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《草业学报》 2017年09期
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碱胁迫应答基因GsARHP的克隆及转基因紫花苜蓿的耐碱性分析

陈冉冉  朱娉慧  贾博为  宋雪薇  王子君  李佶娜  李强  丁晓东  朱延明  
【摘要】:本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物信息学分析表明,该基因编码一个含有130个氨基酸的亲水蛋白,含有信号肽但无跨膜结构域;构建了GsARHP植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化肇东紫花苜蓿,通过PCR,Southern Blot和RT-PCR方法检测获得了3个超量表达GsARHP基因的转基因株系,并对其耐碱性进行了分析。结果表明,在0,100和150mmol/L NaHCO3处理14d后,非转基因株系明显萎蔫、黄化甚至死亡,而转基因株系则长势良好;进一步分析其生理指标显示,相对质膜透性与丙二醛含量均显著低于非转基因株系(P0.01),而叶绿素含量与CAT活性显著高于非转基因株系(P0.01),说明GsARHP基因的超量表达可以增强紫花苜蓿的耐碱能力。
【作者单位】东北农业大学农业生物功能基因重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金项目(31171578) 黑龙江省高校科技创新团队建设计划项目(2011TD005) 东北农业大学学科团队建设项目—团队1资助
【分类号】:Q943.2;S541.9
【正文快照】:
目前,世界各地主要的农作物减产是由非生物胁迫造成的[1]。植物长期处于不良环境中,会使植物体内产生相关生理代谢反应,致使植物机体产生结构和功能上的改变,严重时甚至会造成不可逆的损伤,导致整个植株死亡[2]。其中,盐碱胁迫是影响植物生长最主要的环境因素之一,大面积的盐

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