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《第三军医大学学报》 2000年08期
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单羧酸转运泵基因反义真核表达载体的构建

成党校  钱桂生  黄桂君  
【摘要】:目的 构建单羧酸转运泵基因反义逆转录病毒真核表达载体。方法 应用RT PCR方法扩增带有双酶切位点的单羧酸转运泵目的基因片段 ,与带有相同酶切位点的pLXSN逆转录病毒真核表达载体粘末端进行反向基因插入连接 ,构建具有反义表达的逆转录病毒载体。结果 构建载体进行双酶切电泳分析及插入片段基因序列分析 ,证明反义载体构建成功。结论 应用RT PCR方法扩增插入DNA片段 ,简单、灵活、快捷。双酶切定向连接构建反义表达载体可实现构建一步到位 ,免去正反向筛选的麻烦。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 张桂芝,黄桂君,厉为良,吴国明,钱桂生;联合抑制人肺腺癌细胞的MCT1基因及NHE1基因表达对其增殖生长的影响[J];癌症;2002年07期
2 张桂芝,黄桂君,郭先健,钱桂生;单羧酸转运蛋白反义基因转染人肺腺癌细胞对其生物学特性的影响[J];第三军医大学学报;2001年02期
3 王晓澍;游潮;孙晓川;;MCT1、CD147在人胶质瘤中的表达、相关性及其与预后的关系[J];第三军医大学学报;2010年09期
4 王晓澍;游潮;孙晓川;;CD147/HAb18G单克隆抗体对人脑胶质瘤细胞乳酸转运及细胞生长的影响[J];第三军医大学学报;2010年20期
5 张桂芝 ,黄桂君 ,郭先健 ,钱桂生;Effect of antisense transfecting of monocarboxylate transporter gene on biological characteristics of lung adenocarcinoma A549 cells[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2002年02期
6 张桂芝,黄桂君,成党校,郭先健,钱桂生;抑制人肺腺癌细胞MCT1基因的表达对其增殖、凋亡的影响[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2002年02期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 张桂芝;单羧酸转运蛋白MCT1基因反义表达重组载体转染人肺腺癌细胞及其生物学效应的研究[D];第三军医大学;2001年
2 雷撼;新型阳离子脂质体的合成及人β防御素2基因转染和表达的研究[D];第三军医大学;2003年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 蒋东霞,杨胜利,何琳;恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞mdr-1基因表达在原发耐药与继发耐药中的作用研究[J];癌变.畸变.突变;2002年04期
2 何琳,张巧,胡杰英;抗肿瘤药物体外诱导新鲜癌组织及其外周血淋巴细胞mdr-1基因表达的相关性研究[J];癌变.畸变.突变;2002年04期
3 牛永东,许丽艳,李恩民;酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定[J];癌变.畸变.突变;2003年01期
4 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
5 阮烨,王晓云,谢庆东,黄天华;外源DNA转染精子的实验研究[J];癌变.畸变.突变;2004年03期
6 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
7 何志颖,江千里,姚玉成,温丽敏,李建秀,王新民,胡以平,王健民;RFP标记的YCD基因在HeLa细胞中的表达及其介导的细胞毒性[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
8 李涛,石年,吴又桐,周丽,董洁,王素青,陈亮;Bcl-2在溴氰菊酯诱导神经细胞凋亡机制中的作用[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
9 陈传德,吴中亮,陈家堃;乙酸镍诱导的人支气管上皮细胞系转化细胞基因组不稳定性分析[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
10 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 田永强;张荣意;朱中元;;人乳头瘤病毒线性平行杂交分型检测条件的建立及优化[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
2 郝冬海;曹珂;刘检;张予阳;;细胞损伤模型在化合物抗脑缺血活性筛选中的应用[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
