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《动物医学进展》 2005年07期
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猪卵丘细胞核移植研究

项智锋  谢红兵  张金洲  王清华  张德福  
【摘要】:以卵丘细胞为供核体细胞,采用胞质内注射法进行猪体细胞核移植,对去核、激活和培养等关键技术过程进行研究,结果表明,①点压法、挤压法对卵母细胞去核率明显高于盲吸法(三者分别为62.5%,64.6%,50.7%,P0.05)。盲吸法去核染色体容易发生位置偏离,影响去核效果,但对早成熟的卵母细胞(36h~44h)进行去核可明显提高去核效率(P0.05),在成熟培养36h~38h、39h~41h、42h~44h去核率分别为60.9%、67.8%、64.3%,而45h~48h为48.4%。②体细胞预激活有助于提高核移胚卵裂率(28.0%,20.1%,P0.05)。A23187(Ca2+ionophore,钙离子载体)单独或与6DMAP(6Dimethylaminopurine,6二甲基氨基嘌呤)联合作用能使猪体细胞核移胚激活继续发育。③核移胚以胚胎培养液NCSU23(NorthCarolinaStateUniversity23medium,北卡洲立大学培养液23)及卵丘颗粒单层共培养体系进行分别培养,核移胚卵裂率无明显差异(30.06%,31.5%,P0.05)。但NCSU23培养4细胞后发育能力更高(13.5%,3.9%,P0.05)。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 李清;;卵母细胞去核方法及其对卵母细胞发育的影响[J];山东畜牧兽医;2007年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 田桂中;自动化细胞注射中微操作与微注射技术及实验研究[D];南京理工大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 施巧婷,黄俊成,杨梅,张家新,王力虎,李辉,郭志勤;不同成熟时间对牛卵母细胞发育及去核效率的影响[J];草食家畜;2001年02期
2 董雅娟,柏学进,李建栋,M.D.Varisanga,N.R.Mtango,李云龙,铃木达行;牛体细胞核移植技术[J];中国兽医学报;2002年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 淡新刚;史远刚;;小鼠卵母细胞去核方法的初步研究[J];安徽农业科学;2007年32期
2 史文升;村上正夫;柏学进;王文明;刘玮;董雅娟;;不同培养条件对牛核移植胚胎体外发育的影响[J];安徽农业科学;2008年18期
3 吴昊;祝文重;胡艳明;方南洙;李钟淑;;延边黄牛体细胞克隆囊胚染色体标本制备的研究[J];安徽农业科学;2008年34期
4 朱秀萍;蒋伟娟;艾晓杰;徐动;朱淑文;;猪卵母细胞体外成熟培养时间及去核方法的研究[J];复旦学报(自然科学版);2007年06期
5 张云生,石国庆;影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的因素[J];贵州畜牧兽医;2005年02期
6 项智锋;张金洲;王清华;张德福;;猪体细胞核移植胚体外发育初步研究[J];黑龙江畜牧兽医;2005年11期
7 陈自洪;杨素芳;罗婵;成俊萍;石德顺;;供体细胞低温冷藏处理对水牛体细胞核移植效果的影响[J];黑龙江畜牧兽医;2007年01期
8 郭建顺;张学东;王浩然;沈晓峰;陈傲第;冯立文;李文红;;高校自然科学学报走专业化、特色化办刊之路的体会——以《中国兽医学报》为例[J];中国科技期刊研究;2007年05期
9 刘东,汤琳琳,陈晓宇,张德福;猪卵母细胞去核方法的改进[J];上海实验动物科学;2004年03期
10 杨宇;戴建军;张廷宇;吴华莉;陈学进;张德福;马恒东;;Spindle-view系统在猪卵母细胞去核中的应用[J];生物工程学报;2007年06期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 朱秀萍;蒋伟娟;艾晓杰;徐动;朱淑文;;猪卵母细胞体外成熟培养时间及去核方法的研究[A];2008年上海市动物学会学术会议论文集(一)[C];2008年
2 黄雅娟;柏学进;李建栋;程明;;牛ntES细胞核在MetaphaseⅡ去核卵中重排及其核移植融合卵的发育[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
3 桑润滋;;我国奶牛胚胎移植和胚胎工程现状及“十一五”重点研究领域[A];全国养牛科学研讨会暨中国畜牧兽医学会养牛学分会第六届会员代表大会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 雷安民;山羊-牛异种细胞核移植研究[D];西北农林科技大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王鹏征;全细胞胞质内注射法(WCICI)生产体细胞克隆牛胚胎及质量鉴定的研究[D];华中农业大学;2010年
2 朱广香;屠宰山羊卵巢有腔卵母细胞体外培养成熟的研究[D];四川农业大学;2003年
