收藏本站
《广东农业科学》 2011年20期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

新城疫病毒F48E9株F-HN蛋白融合基因在毕赤酵母中的表达

郭建军  范汉东  杨一兵  罗成  
【摘要】:利用重叠PCR技术拼接新城疫病毒F蛋白基因和HN蛋白基因,并将构建好的融合基因克隆到载体pET28a,经测序后融合基因插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOXⅠ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白F-HN。重组质粒pPIC9K-F-HN经SacⅠ线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,经G418筛选得到转化子。PCR扩增鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,目的蛋白为分泌性表达,分子量约为86.5 ku;Western-blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫反应性,为下一步研究高效亚单位基因工程苗奠定基础。

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 潘志明,焦新安,张小荣,张晓明,黄金林,万洪全,刘秀梵;运送鹅源新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌及其免疫原性[J];农业生物技术学报;2004年04期
2 李太元,殷震,金宁一,丁壮,王兴龙;新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达[J];中国生物制品学杂志;2002年06期
3 闻晓波;闫丽辉;曹殿军;刘培欣;刘春国;步志高;;新城疫病毒F_(48)E_9株M NP F和HN基因的真核表达[J];中国兽医科学;2006年06期
4 陈亚波;徐程;张桂芝;方维焕;;新城疫病毒HN蛋白抗原表位分析及结构域基因原核表达[J];中国预防兽医学报;2007年01期
5 张桂芝;陈亚波;徐程;张朝政;方维焕;;新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2006年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 焦凤超;焦新安;潘志明;黄金林;张小荣;刘秀梵;;减毒鼠伤寒沙门氏菌介导的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的实验免疫效果研究[J];病毒学报;2006年01期
2 潘志明,焦新安,黄金林,殷月兰,唐丽华,张辉,张晓明,张小荣,刘秀梵;携带新城疫病毒DNA疫苗的鼠伤寒沙门氏菌及其安全性与免疫效力[J];微生物学报;2005年06期
3 陈亚波;徐程;张桂芝;方维焕;;新城疫病毒HN蛋白抗原表位分析及结构域基因原核表达[J];中国预防兽医学报;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 潘志明;焦新安;黄金林;唐丽华;张晓明;张小荣;刘秀梵;;携带新城疫病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)[C];2004年
2 潘志明;焦新安;黄金林;殷月兰;唐丽华;张辉;张晓明;张小荣;刘秀梵;;携带新城疫病毒DNA疫苗的鼠伤寒沙门氏菌及其安全性与免疫效力[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 潘志明;重组减毒细菌运送CD8~+T细胞表位的机理及携带新城疫病毒DNA 疫苗鼠伤寒沙门氏菌的免疫生物学特性研究[D];扬州大学;2004年
2 徐引弟;猪霍乱沙门氏菌C500株crpˉ、asdˉ缺失株平衡致死系统的构建及应用[D];华中农业大学;2006年
3 王学理;新城疫病毒TL1株全基因组序列特性分析及HN蛋白基因的促融合表达研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 焦凤超;减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒口服DNA疫苗的免疫效力研究[D];扬州大学;2005年
2 陈亚波;新城疫病毒HN蛋白与F蛋白结构域共表达对细胞融合的影响[D];浙江大学;2006年
3 唐丽华;稳定携带H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌构建与鉴定及其免疫生物学特性研究[D];扬州大学;2006年
4 王贺民;鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗(La Sota株+N28株+SD696株)的研制[D];扬州大学;2006年
5 胡拥军;农杆菌介导新城疫病毒Lasota株HN基因在苜蓿表达研究[D];西南大学;2007年