3 洪胜辉;张军;张蕊;王来娣;邵丹;张宜辉;董飚;段修军;龚道清;;鹅原代肝细胞的简易、高纯分离及培养[A];安全优质的家禽生产——第十五次全国家禽学术讨论会论文集[C];2011年
4 梁权;毛培菊;罗春贞;王缦;;HIV-1跨膜蛋白gp41的截短表达及其免疫反应性[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
5 朱勤勋;严雪;韩友斌;;鼠源IgG抗体F(ab')2片段及Fab片段的制备纯化及其免疫活性研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
6 朱美财;占志;王雅静;蔡庆;;刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
7 刘俊莹;张华鹏;王聪聪;张剑峰;;马铃薯卷叶病毒ORF1克隆及序列分析[A];马铃薯产业与科技扶贫(2011)[C];2011年
8 黄家强;卜夏;李卓娅;龚非力;;人TNFα分泌型、跨膜型和跨膜稳定型重组体的构建表达及杀瘤效应[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
9 冯琦;孙秉中;赵永同;孙凯;张英起;颜真;韩苇;;Bcr-abl特异性系列核酶载体的构建及初步鉴定[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
10 白玉杰;苏成芳;杨安刚;;抗人CD3单链抗体基因的构建及表达[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王庆莲;苹果多胺和脯氨酸合成代谢相关基因的功能鉴定[D];山东农业大学;2009年
2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 李坤寅;橘荔散结丸有效部位对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及相关因子表达的影响[D];湖南中医药大学;2010年
4 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
5 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
6 梁勇;白念珠菌高铁还原酶基因表达调控及Aft2p转录因子的功能研究[D];南开大学;2010年
7 钟兴;hNIS转染鼻咽癌介导放射性核素显像和治疗的实验研究[D];暨南大学;2010年
8 于双妮;胰腺癌差异表达microRNAs的鉴定及功能研究[D];北京协和医学院;2008年
9 于蕾;野西瓜极性生物碱A10组分诱导SGC-7901细胞凋亡线粒体通路的研究[D];北京中医药大学;2010年
10 王欣梅;大肠杆菌f2噬菌体分子印迹膜的制备、评价和应用[D];华中科技大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩秀萍;幽门螺杆菌基因敲除方法的建立及其应用研究[D];华中农业大学;2010年
2 余姣姣;天蓝放线紫红素生物合成上调基因的克隆及其对阿维菌素产量的影响[D];华中农业大学;2010年
3 黄潘;鸡胚性分化早期性别差异表达miRNAs的鉴定及其特性分析[D];华中农业大学;2010年
4 王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 曹晶;风疹病毒(RV)包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达[D];南京医科大学;2009年
6 王涛;糖皮质激素受体基因转染阿霉素肾病大鼠模型改善糖皮质激素疗效的研究[D];南京医科大学;2009年
7 朱晓娟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL的构建、表达、纯化及初步鉴定[D];南京医科大学;2009年
8 施六霞;富血小板血浆对不同条件下人牙周膜成纤维细胞功能的影响[D];南京医科大学;2010年
9 高岩;拟南芥fad8基因在烟草叶绿体基因组表达研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
10 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 成党校,钱桂生,黄桂君;人肺腺癌细胞单羧酸转运泵基因的克隆及基因序列分析[J];第三军医大学学报;2000年05期
2 黄桂君,吴国明,张青,钱桂生;人肺癌细胞NHE-1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建[J];第三军医大学学报;2000年06期
3 张桂芝,黄桂君,郭先健,钱桂生;单羧酸转运蛋白反义基因转染人肺腺癌细胞对其生物学特性的影响[J];第三军医大学学报;2001年02期
