小麦基因组AFLP反应体系的建立

贾璇杨文香刘大群

【摘要】：利用小麦抗叶锈近等基因系研究了小麦基因组AFLP反应体系,建立了适于小麦基因组的AFLP反应体系:40μL酶切体系中采用7.5UPstⅠ和5UMseⅠ37℃3h,65℃3h双酶切0.1～0.2μgDNA,然后加入10μL接头、T4连接酶混合液,16℃连接过夜;吸取未稀释的酶切连接液4μL,加入75ng预扩增引物,10mmol/LdNTP,1.5UTaq酶,1×buffer,加PCR水至40μL进行预扩,将预扩产物稀释20倍,吸取5μL,加入40ng选择性引物,1.25UTaq酶,7.5mmol/LdNTP,2%去离子甲酰胺,1×buffer,加PCR水至25μL进行选择性扩增。本研究为小麦抗叶锈基因的分子标记克隆及抗病育种的辅助选择提供有力的工具。

【作者单位】：河北农业大学植物保护学院河北农业大学植物保护学院河北农业大学植物保护学院
【关键词】：小麦 基因组 AFLP 影响因素
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30170602)
【分类号】：S512.1
【正文快照】：

AFLP标记实际是RFLP和PCR相结合的一种技术,所需DNA量少,不需Southern杂交,并且不需要预先知道目的基因的序列信息,试验结果稳定可靠,重复性强,呈典型的孟德尔遗传,每个AFLP反应可以检测的位点多达50～100个,多态性很强,非常适合遗传多样性分析[1,2]、种质鉴定[3]、基因定位[4

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前10条

1	王赞,高洪文,韩建国;柠条锦鸡儿DNA提取及AFLP反应体系的建立[J];草地学报;2005年02期
2	杨文香,贾璇,闫红飞,魏新燕,刘大群,孟庆芳,张汀;小麦抗叶锈基因Lr44的AFLP分子标记[J];河北农业大学学报;2005年02期
3	程飞;叶卫;叶富良;刘波;;长臀AFLP分析体系的建立[J];南方水产;2007年04期
4	杨文香,刘大群,贾璇,阎红飞,刘占良,孟庆芳,张汀;小麦抗叶锈基因Lr44的AFLP分子标记[J];农业生物技术学报;2005年03期
5	张超,思彬彬,徐如宏,任明见,朱文华,张庆勤;AFLP技术及其在小麦遗传研究中的应用[J];山地农业生物学报;2005年04期
6	赵红梅;岳昌明;朱婕;王振英;;小麦抗病性研究的AFLP分析体系的建立[J];天津师范大学学报(自然科学版);2007年04期
7	柯贤锋;智丽;眭顺照;秦华;李名扬;李先源;;野百合AFLP反应体系的建立及优化[J];西南大学学报(自然科学版);2007年12期
8	雒淑珍;赵继荣;魏玉杰;张肖凌;;小麦cDNA-AFLP技术体系建立的研究[J];中国农学通报;2010年18期
9	赵立强;潘文嘉;马继芳;瓮巧云;董立;全建章;邢继红;董志平;董金皋;;一个谷子新抗锈基因的AFLP标记[J];中国农业科学;2010年21期
10	贾璇,杨文香,刘大群;小麦抗叶锈基因Lr38的AFLP标记[J];植物病理学报;2004年04期

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前7条

1	白瑞霞;AFLP技术在枣种质资源鉴别和分类研究中的应用[D];河北农业大学;2005年
2	崔会肖;小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系SSR、AFLP和双向电泳的比较[D];天津师范大学;2005年
3	李莉;RAPD及SRAP标记在中国枣属植物系统分类学中的应用研究[D];河北农业大学;2007年
4	程琳;帽儿山地区异色瓢虫不同色斑型的SRAP与ISSR分析[D];东北林业大学;2009年
5	唐琦;琯溪蜜柚单染色体AFLP指纹图谱构建和分类[D];福建农林大学;2010年
6	陈华;小麦抗条锈病新基因YrP81和YrSph分子标记[D];四川农业大学;2010年
7	蒋秀华;小麦旗叶性状对光合作用和产量的影响及旗叶基因的AFLP标记[D];四川农业大学;2010年