6 密金玲;新城疫(ND)核酸菌蜕疫苗的构建及免疫效果评价[D];西南大学;2007年
7 贺笋;基因修饰的鸡新城疫病毒F_(48)E_9株HN基因DNA疫苗的构建及其免疫效力的评价[D];新疆农业大学;2007年
8 崔平福;新城疫病毒融合蛋白高效表达及其特异性单克隆抗体的研制和初步应用[D];扬州大学;2007年
9 程宁宁;减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感病毒DNA疫苗与灭活疫苗联合应用研究[D];扬州大学;2007年
10 藏玉婷;鹅副粘病毒HN及F基因在昆虫杆状病毒表达系统的表达[D];东北农业大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王志玉,王战勇,于修平;糖化作用对新城疫病毒HN糖蛋白功能的影响[J];病毒学报;2002年02期
2 郝勤宗,李占雷,侯艳红,张会铭,闫广强;新城疫热稳定性天然弱毒株B95免疫效果的研究[J];河北农业大学学报;2001年01期
3 宋长绪;新城疫病毒的分子生物学[J];动物医学进展;1998年01期
4 戴勇,徐卓佳,李体远;人EPO-Linker-EGFP融合蛋白的设计和生物活性预测[J];广东医学;2004年11期
5 王福祥,孙永涛,孙永年,徐哲,刘娟,王临旭;中国株HIV-1 gag基因核酸疫苗免疫小鼠的实验研究[J];解放军医学杂志;2004年05期
6 王学理;武迎红;丁壮;;鹅源禽副粘病毒NA-1株生物学特性的研究[J];吉林农业大学学报;2006年01期
7 潘志明,焦新安,张小荣,张晓明,黄金林,万洪全,刘秀梵;运送鹅源新城疫病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌及其免疫原性[J];农业生物技术学报;2004年04期
8 李太元,金宁一,丁壮,王兴龙,金扩世,吕杰,米志强,殷震;新城疫病毒F_(48)E_8株HN基因的克隆和序列分析及与国外NDV HN基因的同源性比较[J];中国生物制品学杂志;2001年02期
9 李太元,殷震,金宁一,丁壮,王兴龙;新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达[J];中国生物制品学杂志;2002年06期
10 金扩世,金宁一,王兴龙,丁壮,郭志儒,王宏伟,殷震;新城疫病毒弱毒疫苗的免疫研究[J];动物科学与动物医学;2000年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 丁壮;新城疫病毒HN蛋白基因的克隆、序列分析、表达及其免疫原性研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 左颖;孙德君;郑德福;姜丽萍;;鸡新城疫基因工程疫苗的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2011年11期
2 姜宁朋;胡北侠;;国内外新城疫相关专利申请现状分析及未来策略[J];中国家禽;2011年13期
3 焦子珍;;老鸡场控制新城疫发病的对策[J];乡村科技;2010年07期
4 李荣誉;;蛋鸡新城疫与低致病性禽流感发病特点与防控对策[J];北方牧业;2011年11期
5 刘彦威;王斌;刘娜;刘利强;林燕;;冬虫夏草菌丝体水提物的抗新城疫病毒作用[J];河北工程大学学报(自然科学版);2011年02期
6 陶静;叶红;;新城疫F蛋白基因工程疫苗的研究现状[J];安徽农业科学;2011年17期
7 赵坤;李任峰;赵朴;赵恒章;常新耀;;新城疫病毒单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[J];河南农业大学学报;2011年04期
8 杨霞;汪德生;鲜思美;胡永清;;免疫鸡群发生新城疫的诊断[J];贵州畜牧兽医;2011年04期
9 肖传飞;葛铭;张瑞莉;;间接免疫荧光技术研究黄芪多糖体外抗新城疫病毒作用[J];中国兽医杂志;2011年07期
10 于杨;崔佳莹;丁晴微;崔鹏飞;李印;邓国华;任涛;陈化兰;;新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备[J];中国畜牧兽医;2011年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孟春春;仇旭升;徐丹;陈鸿军;于圣青;丁铲;;两株ClassⅠ新城疫病毒的全基因组序列测定及分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
2 刘华雷;陈云霞;管峰;郑东霞;赵云玲;王志亮;;Class I新城疫病毒反向遗传操作系统建立[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 孙英杰;陈鸿军;詹媛;仇旭升;于洋;宋翠萍;于圣青;丁铲;;新城疫病毒CLASSI强毒株磷蛋白的表达及细胞内定位[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
