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《蚕业科学》 2018年02期
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利用RGR核酶结构拓展家蚕CRISPR基因组编辑系统的应用研究

张启超  宋红生  曾保胜  陈树清  许军  李芝倩  张忠杰  陈旭  
【摘要】:针对目前家蚕基因组编辑平台在基因组特定位点的靶点选择、多靶点同时编辑等方面的技术瓶颈,利用家蚕卵巢培养细胞系(Bm N)验证含有双核酶结构的RGR(Ribozyme-gRNA-Ribozyme)在CRISPR/Cas9基因组编辑系统中的应用效果,用以拓展现有CRISPR/Cas9系统的靶点范围。研究结果显示,采用Cas9系统和Cpf1系统,RGR结构在Bm N细胞中具有良好的定点编辑效果,可成功实现对内源、外源靶基因序列的剪切,且对内外源基因具有高效编辑作用,表明RGR结构可应用于家蚕CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1基因组编辑系统。利用RGR结构的自剪切功能不仅可以拓展家蚕基因组靶基因的范围,还为进一步实现多靶点编辑打下了基础。

【相似文献】
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 吴芸;CRISPR/Cas9高效等位基因编辑系统的构建及其在猪基因组编辑中的应用研究[D];西北农林科技大学;2017年
2 邵斯旻;新型ScRad52-Cas9基因组精确编辑系统的建立及猪IGF2基因的高效编辑[D];西北农林科技大学;2017年
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