【正文快照】:
Isolation,Culture and Identification of Bone Marrow Mesenchymal StemCells of Experimental RabbitMa Dujun1Peng Liping1*Wang Lixin1Yu Tian1Pei Junyu1Li Minghua2Xu Ningda3Xiao Wei11 The Shenzhen Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM,Shenzhen,51

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