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《第三军医大学学报》 2010年08期
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缺氧条件下大鼠神经元白细胞介素-1受体相关激酶-1的表达变化

李江涛  胡胜利  杜鹏  郑江  缪洪平  吴国材  唐卫华  刘智  朱刚  
【摘要】:目的观察大鼠神经元B35细胞株中白细胞介素-1受体相关激酶-1(interleukin-1 receptor-associated kina-ses-1,IRAK-1)mRNA及蛋白在缺氧后表达量的变化,并探讨其变化与神经元中TNF-α表达的关系。方法将培养的B35细胞置于低氧(3%O2、5%CO2、92%N2)条件下培养1、3、6、12、24、48、72 h,应用RT-PCR方法检测IRAK-1 mRNA表达的变化;Western blot检测IRAK-1蛋白含量的变化;激光扫描共聚焦观察IRAK-1在细胞内的分布及含量变化;酶联免疫吸附法检测培养液上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,并与IRAK-1蛋白进行相关分析。结果B35细胞IRAK-1 mRNA表达与正常对照相比,1 h开始增加[(0.786±0.042),P0.05],3 h增加明显[(0.947±0.055),P0.05],6 h达到高峰(1.245±0.077),P0.05],12 h仍维持在较高水平[(0.911±0.041),P0.05],24 h降至正常水平以下但无明显差异[(0.596±0.047),P0.05],48 h以后进一步减少[(0.520±0.049),P0.05]。IRAK-1蛋白表达变化也呈类似趋势。相关性分析结果显示,培养上清液中TNF-α含量的变化与IRAK-1蛋白表达变化呈正相关(r=0.88,P0.05)。结论神经元内存在TLR/IL-1R家族信号转导系统的关键因子IRAK-1,缺氧损伤可诱导其表达,与TNF-α的表达相关。

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