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《第三军医大学学报》 2007年17期
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白鲜皮抗内毒素活性物质的分离提取与活性研究

郭毅斌  曹红卫  范莉  杨大成  鲁永玲  吕根法  郑江  肖光夏  
【摘要】:提要:目的筛选与类脂A(lipidA)具有较高结合活性的中药,从中提取具有拮抗内毒素(lipopolysaccharide,LPS)活性的物质。方法采用生物传感技术,以lipidA为靶点,检测42种中药的水提物与lipidA的结合活性;以白鲜皮为研究对象,通过大孔吸附树脂、溶剂萃取、聚酰胺柱层析和高效液相色谱(HPLC)法,分离提取与lipidA结合活性较高的组分;动态比浊法鲎试验检测HPLC产物DPR-1~3对LPS(0.1ng/ml)的中和作用;ELISA法检测DPR-2对LPS(100ng/ml)刺激的RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的影响。结果8种中药水提物与lipidA具有较高的结合活性(RU100arc/s);从白鲜皮中逐步分离出与lipidA结合活性较高的组分,经HPLC法获得3种物质DPR-1~3;DPR-2对LPS具有一定的中和作用,在8μg/ml浓度以上可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6(P0.05),并具有剂量效应关系。结论从42种中药中筛选出与lipidA具有较高结合活性的中药白鲜皮,并从中分离提取出抗LPS活性物质DPR-2,其抗LPS活性可能与DPR-2对LPS的中和活性有关。

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