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《动物医学进展》 2014年07期
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布鲁菌环介导等温扩增检测试剂盒的研制

李秀梅  郭恋  梁智选  李颖  郭立力  石瑜  朱雅宁  王红军  
【摘要】:利用环介导等温扩增(LAMP)技术建立布鲁菌的检测方法。通过对反应条件的优化,组装布鲁菌LAMP检测试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价。结果显示,该试剂盒适用于布鲁菌的快速检测,在63℃条件下1h内可检出布鲁菌,其检测限达5copies/μL,特异性为100%,无假阳性和假阴性出现。反复冻融20次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果。对牛奶样品的检测结果显示,阳性检出率为3.33%,与奶牛布鲁菌病PCR诊断技术(NY/T1467-2007)的检测结果相符。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强和稳定性好等特点,可满足大批量样品快速筛选的要求。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
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3 张太翔;凌宗帅;赵立娜;孙涛;徐彪;梁成珠;刘文鹏;孙军;张艺兵;;基于TaqMan探针的牛布氏杆菌实时荧光定量PCR的特异性鉴定[J];中国动物检疫;2011年11期
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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5 陈泽祥;许力干;禤雄标;杨威;胡帅;谢永平;潘艳;;布鲁氏菌病病原快速检测方法的建立[J];广西农业科学;2009年07期
6 朱明东;杨蓉;洪林娣;钟春梅;赵文宇;;胶体金免疫层析法在布鲁氏菌病不同流行地区的现场应用[J];疾病监测;2008年05期
7 邵丰尧;朱匡纪;朱明东;;胶体金免疫层析法在布鲁氏菌病监测地区的现场应用[J];疾病监测;2009年10期
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9 张芳毓;钱爱东;;布鲁氏菌诊断学研究进展[J];吉林畜牧兽医;2011年01期
10 杨莲茹;乌伦吉如嘎;王建明;孙晓智;王军;;奶牛布鲁氏菌病病原PCR检测方法的建立[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2007年02期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
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2 吴斌;王玫;王长文;刘霞;;布鲁氏菌分子生物学快速检测技术的研究[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
3 谢芝勋;谢志勤;刘加波;庞耀珊;邓显文;唐小飞;温娟;;多重PCR快速检测鉴别牛布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌的研究与应用[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
4 张太翔;凌宗帅;赵立娜;孙涛;徐彪;梁成珠;刘文鹏;孙军;张艺兵;;基于TaqMan探针的牛布氏杆菌实时荧光定量PCR的特异性鉴定[A];第3届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2011年
5 张太翔;凌宗帅;赵立娜;孙涛;徐彪;梁成珠;刘文鹏;孙军;张艺兵;;基于TaqMan探针的牛布氏杆菌实时荧光定量PCR的特异性鉴定[A];2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
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2 蔺国珍;布鲁氏菌病LAMP检测方法的建立及双基因共表达分子疫苗研究[D];中国农业科学院;2012年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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2 马琳;人布鲁杆菌病的随访调查和诊断方法研究[D];吉林大学;2011年
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8 杜振昆;奶牛布鲁氏菌的PCR检测与分子分型研究[D];新疆农业大学;2007年
9 杨海荣;常用布鲁氏菌疫苗功能基因序列分析及AMOS检测方法研究[D];内蒙古农业大学;2007年
10 邓海云;柳州市布鲁氏杆菌病调查及综合防控对策探讨[D];南京农业大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李坚;李铁锋;王艾琳;;用PCR法对布鲁氏菌进行筛查及分型鉴定的研究[J];中国地方病防治杂志;2009年04期
2 陈泽祥;许力干;禤雄标;杨威;胡帅;谢永平;潘艳;;布鲁氏菌病病原快速检测方法的建立[J];广西农业科学;2009年07期
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5 陈苏红,王小红,张敏丽,王升启;复合探针荧光定量PCR方法的建立[J];生物技术通讯;2003年02期
6 徐军;陈创夫;刘建平;张辉;王远志;盛金良;曹旭东;王端明;;巢式PCR检测乳中布氏杆菌[J];畜牧与兽医;2008年04期
7 邱昌庆,曹小安,杨春华,周继章,高双娣,程淑敏;乳牛布鲁氏菌病病原DNA快速检测技术的研究[J];中国兽医科技;2005年02期
8 朱战波;周玉龙;朱洪伟;王海波;崔玉东;朴范泽;;流产布氏杆菌的检测及生物型PCR鉴定[J];中国病原生物学杂志;2008年08期
9 杜振昆;郭军庆;张妙仙;项玉燕;周继勇;;牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法的建立[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2008年02期
10 高明华;张志琰;李跃;邓庆华;诺敏;;布鲁氏菌病实验室诊断研究进展[J];中国人兽共患病学报;2010年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨春华;邱昌庆;;布鲁菌外膜蛋白及毒力因子研究进展[J];动物医学进展;2006年10期
2 程千川;曾政;何林;;布鲁菌IF3蛋白的原核表达及鉴定[J];动物医学进展;2007年08期
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4 宫晓炜;周继章;;布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究[J];动物医学进展;2009年12期
5 司瑞;白文涛;张芳琳;刘艳丽;胡刚;吴兴安;阎岩;徐志凯;;布鲁菌核糖体蛋白L7/L12的表达纯化及生物活性鉴定[J];生物技术通讯;2006年06期
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10 郭乾;陈创夫;张辉;王勇;任艳;;牛种布鲁菌virB4基因酵母表达载体的构建[J];黑龙江畜牧兽医;2010年13期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张蕾;几种布鲁菌抗原的免疫学特性研究[D];第四军医大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 胡剑飞;布鲁菌的分离鉴定及omp31基因的克隆和序列分析[D];内蒙古农业大学;2010年
2 杨艳北;猪布鲁菌S2 omp10基因缺失株的构建及其生物学特性[D];吉林大学;2012年
3 苏娇;鉴别牛羊布鲁菌实时荧光定量PCR方法的建立[D];内蒙古农业大学;2013年
4 张利;环介导等温扩增技术(LAMP)与荧光定量PCR检测布鲁菌方法的建立及对比试验[D];内蒙古农业大学;2012年
5 吴杰;重组马耳他布鲁菌OMP31蛋白用于间接ELISA诊断抗原的研究[D];内蒙古农业大学;2012年
6 王艳;稳定分泌抗羊种布鲁菌脂多糖单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[D];河南农业大学;2011年
7 陆静;布鲁菌内蒙古分离株部分外膜蛋白基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2010年
8 刘艳琴;牛布鲁氏菌Omp25基因的克隆与原核表达及抗原特异性研究[D];内蒙古农业大学;2011年
9 汤旭;16SrDNA和MALDI-TOF-MS鉴定布鲁氏菌方法建立和评价[D];山西医科大学;2013年
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