4 王晓澍;游潮;孙晓川;;MCT1、CD147在人胶质瘤中的表达、相关性及其与预后的关系[J];第三军医大学学报;2010年09期
5 陈吉祥,李广林,薛飞群,赵青云,赵荣材,赵家政,李树本;阳离子脂质体禽流感病毒HA基因重组质粒复合物的电镜研究[J];电子显微学报;1998年04期
6 朱立;阳离子脂质体及其在体内基因转染中的应用[J];国外医学(分子生物学分册);1999年03期
7 卢大儒,邱信芳,薛京伦;基因治疗转移方法研究进展[J];国外医学.遗传学分册;1996年01期
8 成党校,黄桂君,钱桂生;新型基因转染阳离子脂质体研究进展[J];国外医学.药学分册;2000年05期
9 李浩;陈兢;贺民;惠旭辉;蔡博文;李杨;;CD147、MMP-2在人脑胶质瘤中的表达及其与预后的关系[J];四川大学学报(医学版);2007年03期
10 蒋献,夏利文;防御素及其生物学活性[J];华西医学;2002年02期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 黄桂君,成党校,吴才林,陈杰,熊伟,钱桂生;人肺癌组织细胞单羧酸转运基因mRNA表达的半定量分析[J];癌症;2002年02期
2 张桂芝,黄桂君,厉为良,吴国明,钱桂生;联合抑制人肺腺癌细胞的MCT1基因及NHE1基因表达对其增殖生长的影响[J];癌症;2002年07期
3 王晓澍;唐文渊;游潮;;MCT1表达位置改变对胶质瘤细胞能量合成、细胞内pH值及凋亡的影响[J];重庆医学;2012年10期
4 王晓澍;游潮;孙晓川;;CD147/HAb18G单克隆抗体对人脑胶质瘤细胞乳酸转运及细胞生长的影响[J];第三军医大学学报;2010年20期
5 李进军;刘献志;万学峰;徐斌;;mTOR/eIF4E信号通路在不同级别人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义[J];第三军医大学学报;2010年23期
6 廖通权;刘玉刚;胡旭;张莹;余世明;初同伟;周跃;;CD147对体外破骨细胞分化成熟的影响[J];第三军医大学学报;2010年24期
7 余世明;初同伟;廖通权;胡旭;刘玉刚;周跃;;CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9分泌的影响[J];第三军医大学学报;2011年14期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王晓澍;CD147、MCT1在人脑胶质瘤中的表达及CD147单抗对U251细胞代谢干预的实验研究[D];四川大学;2006年
2 李劲东;MCT1、CD147在人肝癌中的表达及其反义RNA表达载体对肝癌细胞的影响[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张仁生;Sox-2、TBX2在人脑胶质瘤的表达及临床意义[D];吉林大学;2011年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 成党校,钱桂生,黄桂君;人肺腺癌细胞单羧酸转运泵基因的克隆及基因序列分析[J];第三军医大学学报;2000年05期
2 谭永红,黄桂君,成党校,吴国明,张桂芝,钱桂生;人肺癌细胞MCT2基因的克隆及其mRNA表达分析[J];重庆医学;2002年09期
3 孙继勇,蔺玉昌,黄强;胶质瘤中分化相关基因的表达研究[J];齐齐哈尔医学院学报;2005年10期
4 顾桂芳;张美云;庄迅;;宫颈癌组织中survivin基因表达的临床意义[J];南京医科大学学报(自然科学版);2008年02期
5 吕晓智;殷学民;冯元勇;段丽琼;陈万涛;张陈平;;口腔鳞癌与正常黏膜中T细胞分化蛋白mRNA的表达[J];中国口腔颌面外科杂志;2009年03期
6 秦龙;邢泽刚;;Axin基因在脑肿瘤干细胞和神经干细胞中的表达及其多态性研究[J];咸宁学院学报(医学版);2009年05期
7 邹明;孔梅;李晓燕;易艳萍;李琳;董晓春;;天津市2007年~2009年流感监测结果分析[J];中国卫生检验杂志;2009年12期
8 党受琴;项锋钢;赵永刚;侯倩;周旋;;Bmi-1在非小细胞肺癌中的表达及相关性探讨(英文)[J];现代生物医学进展;2011年07期
9 刘阳,迟宝荣,李秀明,黄向阳,石丽华;输血后丙型肝炎患者庚型肝炎病毒感染的初步研究[J];吉林医学;1997年06期
10 李相军,任立群,李广生;用RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的肠道病毒RNA[J];吉林大学学报(医学版);2002年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈云霞;侯韶毅;卢桂娟;陆有飞;高永锐;王成业;黄伟坚;;牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年
2 郭巍;戴伶俐;李雪峰;闫妍;王英原;周建华;相文华;;马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
