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《第一军医大学学报》 2003年11期
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稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株的筛选与鉴定

田泽维  董文其  刘朝霞  
【摘要】:目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测、鉴定重组细胞表达产物。结果筛选所得稳定表达细胞株经RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测均呈阳性反应,而阴性对照及空白对照未出现相应阳性反应。结论筛选获得稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组细胞株,命名为NS/HBc-Mep。为建立HBc-Mep特异的cELISA及CTL活性测定等实验方法提供可靠的靶细胞。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 张丽萍;孙明月;王泰鑫;梁津逍;林平;;丙型肝炎预防性疫苗的实验研究[J];中国热带医学;2011年03期
2 刘朝霞;田泽维;董文其;王萍;;颗粒性HBV多CTL表位基因诱导BALB/c小鼠的免疫应答研究[J];中国免疫学杂志;2006年07期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 倪宏,骆抗先,刘定燮,朱幼芙,马佩球,朱科伦;乙型肝炎病毒全基因重组真核表达质粒的构建[J];第一军医大学学报;2001年03期
2 邢同京,骆抗先,侯金林;HBV转录后调节序列中与干扰素α应答有关位点的初步鉴定与分析[J];第一军医大学学报;2002年06期
3 胡贵方,吴小兵,俞守义,董小岩,陈清,候云德;含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究[J];第一军医大学学报;2003年06期
4 田泽维,董文其,李明,王萍,黄建生;以HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达载体的构建[J];热带医学杂志;2002年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 倪宏,骆抗先,朱幼芙,张明霞,吴英松,马佩球,朱科伦;乙型肝炎病毒全基因在肝癌细胞中的转染与表达[J];第一军医大学学报;2001年07期
2 黄元媛,黄宗海,陈建发,汤福祥,杨文宇,郑全,车小燕;新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒[J];第一军医大学学报;2004年01期
3 李黎波,冯茹,周淑芸;重组绿色荧光蛋白腺相关病毒载体转染293细胞和CD34~+细胞[J];第一军医大学学报;2005年01期
4 邢同京,骆抗先;HBV转录后调节序列变异位点的生物学意义初探[J];解放军医学杂志;2002年10期
5 蒋林彬;施建飞;刘妍;刘文;思兰兰;钟彦伟;徐东平;;1.1倍长乙型肝炎病毒基因组在Huh7细胞中的高效复制和表达[J];解放军医学杂志;2010年06期
6 张秋,孙汶生,高丽芬,马春红,韩丽辉,梁晓红;3.0倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及表达[J];中国现代普通外科进展;2004年05期
7 欧程山,胡贵方,陈清,吴小兵,俞守义;乙型肝炎表面抗原基因重组2型腺相关病毒的免疫原性研究[J];中国热带医学;2005年05期
8 田泽维,董文其,刘朝霞,李明,黄建生;HBc与HBV多表位复合基因在肝癌细胞中的转染与表达[J];热带医学杂志;2003年01期
9 刘朝霞,田泽维,张彦明;HCVC区与HBc融合蛋白在大肠杆菌中表达及鉴定[J];热带医学杂志;2003年04期
10 薛皓;张颖倩;薛付忠;马春红;;现有乙型肝炎多表位疫苗在中国人群中的理论免疫效果评价[J];山东大学学报(医学版);2009年10期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 李文鹏;李彤;闫玲;刘宝明;庄辉;;1.2倍基因组长度C基因型HBV重组体构建及其在HepG2细胞中表达和复制研究[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 倪宏;乙型肝炎病毒感染与肝细胞凋亡的关系研究[D];第一军医大学;2001年
2 张秉强;RNA干扰抑制乙型肝炎病毒复制与表达及其机制研究[D];重庆医科大学;2006年
3 潘建刚;基因重组TK-IRES-Endostatin腺相关病毒双靶点治疗膀胱癌的实验研究[D];天津医科大学;2007年
4 孙林;乙型肝炎病毒全基因组序列变异性的空间遗传结构研究[D];山东大学;2009年
5 杨亚培;肾素过表达及联合用药对动脉粥样硬化及斑块炎症影响的实验研究[D];山东大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 张瑞鹏;AD载体介导的VEGF121基因克隆的构建[D];福建医科大学;2008年
2 李丹丹;干扰素诱导跨膜蛋白分子抗乙型肝炎病毒效果初探[D];安徽医科大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 周朋;刘坤;王希良;于三科;;单纯疱疹病毒Ⅱ型抗原优势表位与乙肝核心蛋白融合DNA疫苗的构建[J];动物医学进展;2009年05期
2 田泽维,董文其,李明,王萍,黄建生;以HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达载体的构建[J];热带医学杂志;2002年04期
3 殷瑛;徐俊杰;陈薇;;乙型肝炎病毒核心蛋白作为表位疫苗载体的应用[J];生物工程学报;2010年04期
4 潘英;朱敏生;傅健;王晓春;李越希;;以乙肝病毒核心抗原HBcAg为载体的utrophin抗体的制备[J];江苏医药;2006年11期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 祝玲玲;朱平安;谭德明;;治疗性HBVDNA疫苗的研究进展[J];热带医学杂志;2008年04期
2 胡凝珠;王海漩;胡云章;;1型糖尿病反义肽噬菌体疫苗诱导CD8~+T细胞对病理性CD4~+T细胞的抑制作用[J];中国生物制品学杂志;2009年08期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 朱平安;肝癌组织中HBx基因多态性分析及其突变体对QSG7701细胞生物学行为的影响[D];中南大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 刘定燮,骆抗先;头尾串联双拷贝HBVDNA重组体的构建[J];第一军医大学学报;1999年03期
2 伍志坚,吴小兵,侯云德;具有AAV载体包装功能的重组HSV的产生[J];科学通报;1999年05期
3 吴小兵,董小岩,伍志坚,屈建国,侯云德;一种快速高效分离和纯化重组腺病毒伴随病毒载体的方法[J];科学通报;2000年19期
4 胡拥军,徐链,王珮;高效感受态菌制备方法比较探索[J];细胞生物学杂志;1994年02期
5 ;病毒性肝炎防治方案(试行)[J];中华传染病杂志;1995年04期
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