3 项智锋;猪体细胞核移植及相关技术研究[D];南京农业大学;2004年
4 陈自洪;水牛细胞核移植技术的研究[D];广西大学;2005年
5 李东伟;黄牛卵母细胞体外成熟影响因素的研究[D];安徽农业大学;2005年
6 王文亭;影响山羊胚胎细胞核移植效果主要因素的研究[D];河北农业大学;2006年
7 淡新刚;小鼠卵母细胞孤雌激活、去核方法及受精卵体外培养研究[D];西北农林科技大学;2006年
8 茫烈;去除卵丘细胞的小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精的研究[D];内蒙古大学;2007年
9 万敏;手工核移植技术在牛体细胞克隆中的应用研究[D];西北农林科技大学;2008年
10 刘晓辉;牛卵巢保存方法对卵母细胞体外成熟和体外发育的影响[D];东北农业大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 嵇国金,马奎,王磊;微纳定位/进给技术研究现状[J];微纳电子技术;2003年05期
2 沙菁;侯丽雅;章维一;朱丽;;微流体系统驱动技术的研究进展[J];微纳电子技术;2006年12期
3 洪小雅;钟辉;席文明;;基于导线阵列的微电磁力驱动细胞运动的研究[J];微纳电子技术;2007年03期
4 孙明磊,宗光华,余志伟,毕树生,于靖军;基于图像分析的显微视觉自动聚焦系统[J];北京航空航天大学学报;2005年02期
5 杨素芳,石德顺,韦精卫,陆凤花;水牛卵母细胞去核方法的摸索[J];草食家畜;2003年04期
6 周严,侯丽雅,章维一;波形和参数在线可编程的功率电源及其应用[J];电测与仪表;2004年01期
7 王立鼎,刘冲;微机电系统科学与技术发展趋势[J];大连理工大学学报;2000年05期
8 武东健,贾建援,王卫东;微细管道内的流体阻力分析[J];电子机械工程;2005年04期
9 王文伟,包文清,胡翘,邬晓华,黄文浩;冲击式微位移机构的性能测试与分析[J];电子显微学报;1999年01期
10 钟映春,谭湘强,杨宜民;微流体力学几个问题的探讨[J];广东工业大学学报;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 荣伟彬;孙立宁;陈立国;蔡鹤皋;;面向微小零件装配的微操作机器人的研究[A];2003中国控制与决策学术年会论文集[C];2003年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 田桂中;陈涛;王淑妍;刘志强;;生物工程中自动化显微注射技术研究进展[J];微纳电子技术;2011年08期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 赵启立;崔茂盛;赵新;孙明竹;王一了;冯建忠;;基于全局视野的批量核移植操作流程研究[A];中国自动化学会控制理论专业委员会D卷[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 穆莉莉;基于微流体脉冲驱动—控制的数字化微反应技术及应用研究[D];南京理工大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 唐照军;自动化细胞微注射中器件制作及微注射实验研究[D];南京理工大学;2011年
2 何晓芳;转BMPR-IB基因克隆猪的制备[D];江西农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 马云,李芬,张琪,庞卫军;影响牛卵母细胞体外成熟的因素[J];黄牛杂志;2000年01期
2 刘泽隆,张涌;牛卵泡卵母细胞体外成熟的研究[J];西北农业大学学报;1999年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵浩斌,陈乃清,李莉,郑新民,魏庆信;猪胚胎卵裂球的细胞核移植[J];农业生物技术学报;2001年02期
2 冷义福;罗光彬;王爽;;体细胞克隆猪胚胎的研究进展[J];猪业科学;2008年07期
3 邓守龙;彭涛;吕自力;陆东林;王安江;王亮;;体细胞克隆牛的研究进展[J];新疆畜牧业;2008年03期
4 李天晴,李跃民;哺乳动物核移植技术研究进展[J];草食家畜;2000年04期
5 马毅,曹斌云;体细胞核移植技术在转基因动物研究中的应用[J];黑龙江动物繁殖;2001年02期
6 史洪才,王立虎;动物的克隆[J];草食家畜;2001年S2期
7 谭世俭;5头经玻璃化冷冻保存后移植的成年体细胞克隆牛降生[J];广西农业生物科学;2003年04期
8 李子义,李德雪,岳占碰,安铁洙,毛振宾,卢圣忠,刘云海,韩燕清,敖红,朱裕鼎;牛体外受精胚胎细胞核移植的实验研究[J];中国兽医学报;1996年01期
9 朱华萍,杨贵忠,万东君;猕猴核移植研究进展及前景(续完)[J];动物科学与动物医学;2002年08期
10 雷蕾,刘忠华,王鸿,寇朝辉,吴昱琪,徐营,程勇,朱子玉,夏国良,陈大元;体细胞来源及培养代数对核移植重构胚发育的影响(英文)[J];遗传学报;2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 宁淑芳;李青洋;梁明明;杨小淦;陆阳清;卢晟盛;卢克焕;;5-Aza-dc和TSA处理巴马小型猪体细胞对其表观遗传修饰和核移植效果的影响[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
