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《创伤外科杂志》 2006年02期
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鼠胚成骨细胞的原代培养与鉴定

傅德皓  杨述华  马德彰  李鲲  郜勇  
【摘要】:目的探讨经济、高效的原代成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法孕龄19天的昆明孕鼠(KM),无菌条件下剖腹取出胎鼠,然后取胎鼠的颅盖骨,剔净、漂洗、剪碎。用0.25%胰蛋白酶消化10分钟,终止消化后,将碎骨块接种于培养瓶中培养,通过相差显微镜、透射电镜观察,并用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化染色和钙结节茜素红染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论改良的组织块培养法可在较短时间内获得大量成骨细胞,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 傅德皓;杨述华;杨操;李鲲;宁旭;王晶;聂宇;;骨形态发生蛋白-2促进胚胎成骨细胞血管皮内生长因子表达的剂量依赖性效应[J];创伤外科杂志;2006年06期
2 傅德皓;杨述华;杨操;叶哲伟;王晶;聂宇华;;BMP-2促进鼠胚成骨细胞VEGF mRNA表达的时间依赖性效应[J];中国骨与关节损伤杂志;2006年08期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 胡雪琴;铅暴露对骨骼形成的影响及其机理研究[D];第三军医大学;2007年
2 傅德皓;骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中血管内皮生长因子的表达及意义[D];华中科技大学;2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 闫爱民,刘力,陈秉礼,王智彪;兔胚成骨细胞移植修复异体兔骨缺损的实验研究[J];创伤外科杂志;2003年02期
2 高飞,霍建忠;不同龄小鼠成骨细胞OPG和RANKL表达的变化[J];中华风湿病学杂志;2005年04期
3 李靖,黄鲁豫,王全平,吕荣,白建萍,倪国华;改良组织块混合酶消化法成骨样细胞培养[J];中国骨伤;2003年11期
4 钟代彬,吴培福,曲伟杰,王梅,苏敬良,金久善,韩博;山羊成骨细胞的体外培养和鉴定[J];中国兽医科技;2005年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵斌;葛金芳;朱娟娟;黄晓晖;李俊;;小议在MTT法测细胞增殖抑制率中IC_(50)的计算方法[J];安徽医药;2007年09期
2 余晋林;伍伟健;;ABO反定型试剂红细胞配制方法的探讨[J];中国输血杂志;2006年04期
3 徐薇;惠宁;陈钢;黄秀深;薛红;;柴胡止血液、逍遥丸、归脾丸对人子宫内膜螺旋动脉内皮细胞一氧化氮合酶的影响[J];成都中医药大学学报;2005年04期
4 王端明,易中,海里且木,陈静波;牛皮肤成纤维细胞体外培养系统的建立[J];草食家畜;2005年02期
5 师铁英;高伟;;大鼠表皮角质形成细胞传代培养的消化方法[J];长春中医学院学报;2006年01期
6 李先安;雷光华;刘文和;李康华;覃芙;;大鼠成骨细胞的体外培养和鉴定[J];湘南学院学报(医学版);2007年01期
7 吕仁发,周强,许建中,张劲松,王序全,李洪鹏;双相接种法体外构建组织工程骨[J];第三军医大学学报;2005年16期
8 吕仁发,周强,许建中,张劲松,赖忠良,杜合杰;循环灌注式三维组织培养装置的设计及其性能测试[J];第三军医大学学报;2005年16期
9 刘乐斌,杨录军,刘胜学,刘晋祎,敖琳,黄晓春,曹佳;昆明山海棠总生物碱对肺腺癌A549细胞株增殖抑制作用的实验研究[J];第三军医大学学报;2005年19期
10 江明宏,舒茂琴,覃跃龙;ORC1在大鼠血管平滑肌细胞增殖过程中的表达[J];第三军医大学学报;2005年22期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 孙立婷;钟代彬;吴培福;苏敬良;韩博;;氟致体外培养山羊成骨细胞损伤的超微结构观察[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