3 明艳林;郑国华;陈良华;吴琦;苏勇波;;二温式RT-PCR快速检测兰花斑点病毒技术的研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
4 王忠发;顾松叶;施慧;沈飚;;快速荧光定量RT-PCR定量检测对虾Taura综合症病毒(TSV)的方法建立与应用[A];2011年浙江省医学会医学病毒学分会、医学微生物与免疫学分会学术年会论文汇编[C];2011年
5 战勇;喻德跃;;大豆花叶病毒的组织印迹与RT-PCR检测[A];江苏省遗传学会第八届会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2010年
6 王劭;陈少莺;陈仕龙;程晓霞;林锋强;朱小丽;江斌;李兆龙;;新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR方法的建立与应用[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
7 南松剑;沈志强;刘吉山;陈继春;;山东省猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR检测与分析[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
8 栾婧婧;高运东;仲跻峰;赵宏坤;;半巢式RT-PCR快速检测犊牛轮状病毒方法的建立[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(下)[C];2005年
9 吴明皇;常藕琴;石存斌;吴淑勤;;鳜鱼TCRα基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
10 孔繁德;王荣;陈琼;吴德峰;徐淑菲;;多重RT-PCR一步法技术同时检测猪瘟病毒和蓝耳病病毒方法的建立以及初步应用[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 董敬民;国内诺沃克病毒检测方法首创成功[N];中国海洋报;2004年
2 记者 董敬民;食品中诺沃克病毒检测方法通过鉴定[N];中国国门时报;2004年
3 姚保泰;吴敏;王博;黄连小檗碱抗胃癌机制新阐述[N];中国医药报;2005年
4 陈杨荣;任文英;江明;补肾清热毒方可保护肾组织[N];中国医药报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 董秀梅;牛副流感病毒3型山东分离株致病性研究及荧光定量RT-PCR的建立[D];中国农业科学院;2012年
2 翟小龙;EZH2基因与上皮性卵巢癌相关性的研究[D];四川大学;2004年
3 李江;角蛋白降解菌Streptomyces fradiae var.k-11中蛋白酶基因的克隆及表达[D];中国农业科学院;2005年
4 宋振梅;Clusterin在食管鳞癌中表达的研究与应用[D];山东大学;2005年
5 何嘉;涎腺粘液表皮样癌的耐药相关因素及其产生机理和基因芯片的检测分析研究[D];四川大学;2004年
6 张久松;西尼罗病毒感染病原体检测方法与流行病学调查研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
7 周美宏;hnRNPA2/B1在人非小细胞肺癌组织中的表达研究[D];四川大学;2004年
8 孙京臣;家蚕质多角体病毒RDRP的基因克隆、表达及定位研究[D];中山大学;2004年
9 温鹏飞;葡萄与葡萄酒中黄烷醇类多酚和果实原花色素合成相关酶表达规律的研究[D];中国农业大学;2005年
10 潘世扬;原发性肺癌发病及早期基因变异的初步研究[D];南京医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴忆春;IBD的RT-PCR快速诊断方法的建立及安徽超强毒株的分离鉴定[D];安徽农业大学;2005年
2 周蓉;一氧化氮合酶在糖尿病结肠功能紊乱大鼠结肠壁的表达及意义AP-1对酒精致纹状体突触可塑性变化影响的研究[D];南京医科大学;2005年
3 张丽;HSP70在人类糖尿病性白内障及老年性白内障晶状体上皮细胞的表达及意义[D];山西医科大学;2005年
4 朱庆云;Mesothelin和Fascin对胰腺癌的诊断价值研究[D];第二军医大学;2005年
5 张学斌;酵母双杂交技术鉴定与拟南芥AtMT-A70B相互作用基因的研究[D];山西农业大学;2005年
6 王彦彬;固始鸡IL-2基因克隆、表达及其生物活性检测[D];河南农业大学;2005年
7 张德庆;Survivin基因在食管癌组织中的表达及临床意义[D];青岛大学;2005年
8 苗素云;协同刺激分子CD80和CD86在实验性变态反应性神经炎发病中的作用[D];青岛大学;2005年
9 马腾;难治性癫痫患者外周血中MRP1表达的研究[D];青岛大学;2005年
10 冯旺琴;SLP-2基因在子宫内膜癌组织中的表达及其功能研究[D];青岛大学;2005年
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