收藏本站
《淡水渔业》 2017年02期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

翘嘴鳜铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白表达、纯化及特性分析

肖俊  许亮清  胡向萍  程周玉  胡宝庆  简少卿  阳钢  文春根  
【摘要】:超氧化物歧化酶(SOD)是清除生物体内超氧阴离子自由基的一种重要抗氧化酶。根据翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)Cu/Zn-SOD基因序列(Gen Bank登录号:KJ558392.1)设计表达引物,扩增获得截去信号肽后的一段460 bp的序列,序列经过鉴定后,构建了重组表达质粒p ET-30a+Sc Cu/Zn-SOD,并将该质粒转入到BL21(DE3)中,用IPTG诱导进行表达。经过优化表达条件得到可溶的Sc Cu/Zn-SOD重组蛋白(rScCu/Zn-SOD),纯化重组蛋白后测定rScCu/Zn-SOD的浓度和酶活性。结果发现在20℃和37℃条件下均能够诱导Sc Cu/ZnSOD的表达。37℃时重组蛋白主要以包涵体形式存在。降低诱导温度和补充Cu~(2+)/Zn~(2+)可提高rScCu/Zn-SOD的表达量。在20℃、0.5 mmol/L IPTG条件下,添加0.5 mmol/L CuSO_4和0.1 mmol/L ZnCl_2于培养基中,重组蛋白的表达量明显升高。纯化后的重组蛋白浓度为0.14 mg/m L,酶活力为108.5 U/mg。rScCu/Zn-SOD最适温度为37℃,最适pH为7.0,可耐受5%浓度的SDS蛋白质变性剂。