2 李荣亨;周小莉;;复元胶囊含药血清对软骨细胞增殖与合成代谢的影响[A];全国中西医结合强直性脊柱炎专题研讨会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张健;成骨细胞与血管内皮细胞联合培养复合肌瓣构建血管化组织工程骨的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
2 唐丽灵;周期性机械拉伸对大鼠成骨细胞生理活性和力学性质的影响[D];重庆大学;2002年
3 梁敏;孕酮和18-甲左炔诺孕酮对成骨细胞作用机制的研究[D];中南大学;2003年
4 丁晓颖;成骨生长肽羧基端5肽OGP_(10-14)及其类似物G48A对大鼠骨代谢的影响[D];天津医科大学;2003年
5 朱梅;源于脾多潜能干细胞的破骨细胞样细胞体外培养及其对成骨细胞生长和功能的影响[D];天津医科大学;2003年
6 李楠;补骨合剂对大鼠骨髓基质细胞增殖、分化及凋亡的分子调控机理研究[D];福建中医学院;2003年
7 罗彦凤;聚(DL—乳酸)的改性及体外降解和细胞相容性研究[D];重庆大学;2003年
8 任艳玲;肾虚骨质疏松大鼠和成骨细胞中TGF-β_1及其信号转导分子Smad2、4基因调控机制[D];辽宁中医学院;2003年
9 张春秀;基于抗原/抗体反应的生物检测技术及其应用研究[D];东南大学;2003年
10 俞莉敏;联合应用基因工程与组织工程技术诱导裸鼠脊柱异位成骨的实验研究[D];苏州大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘竞龙;聚丙交酯—乙交酯(PLGA)共聚和物支架的生物相容性及成骨能力的实验研究[D];第一军医大学;2002年
2 朱晓峰;益骨胶囊含药血清对成骨细胞分泌IGF-I、NO和破骨细胞凋亡的影响[D];暨南大学;2003年
3 田伟;骨重组AECM和Wistar鼠成骨细胞联合培养的实验研究[D];中国医科大学;2003年
4 覃昱;肌瓣复合BMP微球修复兔桡骨缺损的实验研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
5 孙海钰;诱生型一氧化氮合酶抑制剂对TNF-α、IFN-γ、IL-1β介导人成骨细胞凋亡的保护作用[D];山西医科大学;2002年
6 李彬;力学环境对成骨细胞功能状态的影响及其三维培养的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
7 王昊;应力作用下成骨细胞增殖信号转导机制的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
8 许波;兔骨髓基质细胞的体外培养及其生物学特性的观察[D];山东中医药大学;2004年
9 王媛;大豆异黄酮对体外培养成骨细胞代谢作用的研究[D];天津医科大学;2004年
10 张芳;壳聚糖-明胶-磷酸三钙多孔复合体作为骨组织工程支架的实验研究[D];山西医科大学;2004年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 安兰敏;牛玉杰;徐兵;刘纳;;铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对fos、jun、p53基因和一氧化氮合酶表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2006年05期
2 金敏,李君文,王忠彦;微生物胶原酶研究进展[J];氨基酸和生物资源;2003年01期
3 郑刚;张云;屈大坤;;不同剂量维生素D治疗佝偻病对乳牙萌出的影响[J];蚌埠医学院学报;2007年01期
4 陈幼春,曹红鹤,李宏滨;品种内亚群定点随机抽样法的应用研究[J];黄牛杂志;2001年01期
5 王稚英,王兴,肖军军,董晓敏,孟书聪,赵曼;连续植块培养原代成骨细胞及其特性的比较[J];北京大学学报(医学版);2004年01期
6 牟善松,毛萱,石海涛,汤顺清;骨组织工程支架-多孔β-磷酸三钙陶瓷的制备与性能[J];材料科学与工程学报;2003年04期
7 闫爱民,刘力,陈秉礼,王智彪;兔胚成骨细胞移植修复异体兔骨缺损的实验研究[J];创伤外科杂志;2003年02期
8 朴宰日,王岳飞,杨贤强,陈留记,杨勇,赵保路,焦鸿利,周淡宜;儿茶素对铅诱导HepG2细胞氧化损伤及茶多酚对铅毒小鼠体内铅含量的影响[J];茶叶科学;2003年02期
9 李先安;雷光华;刘文和;李康华;覃芙;;大鼠成骨细胞的体外培养和鉴定[J];湘南学院学报(医学版);2007年01期
10 郗永义,郑秀芬,叶健,霍赛虎,张健,陈帅锋;维生素D受体研究进展[J];大连医科大学学报;2004年03期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 张皎;笼养蛋鸡骨质疏松的IP98防治机理及骨质疏松与IGF-Ⅰ的RFLP关系研究[D];南京农业大学;2004年