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前10条

1	杜传印;王玉军;李斯深;李常保;刘洪祥;田纪春;;烟草AFLP银染分析体系的建立[J];山东农业科学;2007年05期
2	蔡健,赵小三;作物亲本间遗传差异与杂种优势研究进展[J];安徽农业科学;2002年04期
3	王念;何威;王文君;刘迎节;;AFLP分子标记在泡桐遗传育种中的应用与前景[J];安徽农业科学;2008年01期
4	孙立娜;王璐;;分子标记及其在玉米研究中的应用[J];安徽农业科学;2008年19期
5	刘成;李俊才;许雪峰;李天忠;韩振海;;AFLP及其在果树中的应用[J];北方园艺;2007年03期
6	张德强,张志毅,杨凯;杨树分子标记研究进展[J];北京林业大学学报;2000年06期
7	张德强,张志毅,杨凯;分子标记技术在杨树遗传变异及系统分类中的应用[J];北京林业大学学报;2001年01期
8	张德强,张志毅,杨凯,田林;AFLP标记在毛新杨×毛白杨BC_1群体中的分离(英文)[J];Forestry Studies in China;2002年02期
9	李爱丽,马峙英;AFLP分子标记与作物改良[J];河北农业大学学报;2001年01期
10	赵宏,王省芬,张桂寅,马峙英;棉花AFLP技术体系的摸索与建立[J];河北农业大学学报;2002年01期

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前6条

1	刘雪;李明顺;李新海;田清震;白丽;张世煌;;利用SSR标记分析玉米群体遗传变异的取样方法[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
2	李玉玲;王延召;吕德彬;陈绍江;汤继华;;爆裂与普通玉米自交系间的遗传关系及杂种优势预测研究[A];2004全国玉米种质扩增、改良、创新与分子育种学术会议论文集[C];2004年
3	易金鑫;侯喜林;;我国茄子主要地方品种与选育品种遗传多样性分析[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
4	田呈明;曹支敏;梁英梅;;中国杨树叶锈病的研究进展[A];第二届中国林业学术大会——S5 森林病害及其防治论文集[C];2009年
5	牛宝龙;翁宏飚;孟智启;;棉铃虫AFLP技术体系的建立[A];“蚕业生物技术与家蚕病害控制”高级研讨班、“家蚕生理、病理和生物技术”学术研讨会论文选集[C];2006年
6	胡新喜;何长征;熊兴耀;刘明月;宋勇;聂先舟;;PVY研究进展[A];马铃薯产业与粮食安全（2009）[C];2009年

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前10条

1	任光俊;水稻重要性状的遗传基础分析[D];四川农业大学;2001年
2	何光华;水稻杂种优势及其相关特性的分子生物学研究[D];西南农业大学;2001年
3	黎裕;玉米弯孢菌叶斑病抗性及其它农艺性状的QTL分析[D];中国农业科学院;2001年
4	武耀廷;棉花产量性状杂种优势的遗传基础研究[D];南京农业大学;2001年
5	李锡香;黄瓜种质遗传多样性的形态和分子评价及其亲缘关系研究[D];中国农业科学院;2002年
6	朱俊华;马铃薯Y病毒衣壳蛋白基因片段长度和结构对RNA介导抗病性的影响[D];山东农业大学;2003年
7	杨文香;Lr37、Lr44AFLP分子标记及124个小麦品种（系）抗叶锈基因鉴定[D];河北农业大学;2003年
8	王省芬;中国棉花抗枯、黄萎病品种的抗性与DNA指纹图谱研究[D];河北农业大学;2003年
9	赵世勇;一九八一至二000年四川玉米育成品种主要性状改良效果研究[D];四川农业大学;2003年
10	黄秦军;美洲黑杨×青杨连锁图构建及重要材性QTLs分析[D];北京林业大学;2003年