免费申请
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 柴勇;;可用于回收重组蛋白的双酶系[J];生物技术通报;1987年05期
2 李思经;;小分子将替代重组蛋白吗[J];生物技术通报;1989年03期
3 孙国凤;重组蛋白的委托生产[J];生物技术通报;1992年12期
4 孙国凤;;用植物细胞生产重组蛋白[J];生物技术通报;1993年01期
5 林衡;许崇波;孙利慧;胡学军;;类弹性蛋白标签在重组蛋白分离纯化中的应用[J];生物技术通报;2012年12期
6 于少芳;吴小锋;;提高昆虫杆状病毒表达系统重组蛋白表达水平的技术[J];蚕桑通报;2010年03期
7 黄巨富;汪志平;骆爱玲;钟泽璞;李佳格;;钒铁蛋白的体外组装研究[J];Journal of Integrative Plant Biology;1993年11期
8 李泽鸿;张帆;管玉兵;文继红;;添加前缀对重组蛋白生物学特性影响的预测分析[J];中国兽药杂志;2010年12期
9 许丽萍;白文成;刘杨;代霄燕;李培峰;;链球菌表面烯醇化酶及其变异体重组蛋白的表达纯化[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2011年01期
10 许丽萍;代霄燕;李培锋;;链球菌表面三磷酸甘油醛脱氢酶及其突变体重组蛋白的表达和纯化[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 卫红飞;王丽颖;;重组蛋白发酵[A];东北三省生物化学与分子生物学学会2008年学术交流会论文摘要[C];2008年
2 关怡新;姚善泾;;重组蛋白的体外复性技术研究进展[A];浙江省化工学会成立五十周年庆祝大会暨第二届省(市)际化学化工科技发展研讨会论文集[C];2001年
3 潘夕春;丁国富;周红;;人TLR9受体LRR8片段在大肠杆菌中的重组表达[A];中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会论文摘要集[C];2008年
4 任道锋;;旋毛虫基因Ts43原核表达及重组蛋白鉴定[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
5 曹珊珊;吴开春;张英起;樊代明;;重组蛋白GX1-nrhTNFα的表达,纯化和功能研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
6 谭江琳;袁顺宗;彭旭;马兵;黄正根;程文广;王小娟;甘成军;贾雄飞;王庆红;贺伟峰;胡婕;张小容;胡晓红;罗高兴;吴军;;人重组蛋白P311的原核表达纯化与鉴定[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年
7 周晔;蒋天舒;陈燕;娄加陶;吴传勇;陈波;谷明莉;仲人前;邓安梅;;结核杆菌Ag85A重组蛋白的免疫原性研究[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
8 李存保;王美玲;;尿卟啉原Ⅲ合成酶(UROS)基因的克隆与原核表达[A];第三届泛环渤海(七省二市)生物化学与分子生物学会——2012年学术交流会论文集[C];2012年
9 王玉梅;孟多佳;时成波;常军亮;张宁;迟春萍;曹玉锋;于爱东;;抗戊型肝炎病毒重组蛋白P179单克隆抗体的制备及应用[A];2011中国生物制品年会暨第十一次全国生物制品学术研讨会论文集[C];2011年
10 张灵霞;吴雪琼;史迎昌;梁建琴;张俊仙;;几种结核分支杆菌重组蛋白诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究[A];中国防痨协会全国学术会议大会学术报告[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 刘成刚 左朝胜;复能与罗氏携手人类重组蛋白研发[N];科技日报;2006年
2 记者 姜煜;前七月本市民企进出口同比增76%[N];北京日报;2011年
3 何丽君;哈四个高技术项目通过验收[N];黑龙江经济报;2009年
4 记者 薛婧;哈尔滨再添新动力[N];黑龙江日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李妍;具有眼球屏障穿过作用的Tat PTD-Endostatin-RGD的制备、滴眼抑制眼底新生血管生成及眼部药代动力学研究[D];山东大学;2016年
2 于长明;利用毕赤酵母系统表达重组蛋白[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
3 丁大勇;重组再生蛋白3的表达及抗菌活性的研究[D];吉林大学;2015年
4 孙蕊;双功能重组蛋白靶向免疫治疗肿瘤研究[D];北京协和医学院;2015年
5 刘文俊;基于逆向相变和自裂解的重组蛋白表达和纯化系统的建立与应用[D];扬州大学;2014年
6 王盛典;人白细胞介素15cDNA克隆和在大肠杆菌中高效表达及其重组蛋白的纯化[D];中国协和医科大学;1998年
7 张晶;小鼠白介素1受体拮抗剂重组蛋白的制备及其预防化疗骨髓毒副作用的研究[D];上海交通大学;2008年
8 卢爱桃;STLV-1/BV重组蛋白ELISA诊断试剂盒的研发及液相芯片诊断方法的建立[D];内蒙古农业大学;2008年
9 徐莉娟;诊治法布莱氏病的单抗及重组蛋白的研制[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
10 潘红春;重组蛋白hCH-2的PEG修饰及其初步特性研究[D];重庆大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁振东;重组蛋白A亲和介质的制备及性能和应用研究[D];江南大学;2015年
2 张易;灰葡萄孢蛋白激发子BcSpl1诱导番茄抗病机制研究[D];中国农业科学院;2015年
3 龚文芝;猪热激蛋白Gp96N端基因与猪瘟病毒E2基因重组表达及重组蛋白的免疫原性研究[D];中国兽医药品监察所;2015年
4 李达;旋毛虫成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂免疫学及生物活性研究[D];东北农业大学;2015年
5 郝明强;表达HPV6型L2△E7E6重组蛋白的工程菌株构建及免疫效果评价[D];中国疾病预防控制中心;2012年
6 齐亚坤;化脓性链球菌溶血素O和人视黄醇结合蛋白的表达与纯化[D];南京师范大学;2015年
7 解帅帅;GlnRS与ArgRS多抗的制备及表达分析[D];苏州大学;2016年
8 刘会珍;拟南芥IAA7和TIR1在E.coli和果蝇S2表达系统中的表达[D];湖南农业大学;2015年
9 商鹏飞;鸡内脂素的原核表达及活性测定[D];河南农业大学;2014年
10 黄夏冰;共抑制分子VISTA胞外段重组蛋白表达及其对EAE小鼠治疗作用的研究[D];郑州大学;2016年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026