2 张建峰;鸡IGF-Ⅰ对成骨细胞功能的影响及其基因多态性与蛋鸡骨代谢相关性的研究[D];南京农业大学;2005年
3 胡细连;大熊猫等濒危动物IGF-Ⅰ基因的克隆、表达与组织分布研究[D];浙江大学;2005年
4 李涛;1,25-(OH)_2D_3作为生物活性因子在组织工程骨中的应用[D];苏州大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 徐萍;重组人胰岛素样生长因子I(rhIGF-I)对大鼠成骨细胞影响的研究[D];南京医科大学;2005年
2 刘阳;蓝狐GDF8基因cDNA克隆及GDF8基因与IGF-I基因表达研究[D];东北林业大学;2005年
3 肖翠红;籽鹅IGF-Ⅰ基因的克隆表达及其与生长性能的关系[D];黑龙江八一农垦大学;2006年
4 王强;鸡IGF-I基因PCR-SSCP分析及其与肉用性状关系的研究[D];扬州大学;2006年
5 李波;猪SLA抗原递呈相关新基因的克隆及功能分析[D];四川农业大学;2006年
6 顾以韧;IGF-1基因在不同猪种群体中的遗传多态性及遗传效应分析[D];四川农业大学;2007年
7 徐晶;吉林白鹅IGFⅡ基因SNP及其与肉用性状相关性的研究[D];吉林农业大学;2007年
8 周锦玉;吉林白鹅IGF-I基因的SNP与产绒性状的相关性研究[D];吉林农业大学;2007年
【二级引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 傅德皓;骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中血管内皮生长因子的表达及意义[D];华中科技大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 戴生明;破骨细胞的分化与激活及其在关节炎骨质破坏中的作用[J];中华风湿病学杂志;2004年05期
2 邓力,陈槐卿,郑虎,彭雪梅;去卵巢山羊成骨细胞的体外培养[J];生物医学工程学杂志;1999年03期
3 唐玲丽,周劲松,沈兵,尹毅;胎儿骨移植修复良性骨肿瘤术后骨缺损[J];中国修复重建外科杂志;2001年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 卓丽玲;刘宗平;;钙对成骨细胞活性、[Ca~(2+)]_i及GJIC的影响[J];中国兽医学报;2011年09期
2 陈国武;孟纯阳;蒋电明;胡侦明;;重组真核表达质粒pEGFP/hVEGF_(165)转染兔成骨细胞条件的优化[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年20期
3 周颖;侯树勋;衷鸿宾;;RNF185的克隆及过表达对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响[J];军事医学;2011年06期
4 余夫;;生命的支撑——人与动物的骨骼(下)[J];百科知识;2011年13期
5 吕银洁;张艳红;刘琳;朱良均;姚菊明;;Silk-RGD融合蛋白修饰羟基磷灰石/丝素蛋白支架对成骨细胞生长的影响[J];复合材料学报;2011年04期
6 吴卫妮;任妮;王志豪;范洁;徐永平;;山羊背根神经节神经细胞的原代培养及鉴定[J];中国兽医科学;2011年09期
7 刘振东;肖玉跃;张朝跃;陶建春;黄祖发;;胫骨牵引成骨过程中骨形态形成蛋白4及其受体的表达[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年20期
8 苗兰英;林大勇;白剑;杨葳;张伯阳;王良君;杨菁;刘书林;;低氧条件下大鼠血管内皮细胞的形态观察[J];生物学杂志;2011年04期
9 腊晓琳;田海清;蔡霞;;高效制备昆明鼠胚胎成纤维细胞饲养层[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年27期
10 常冰梅;刘晓军;李美宁;张栋;张悦红;程牛亮;牛勃;;人肝细胞生长因子在毕赤酵母中的分泌表达及其活性[J];中国生物制品学杂志;2011年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 顾琪;张学军;贺恒益;朱汉民;;体外培养大鼠颅骨成骨细胞生物学特性的初步研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
2 张小云;张宇;;恒定磁场对骨组织中细胞影响的机制研究[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
