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《第四军医大学学报》 2003年15期
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稳定表达神经营养素-3的NIH3T3细胞建立及鉴定

邓志宏  王锦玲  邱建华  金明  杨安钢  
【摘要】:目的 :建立稳定表达NT3的NIH3T3细胞株 ,通过体外共培养实验观察其对耳蜗螺旋神经节细胞生长的影响 .方法 :以阳离子脂质体作为载体 ,将携带有外源性基因NT3的重组真核表达载体 pIRES2 EGFP NT3转染小鼠成纤维细胞 ,进行RT PCR ,Western blot分析及免疫组化鉴定 ,并与耳蜗螺旋神经节细胞进行共培养实验 .结果 :得到抗G 4 1 8的阳性细胞克隆 ;RT PCR的产物约为 74 4bp ;Western blot可见一清晰的蛋白条带 ,与NT3的蛋白分子量相符合 .NT3免疫组化染色结果显示转染NT3 cDNA的NIH3T3细胞胞质呈棕黄色着色 .NT3转染组细胞与耳蜗螺旋神经节细胞共培养 2wk后 ,与对照组相比 ,耳蜗螺旋神经节细胞无明显减少 .结论 :成功建立了稳定表达NT3的NIH3T3细胞株 ;该细胞对耳蜗螺旋神经节细胞有很好的营养支持作用

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 邓志宏,王锦玲,邱建华,刘顺利,黄维国;稳定表达NT-3的NIH3T3细胞对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞生长的影响[J];中国现代医学杂志;2004年16期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前8条
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2 马强;HCMV UL82基因重组质粒在HFF中的表达与纯化鉴定[D];第三军医大学;2005年
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【二级引证文献】
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9 马巍,刘淼,杨广笑,王全颖;重组腺相关病毒转导NIH3T3建立神经生长因子真核表达细胞株的研究[J];中国脊柱脊髓杂志;2004年09期
10 汪小平,赵雄飞,易绍萱,陈渝,太光平;人白介素-10在NIH3T3细胞中的表达及生物学效应的初步观察[J];第三军医大学学报;2005年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 车兴华;陈洪;徐振明;尚超;孙开来;富伟能;;14-3-3epsilon通过影响癌细胞凋亡及侵袭能力在喉癌中发挥抑癌作用[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年
4 张书霞;步志高;陈万芳;;鸡bcl—2表达质粒的构建及其对转染细胞凋亡的影响[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十一次兽医病理学、第十次动物病理生理学学术研讨会论文集[C];2001年
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7 傅新巧;张苏明;褚倩;肖文伍;;大鼠骨髓间充质干细胞转染人TH基因的实验研究[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
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10 吴军 杨太成;主动特异性免疫疗法治疗肿瘤[N];中国中医药报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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8 李琤;肺癌细胞总RNA转染DC体外诱导肺癌患者抗瘤免疫的实验研究[D];天津医科大学;2002年
9 陈幸德;猪干扰素-γ基因的克隆及其表达[D];中国农业大学;2003年
10 黄玉国;hTGF-β1基因在体转染兔退变腰椎间盘髓核细胞的实验研究[D];河北医科大学;2005年
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