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《国际遗传学杂志》 2006年02期
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BI-1作为酵母双杂交系统诱饵的载体构建

刘珊珊  陈香梅  李蒙  李钰  
【摘要】:目的研究BI-1完整编码区能否在酵母细胞中表达,排除自身激活作用,并验证它能否用于酵母双杂交系统。方法以人正常肺组织cDNA为模板,扩增BI-1完整编码区,经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切后克隆到酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7上,构建诱饵蛋白载体pGBKT7-BI-1,转化酵母细胞,通过β-半乳糖苷酶活性分析验证有无自激活,Western印迹验证其表达。结果DNA测序显示BI-1编码区内无突变,β-半乳糖苷酶活性分析显示转入pGBKT7-BI-1和阴性对照的酵母菌落没有激活报告基因LacZ,而阳性对照菌落呈现蓝色。结论含有BI-1完整编码区的诱饵载体不存在自身激活作用,并能在酵母细胞中表达BI-1蛋白,能够应用于酵母双杂交系统筛选相互作用蛋白。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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2 吴启进;金亚美;李勉;刘金明;王小波;石火英;林矫矫;;酵母双杂交诱饵蛋白日本血吸虫抱雌沟蛋白重组质粒的构建及鉴定[J];中国动物传染病学报;2010年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 杨红;应用酵母双杂交系统研究甘蓝自交不亲和决定因子的相互作用[D];西南大学;2011年
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李彦锋;重组鼠精子抗原疫苗株的构建及其避孕效应研究[D];第三军医大学;2001年
2 葛秀春;水稻与白叶枯病菌互作中活性氧与过敏性细胞死亡相关因子的研究[D];浙江大学;2003年
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10 王晓杰;小麦与条锈菌互作机理研究及抗条锈相关基因的功能分析[D];西北农林科技大学;2009年
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1 李清贤;一个水稻花药特异表达基因的克隆及初步分析[D];福建师范大学;2010年
2 郑玲;棉花BI基因的克隆和功能分析[D];山东师范大学;2011年
3 叶岚;抗凋亡基因抑制酵母冷诱导的细胞凋亡及其调控机制[D];浙江大学;2006年
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10 管兰芳;盐胁迫对飞廉悬浮细胞生长和黄酮类物质合成的影响及其机理研究[D];浙江工商大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 张林;沃兴德;;酵母蛋白质组研究进展[J];浙江中医药大学学报;2007年02期
3 蓝兴国;解莉楠;于晓敏;李玉花;;羽衣甘蓝自交不亲和系的选育及S_(13b)单倍型的鉴定[J];北京林业大学学报;2006年S2期
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5 崔红军;张军杰;黄玉碧;;玉米根部酵母双杂交cDNA文库的构建及评价[J];分子植物育种;2008年01期
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7 段素素;张云;王树惠;刘力;;酵母三杂交技术的应用策略及在病毒研究中的应用[J];国际病毒学杂志;2006年02期
8 臧炜;曹建平;;血吸虫雌雄合抱及其意义[J];国际医学寄生虫病杂志;2006年02期
9 杨英军;李亚蝉;;苦瓜MAP30基因的克隆与载体构建[J];华北农学报;2008年03期
10 张莉;黄倢;;酵母双杂交系统的改进与研究进展[J];海洋湖沼通报;2006年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 杨洋;甘蓝SI决定因子的原核表达和相互作用研究以及SI相关基因的探讨[D];西南大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 王景龙;屈海龙;杨延玲;孙春辉;王秀然;郎需龙;李晓艳;卜昭阳;王兴龙;;羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株的构建及鉴定[J];中国生物制品学杂志;2011年06期
2 刘萍萍;石艳丽;杨云霞;刘金明;林矫矫;金亚美;;利用RNAi和表达谱芯片分析日本血吸虫Sj34.9基因的功能[J];中国血吸虫病防治杂志;2012年02期
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1 刘萍萍;日本血吸虫抱雌沟蛋白相互作用分子的鉴定及两个相关蛋白的研究[D];中国农业科学院;2011年
2 赵香丽;MYOZ1基因在肌纤维发育中功能的初步研究[D];华中农业大学;2011年
3 王景龙;布鲁氏菌感染巨噬细胞cDNA文库构建及互作蛋白的筛选鉴定[D];吉林大学;2012年
【相似文献】
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1 张美红;周克元;;进化中保守的凋亡抑制因子Bax inhibitor-1[J];肿瘤防治研究;2007年07期
2 刘敏;张伟;陈天艳;蔺淑梅;刘锦锋;叶峰;赵英仁;张树林;;HCV核心蛋白在酵母双杂交系统中的表达及自激活作用检测[J];第四军医大学学报;2006年03期
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4 刘萍;宋安萍;马丁;;硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ诱饵质粒的构建和检测[J];华中医学杂志;2007年06期
5 陈碧;刘新光;郑慧玲;梁景耀;梁念慈;;蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白NADH脱氢酶4的筛选[J];中国热带医学;2009年08期
6 王新兴;杨志华;刘晓华;郭东升;钱令嘉;;核转录因子TR3及其缺失突变体在酵母双杂交系统中转录激活作用的检测[J];中国应用生理学杂志;2008年04期
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8 邓友平,肖培根;神经酰胺和细胞凋亡[J];国外医学.遗传学分册;1997年01期
9 梅立新,张旭晨,李洪燕;细胞凋亡[J];河北医学;1997年03期
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 黄小琼;饶子亮;刘盛来;钟志勇;王刚;严家荣;陈系古;;已烯雌酚对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢细胞凋亡的影响[A];实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会论文汇编[C];2009年
4 王首帆;戴杏;雷铁池;徐世正;;Dct基因敲除增强抗Ro/SSA血清注射小鼠UVA诱导表皮细胞凋亡[A];中华医学会第十五次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2009年
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10 李盛华;姚正凯;;激素性股骨头坏死细胞凋亡的实验研究进展[A];第十四届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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10 记者张建松;治疗癌症新途径:细胞凋亡疗法[N];科技日报;2002年
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3 童炎岳;肾缺血再灌注损伤内皮素与细胞凋亡研究及氨基酸的保护作用[D];浙江大学;2002年
4 李维婷;伴放线放线杆菌诱导T淋巴细胞通过Fas-FasL途径的细胞凋亡的研究[D];吉林大学;2004年
5 钟荣德;生长抑素和生长激素对重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响[D];第一军医大学;2004年
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7 李恭贺;水牛卵巢卵泡颗粒细胞凋亡的生物学特征[D];广西大学;2005年
8 余丹丹;两株H5N1亚型禽流感病毒诱导的细胞凋亡研究[D];南京农业大学;2005年
9 刘萌;活体细胞凋亡核素检测技术的实验研究[D];北京大学;2005年
10 刘斌;土槿乙酸的抗肿瘤作用及其作用机制研究[D];河北医科大学;2005年
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