2 谢佳喜;王月影;李宏基;韩立强;郭豫杰;鲁维飞;;利用牛乳汁体细胞研究乳脂合成相关基因的表达[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
3 李平;王月影;李宏基;韩立强;郭豫杰;鲁维飞;;利用牛乳汁体细胞研究乳腺免疫相关基因的表达[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
4 蔡琳琳;阮井玲;王娟;李华;黄英;;不同方法处理供核细胞对细胞周期和核移植效率的影响[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
5 李雪峰;吴光明;谭丽玲;谭世俭;卢克焕;;电脉冲对核移植兔胚卵裂的影响[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
6 赵启立;崔茂盛;赵新;孙明竹;王一了;冯建忠;;基于全局视野的批量核移植操作流程研究[A];中国自动化学会控制理论专业委员会D卷[C];2011年
7 严泉剑;李六金;;核移植的现在和未来[A];中国实验动物学会青年科技协会第二届学术研讨会论文汇编[C];2001年
8 李雪峰;吴光明;谭丽玲;谭世俭;卢克焕;;体外成熟兔卵母细胞核移植的初步研究[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
9 罗军;梁明明;崔静辉;杨小淦;石德顺;卢晟盛;卢克焕;;水牛胎儿成纤维细胞系的建立及生物学特性的研究[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
10 吕昆;林丹;许淼;朱怡文;黄英;;应用印迹法测定转基因克隆牛体细胞端粒长度[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 叶青;体细胞“变身”机制明确了[N];广东科技报;2010年
2 常丽君;人体细胞衰老机理有新说[N];科技日报;2011年
3 记者 胡德荣;人体细胞为何能“各司其职”[N];健康报;2011年
4 记者 刘霞;日用冰冻16年的实验鼠尸体克隆出活鼠[N];科技日报;2008年
5 本报记者 孟刚;体细胞能否治乙肝亿万患者盼说法[N];中国消费者报;2009年
6 华美;治疗性克隆≠核移植[N];中国医药报;2002年
7 本报记者 陈永杰 魏刚;体细胞治乙肝惹上官司[N];北京科技报;2009年
8 记者 顾钢;普通体细胞重新编码机理揭晓[N];科技日报;2010年
9 李大光(中科院研究生院社科系科学传播中心教授);对生命的动人描述与哲学思考[N];中国图书商报;2009年
10 记者 钱铮;克隆技术助推,“死而复生”可成真[N];新华每日电讯;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曹鸿国;小鼠体细胞克隆胚的ES细胞研究[D];西北农林科技大学;2005年
2 白照岱;小鼠体细胞核移植和胚胎分割相关问题研究[D];山东大学;2004年
3 王凌燕;金黄地鼠体细胞核移植及相关问题的研究[D];吉林大学;2009年
4 覃敏;体细胞核移植胚胎和皮肤成纤维细胞来源干细胞的相关技术研究[D];广西医科大学;2009年
5 杨素芳;水牛卵母细胞孤雌激活与体细胞核移植的研究[D];广西大学;2002年
6 张刚;小鼠胚胎细胞和体细胞核移植及原核置换研究[D];山东师范大学;2005年
7 潘传英;特定转录因子在哺乳动物生长发育和体细胞重编程过程中的功能研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 张晓波;水稻体细胞根芽再生的蛋白质组学分析及相关基因功能验证[D];浙江大学;2010年
9 沈伟;ht-PAm在山羊β-casein基因座定位整合与中靶体细胞核移植的研究[D];西北农林科技大学;2004年
10 俞国华;朊蛋白基因(PRNP)敲除山羊的制备及相关研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 海棠;牛体细胞核移植研究[D];内蒙古大学;2005年
2 项智锋;猪体细胞核移植及相关技术研究[D];南京农业大学;2004年
3 杨正田;核移植制备t-PAm山羊乳腺生物反应器的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
4 王文亭;影响山羊胚胎细胞核移植效果主要因素的研究[D];河北农业大学;2006年
5 秦蔚;ARM平台下Linux内核移植技术的分析研究与应用[D];昆明理工大学;2004年
6 刘春霞;马皮肤成纤维细胞体外培养与异质克隆胚构建[D];内蒙古农业大学;2004年
7 征曰良;山羊输卵管上皮细胞核移植的研究[D];山东师范大学;2002年
8 唐慧林;由成年波尔山羊体细胞产生的克隆羊[D];扬州大学;2002年
9 梅志强;小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索[D];中国农业大学;2005年
10 孟凡华;鲤鱼体细胞系的构建及鱼类核移植技术的初步研究[D];东北农业大学;2004年
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