3 刘琴丽;孙树津;霍波;龙勉;;成骨细胞铺展形状和面积对其凋亡的影响[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年
4 唐丽灵;王远亮;秦建;苏爱华;;周期性拉伸对成骨细胞基质合成、矿化和分化的影响[A];第七届全国生物力学学术会议论文集[C];2003年
5 唐本森;姜泳;尹培荣;吴承龙;宋华;;胎兔成骨细胞与bFGF-明胶海绵复合物的体外共建[A];2006年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2006年
6 宋晓平;窦忠英;雷安民;华进联;杨学义;马勇江;;小鼠成骨细胞条件培养基的制备[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
7 张碧辉;陈楚楚;李可心;;间断性压应力对离体培养成骨细胞的作用[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年
8 唐本森;姜泳;尹培荣;;成骨细胞、bFGF与明胶海绵体外共建的研究进展[A];2006年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2006年
9 徐岚;;人B7-H3在骨髓基质细胞体外诱导为成骨细胞过程中的表达特性和生物学作用[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
10 陈婷婷;李智;徐选福;徐亚伟;左玫;苏莉;李晶华;曹谊林;胡洪亮;;Wnt7b重组逆转录病毒载体的构建及其在C3H10T1/2中的表达[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 记者 张建松 吴宇;狗头“补丁”打开组织工程广阔天地[N];新华每日电讯;2001年
2 航院;清华教师在干细胞世系分化研究中取得重要进展[N];新清华;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 罗晓中;组织工程骨低温保存的实验研究[D];四川大学;2005年
2 宋晓平;小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成骨细胞研究[D];西北农林科技大学;2003年
3 唐丽灵;周期性机械拉伸对大鼠成骨细胞生理活性和力学性质的影响[D];重庆大学;2002年
4 祁洁;骨组织工程中成骨细胞与生物材料相互作用的分子机制[D];四川大学;2005年
5 李涛;1,25-(OH)_2D_3作为生物活性因子在组织工程骨中的应用[D];苏州大学;2005年
6 廖文波;可塑形组织工程骨的实验研究[D];四川大学;2005年
7 胡冉;十三种化合物诱导的小鼠原代培养肝细胞基因表达谱的聚类分析[D];第三军医大学;2005年
8 吴江;钛颗粒负荷对假体松动过程中主要细胞功能的影响及其机理研究[D];四川大学;2005年
9 徐卫袁;构建骨髓间充质干细胞/牛骨形态发生蛋白/丝素蛋白组织工程骨的实验研究[D];苏州大学;2005年
10 张兵兵;力生长因子的制备与功能研究[D];重庆大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郦光丰;骨组织力电效应及成骨细胞离体培养的数值分析[D];重庆大学;2002年
2 侯晋;持续性静压力对体外培养成骨细胞生物学特性和细胞内外Ca~(2+)分布影响的实验研究[D];第四军医大学;2004年
3 于国宁;体外成骨细胞与生物衍生骨联合培养的实验研究[D];中国医科大学;2005年
4 李娜;组织工程中应变对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
5 徐炜;钛合金颗粒对体外培养人成骨细胞作用的实验研究[D];苏州大学;2005年
6 赵虎;成骨细胞在新型生物反应器内的大规模扩增[D];大连理工大学;2006年
7 丁奕健;兔成骨细胞的培养及生长因子对其体外增殖影响的实验研究[D];浙江大学;2001年
8 韩立强;人体脂肪基质细胞的分离培养及其成骨活性的研究[D];天津医科大学;2006年
9 卢霞;体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞[D];浙江大学;2006年
10 李大军;力信号调控的大鼠成骨细胞力生长因子表达及其对成骨细胞生理行为的影响[D];重庆大学;2008年
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