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前10条

1	田孟良;云南、贵州糯玉米与普通玉米种质资源的遗传差异比较研究[D];四川农业大学;2000年
2	鲍海滢;小麦核不育基因Ms2的分子标记[D];中国农业科学院;2000年
3	李明顺;温带和亚热带玉米自交系配合力和杂种优势群的初步研究[D];中国农业科学院;2000年
4	姜立杰;芜菁直根膨大性状的AFLP分析[D];浙江大学;2001年
5	张党权;香榧主要栽培品种的RAPD分子鉴别[D];中南林学院;2001年
6	刘世建;用RAPD和SSR分子标记对四川地方玉米种质杂种优势群的初步研究[D];四川农业大学;2001年
7	高世斌;我国现行玉米主要骨干自交系的数量性状、质量性状和AFLP标记的遗传差异[D];四川农业大学;2001年
8	王卓伟;桑树多倍体育种材料遗传背景的AFLP分析[D];西南农业大学;2001年
9	王新伟;马铃薯植株感染Y病毒后生理生化指标变化与抗病性的关系[D];东北农业大学;2001年
10	郑春晖;香榧AFLP实验体系的优化[D];中南林学院;2002年

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前10条

1	刘凤英,沈维良;龟纹瓢虫对蚕豆蚜的捕食效应研究[J];安徽农学通报;2001年03期
2	李冬波;朱建华;李鸿莉;黄凤珠;李江舟;潘丽梅;;龙眼AFLP银染体系的建立与优化[J];安徽农业科学;2008年03期
3	王园;金志强;陈业渊;雷新涛;;芒果AFLP分子标记体系的建立及应用[J];安徽农业科学;2009年33期
4	巫厚长,程遐年,邹运鼎,魏重生,吕飞平,马方敏;不同饥饿程度的异色瓢虫成虫对烟蚜的捕食作用[J];安徽农业大学学报;2000年04期
5	高丽,单公华,周广芳,王斌;枣新品种——金丝3号[J];北方果树;1999年06期
6	童丽娟,王亚军,潘志崇,孙彩霞,张永靖;蜘蛛基因组DNA提取方法的比较[J];动物学杂志;2002年06期
7	张建珍,郭亚平,马恩波;不同保存方式下蝗虫组织DNA的提取及RAPD分析[J];动物学杂志;2004年02期
8	张艳,张树义;微卫星方法简介[J];动物学杂志;1999年02期
9	陈燕茹,许秀华,赵中明,张文霞,戴灼华;Drosophila immigrans果蝇随机扩增DNA多态性初步分析[J];北京大学学报(自然科学版);1997年02期
10	明军,张启翔,晏小兰,邱丽娟;梅花基因组AFLP银染反应体系的建立和优化[J];北京林业大学学报;2003年03期

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前1条

1	郝晨阳;王兰芬;董玉琛;尚勋武;张学勇;;我国西北春麦区小麦育成品种遗传多样性的AFLP分析[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年

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前4条

1	陈亮;茶组植物的分子系统学研究[D];浙江大学;2002年
2	鹿金颖;枣自然授粉实生后代杂种鉴定及遗传变异研究[D];河北农业大学;2003年
3	石胜友;变叶海棠起源及其遗传多样性分化研究[D];西南大学;2005年
4	王天宇;抗除草剂谷子新种质的研究与综合利用[D];中国农业科学院;1998年

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前5条

1	冯宝春;蒙山脆枣起源演化及抗旱生理研究[D];山东农业大学;2004年
2	李学营;基于核rDNA的ITS及cpDNA的psbA-trnH序列的中国枣属植物的系统发育[D];河北农业大学;2005年
3	白瑞霞;AFLP技术在枣种质资源鉴别和分类研究中的应用[D];河北农业大学;2005年
4	刘丹;小麦光腥黑粉菌（Tilletia foetida）AFLP分析及其种的特异性SCAR标记的发掘[D];四川农业大学;2005年
5	朱婕;普通小麦Brock中一个抗白粉病新基因AFLP分子标记研究[D];天津师范大学;2006年

