收藏本站
《第二军医大学学报》 1997年02期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

编码耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶的pheB基因在大肠杆菌中的亚克隆与高表达

蔡在龙  季朝能  王学敏  张洁  董海  沈仁权  毛裕民  
【摘要】:目的:构建pheB基因高表达菌株,研究酶的耐热机制。方法与结果:通过PCR扩增方法,对位于质粒pFDA13上的pheB基因进行扩增,克隆于pUC118N和pUC119N上,经双向测序,证明PCR过程中并未发生突变,然后亚克隆于高表达载体pJLA503,转化E.coliTG1,经42℃诱导,获得了高表达的基因产物,表达量占细菌总蛋白的34.6%。并与xylE基因编码的邻苯二酚2,3双加氧酶作了耐热性比较。结论:pheB基因在大肠杆菌中获得了高表达,高表达后重组酶的耐热性未发生改变。

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 袁有忠!遗传学研究所,佟石!遗传学研究所,吕鸿雁!遗传学研究所,周宗祥!遗传学研究所,盛小禹!遗传学研究所,毛裕民!遗传学研究所;耐热碱性磷酸酯酶基因的亚克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];复旦学报(自然科学版);1998年02期
2 章俭,夏春谷;芳香烃双加氧酶的结构与功能研究[J];化学进展;2004年01期
3 潘自铁,刘华欣;不同细菌中邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的研究[J];第四军医大学吉林军医学院学报;2000年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 吕鹏;洋葱伯克霍尔德氏菌L68菌株邻苯二酚2,3-双加氧酶分离纯化、酶学性质、基因筛选及应用的研究[D];山东大学;2006年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙艳,谭立扬;利用固定化细胞法降解含酚废水的研究[J];北京工业大学学报;1997年01期
2 刘玲,王黎华;人肺组织中多环芳烃的代谢与肺癌相关性的研究[J];北京大学学报(医学版);1987年04期
3 何星月,刘之景;生物传感器的研究现状及应用[J];传感器世界;2002年10期
4 张金丽,郑天凌;多环芳烃污染环境的控制与生物修复研究进展[J];福建环境;2002年02期
5 肖庚富,王家玲;曝气浸没固定生物膜法及其在污水处理中的应用[J];环境科学与技术;1993年04期
6 邓耀杰,林鹿,詹怀宇;白腐菌对芳香化合物的降解及其机制[J];环境科学与技术;1999年03期
7 辛梅华,徐金瑞,陈东;反相高效液相色谱分离-安培法检测酚类化合物[J];分析化学;1994年05期
8 耿玉珍,刘葵,刘连伟;吸光度比值导数法同时测定苯酚、邻苯二酚和对苯二酚[J];分析化学;1997年09期
9 黄少鹏,徐金瑞,王琼;薄层色谱法同时测定邻苯二酚、间苯二酚和对苯二酚异构体[J];分析化学;1999年03期
10 赫春香,汪振霞,陈连山;多波长线性回归-导数分光光度法测定对苯二酚、邻苯二酚和苯酚[J];分析试验室;1996年02期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 夏颖;多环芳烃菲对微生物生态毒理研究、菲降解菌的分离鉴定及降解基因克隆与表达[D];浙江大学;2004年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 熊爱生;章镇;姚泉洪;彭日荷;庄静;徐芳;刘金戈;朱宏;;酶体外定向分子进化技术:环境生物污染治理中的新星[J];环境污染与防治;2006年11期
2 姜涛,季朝能,盛小禹,陈民勤,谢毅,毛裕民,龚为民;应用多波长反常散射法测定耐热邻苯二酚2,3-双加氧酶的晶体结构[J];科学通报;2001年22期
3 季朝能,白晓阳,盛小禹,张冰,毛裕民;信号肽去除的耐热碱性磷酸酯酶FD-TAP在大肠杆菌中的亚克隆和高表达[J];生物工程学报;2000年06期
4 郑乐;刘宛;李培军;;多环芳烃微生物降解基因的研究进展[J];生态学杂志;2007年03期
5 袁有忠,赵思汇,周宗祥,季朝能,盛小禹,毛裕民;一个耐热碱性磷酸酯酶突变型的研究[J];遗传学报;2000年04期
6 章俭,夏春谷;芳香烃双加氧酶的结构与功能研究[J];化学进展;2004年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 吕鹏;洋葱伯克霍尔德氏菌L68菌株邻苯二酚2,3-双加氧酶分离纯化、酶学性质、基因筛选及应用的研究[D];山东大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 武凤霞;菲降解细菌的分离鉴定及其降解效果研究[D];西北大学;2006年
2 李钠;菲对水田土壤微生物基因多样性和菲降解菌多酚氧化酶、GST酶的影响[D];浙江大学;2006年
3 陈威;发酵法产邻苯二酚菌株的筛选及固定化细胞的条件优化[D];广西大学;2007年
4 周鑫淼;Delftia tsuruhatensis AD9邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的表达和功能研究[D];中国农业科学院;2007年
5 吴文铸;水溶性有机物对土壤中多环芳烃(菲)环境行为及植物吸收的影响[D];南京农业大学;2007年
6 艾芳芳;菲降解菌Burkholderia sp. AFF的分离鉴定及特性研究[D];大连理工大学;2008年
7 曹晓星;多环芳烃降解菌的共代谢及其相关酶的研究[D];厦门大学;2006年
8 吴静;Aspergillus niger N-2植酸酶phyA基因的克隆及其在Pichia Pastoris中的高效表达[D];山东农业大学;2004年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026