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《第四军医大学学报》 2005年09期
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容量调控氯通道基因siRNA表达载体的构建及其沉寂效应检测

张勇  贾林涛  李庆霞  王成济  周士胜  杨安钢  
【摘要】:目的:构建针对容量调控氯通道基因(CLC3)的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对CLC3基因的干扰作用.方法:设计CLC3靶向的发夹状siRNA,据此设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSUPER载体,转化扩增后进行序列测定.用脂质体转染法转染胃癌细胞SGC7901,通过RT PCR、间接免疫荧光检测CLC3基因表达水平的变化.结果:把针对CLC3基因的siRNA的双链寡核苷酸片段克隆到pSUPER载体,经过酶切鉴定与测序,结果正确,稳定转染人胃癌细胞SGC7901后,RT PCR、间接免疫荧光检测表明,CLC3基因的表达水平明显降低.结论:构建了针对CLC3基因的siRNA载体,转染细胞后可抑制CLC3基因表达.

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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2 王祎琴;杨玉成;洪苏玲;;EB病毒LMP1基因靶向shRNA表达载体构建方法的比较研究[J];第四军医大学学报;2007年02期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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2 陈艳明,杨俊,胡玉珍,田晶,周士胜;容量调控氯通道在人胃癌细胞系SGC7901增殖中的作用[J];第四军医大学学报;2004年06期
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 杨翔云;赖小刚;张勇;裴建明;杨安钢;周士胜;;siRNA干扰ClC-2表达对人胶质瘤U-87细胞增殖的抑制作用[J];癌症;2006年07期
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4 周士胜,臧益民;阴离子通道与原发性高血压[J];心脏杂志;2002年02期
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 薛军,张丙芳,戚好文,马恒,周士胜,张彩莲;氯离子通道阻断剂对豚鼠离体气管条收缩的影响[J];第四军医大学学报;2002年13期
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3 王海芳,李景峰,梅其炳,赵德化;大鼠胃粘膜壁细胞基底膜的氯离子通道[J];第四军医大学学报;1998年03期
4 田晶,陶凌,曹云新,董玲,胡玉珍,杨安钢,周士胜;尼氟灭酸对肝癌细胞增殖的影响[J];生理学报;2003年02期
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3 贾丽洁;ICP27特异性siRNA抑制HSV-1病毒复制的实验研究[D];郑州大学;2010年
4 李杰;抑制PKM2的siRNA协同抑制CCND1的作用机制研究[D];安徽医科大学;2011年
5 王涵;应用siRNA技术下调Survivin抑制鼻咽癌细胞生长的研究[D];昆明医学院;2010年
6 付振宇;siRNA沉默HIF-1α基因对人前列腺癌PC3细胞生物学性状的影响[D];苏州大学;2010年
7 索涛莉;靶向Hsp90β siRNA对Jurkat细胞生长抑制及化疗敏感性影响的研究[D];重庆医科大学;2010年
8 韦德芳;利用pSOS-HUS系统筛选靶向乙肝病毒X基因的siRNA的研究[D];重庆医科大学;2010年
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10 徐良全;用RNA干扰方法探讨原癌基因c-erbB_2在原始卵泡生长启动中的作用[D];南昌大学;2008年
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