4 于洋;仇旭升;徐丹;詹媛;陈鸿军;于圣青;丁铲;;ClassⅠ和ClassⅡ新城疫病毒微型基因组的构建及比较[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
5 徐玲霞;刘梅;程旭;周生;韦玉勇;戴亚斌;;鸭源新城疫病毒强毒株P基因及V蛋白的遗传分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
6 胡静涛;杨文涛;肖冲;王泽;丁壮;王春凤;;GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 鲁会军;金扩世;韩松;金宁一;;猪源新城疫病毒JL01株分离鉴定及F基因遗传进化分析[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
8 张蕊;蒲娟;苏敬良;赵继勋;王晓婷;张守平;李晓娇;张国中;;新城疫病毒国内分离株的序列测定与分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
9 曹殿军;;新城疫病毒的检测和分型技术研究与发展趋势[A];中国畜牧兽医学会2003年学术年会论文集[C];2003年
10 张太翔;田国宁;张金玲;韩光来;田国华;韩亮;张丽萍;孙军;;鸭新城疫病毒山东分离株F基因的克隆和序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 惠岭;鹧鸪新城疫咋防治[N];河北农民报;2006年
2 吕纪增;鹧鸪新城疫的防治[N];中国畜牧兽医报;2006年
3 河北省辛集市畜禽科技服务中心 肖亚彬 任灵霞 梁剑峰;蛋鸡传喉和新城疫混合感染[N];江苏农业科技报;2006年
4 郑安明;美国研制成功新一代新城疫疫苗[N];中国国门时报;2006年
5 中国科学技术信息研究所;墨西哥育出新城疫疫苗玉米[N];农资导报;2006年
6 清苑职教中心 张俊杰;当前流行鸡病好难治[N];河北农民报;2006年
7 邢台市兽医院 邢兰君;治蛋鸡新城疫和肾传支混合感染中西医结合疗效好[N];河北农民报;2007年
8 老贵;家禽传染病的新特点[N];云南科技报;2008年
9 程鸿飞 崔京华 江娜;中国新型禽流感疫苗诞生记[N];农民日报;2005年
10 山东省农科院 张秀美;近期鸡新城疫流行特点与原因分析[N];中国畜牧兽医报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡海霞;表达C亚型禽偏肺病毒糖蛋白和融合蛋白的重组新城疫病毒二价苗的构建及免疫效力评价[D];吉林大学;2011年
2 刘培欣;新城疫病毒单克隆抗体制备及部分NP蛋白抗原表位鉴定分析[D];东北农业大学;2011年
3 丁壮;新城疫病毒HN蛋白基因的克隆、序列分析、表达及其免疫原性研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
4 耿捷;基因芯片检测新城疫病毒和PCR结合内切酶分析鉴别新城疫强弱毒株的研究[D];西北农林科技大学;2004年
5 蔡丽娅;临床新城疫病毒分离鉴定及F蛋白单克隆抗体的研制与应用[D];扬州大学;2009年
6 程相朝;新城疫病毒地方株分子流行病学调查及其疫病控制[D];南京农业大学;2003年
7 孙蕾;外源基因插入不同复制非必需区影响重组鸡痘病毒抵抗母源抗体干扰的能力[D];扬州大学;2005年
8 王云峰;表达多种外源基因的鸡痘病毒载体疫苗构建及免疫学评价[D];中国农业科学院;2005年
9 宋战昀;鹅源副粘病毒和鸡新城疫病毒宿主受体差异的分子机制研究[D];吉林大学;2008年
10 闻晓波;新城疫病毒样颗粒的构建及其出芽机制的研究[D];中国农业科学院;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 曲鲁江;新城疫病毒单克隆抗体的建立及其遗传变异分析研究[D];新疆农业大学;2001年
2 巩艳艳;抗体免疫选择压作用下新城疫病毒HN基因和F基因的变异[D];山东农业大学;2010年
3 孙委委;两株新城疫病毒分离株全基因组序列的测定及在CEF和鸡胚传代的含量变化分析[D];中国农业科学院;2010年
4 胡北侠;新城疫病毒融合蛋白单克隆抗体的研制[D];扬州大学;2001年
5 梅双双;新城疫病毒野毒株的分离鉴定及其融合蛋白部分序列同源性分析[D];河北农业大学;2002年
6 王海燕;新城疫病毒F_48E_9株接种鸡胚的病理学观察及其P蛋白基因的克隆与表达[D];内蒙古农业大学;2001年
7 米志强;新城疫病毒昌黎株F基因的序列分析、表达及重组病毒免疫原性的研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
8 葛涛;新城疫病毒HN基因抑瘤效应机制的研究[D];中国人民解放军军需大学;2002年
9 邓明俊;新城疫病毒F基因真核表达质粒的构建及动物免疫试验[D];西北农林科技大学;2003年
10 于淼;高分子微球检测新城疫病毒的研究[D];吉林农业大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026