	【二级引证文献】
	【二级引证文献】

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前10条

1	杜传印;王玉军;李斯深;李常保;刘洪祥;田纪春;;烟草AFLP银染分析体系的建立[J];山东农业科学;2007年05期
2	李瑞环;李新岗;黄建;高文海;张亚利;;枣树基因组DNA提取及其RAPD体系优化[J];安徽农业科学;2007年17期
3	陈文霞;张莉;;AFLP技术在植物病原真菌研究上的应用[J];安徽农业科学;2009年14期
4	甘晓燕;李苗;马洪爱;宋玉霞;;肉苁蓉种内变异的AFLP标记研究[J];北方园艺;2011年03期
5	宋俊双;王赞;高洪文;;三种锦鸡儿遗传多样性ISSR分析(简报)[J];草地学报;2006年04期
6	宋俊双;王赞;孙桂芝;高洪文;;柠条锦鸡儿的组织培养[J];草地学报;2007年01期
7	杨文香,贾璇,闫红飞,魏新燕,刘大群,孟庆芳,张汀;小麦抗叶锈基因Lr44的AFLP分子标记[J];河北农业大学学报;2005年02期
8	马庆华;续九如;;枣树分子标记研究进展[J];分子植物育种;2006年S2期
9	罗锐;杨会肖;黄少伟;赵奋成;刘天颐;刘纯鑫;;杂种松SRAP-PCR反应体系的优化[J];广东林业科技;2010年05期
10	魏亚冉;马成仓;齐书香;;不同气候条件下柠条锦鸡儿水力结构特征比较[J];干旱区研究;2010年03期

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前5条

1	李建超;刘孟军;;RAPD和AFLP分子标记在干果上的应用[A];第四届全国干果生产、科研进展研讨会论文集[C];2005年
2	隋串玲;王永康;李登科;赵爱玲;张生智;;枣种质资源的收集、保存、鉴定和利用[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
3	乔燕春;林顺权;郭栋梁;;SRAP分子标记在枇杷属植物研究中的应用[A];科技与创新——广东园艺科技论文集（广东省园艺学会第九次会员大会暨学术研讨会论文集）[C];2010年
4	宋春艳;楚鹰;陈明杰;谭琦;潘迎捷;;基于CEQ遗传分析仪的AFLP条件的优化试验[A];首届全国食用菌中青年专家学术交流会论文集[C];2006年
5	任洪艳;程凯;郑成淑;;菊花cDNA-AFLP分析体系的建立及应用[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年

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前10条

1	杜传印;白肋型烟草叶色基因的分子标记与烟草种质遗传多样性研究[D];山东农业大学;2006年
2	李在峰;中国小麦品种条锈鉴定及抗条锈新基因YrZH84的分子标记[D];中国农业科学院;2006年
3	杨九艳;鄂尔多斯高原锦鸡儿属（Caragana Fabr.）植物的生态适应性研究[D];内蒙古大学;2006年
4	张震;小叶锦鸡儿对不同放牧强度的生物学响应[D];中国科学院研究生院（植物研究所）;2006年
5	马庆华;不同产地冬枣遗传品质差异及其栽培技术研究[D];北京林业大学;2007年
6	陈云芳;小麦叶锈菌诱导TcLr19cDNA文库的构建与EST分析[D];河北农业大学;2007年
7	李星;小麦抗叶锈病基因Lr41差异表达研究[D];河北农业大学;2008年
8	白瑞霞;枣种质资源遗传多样性的分子评价及其核心种质的构建[D];河北农业大学;2008年
9	郑红梅;西藏几种嵩草种子萌发特性与分子系统发育研究[D];西北农林科技大学;2008年
10	林萍;中间锦鸡儿油酸脱氢酶（FAD2）基因克隆及酵母表达调控的研究[D];中国林业科学研究院;2008年

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前10条

1	刘莉;小冰麦33苗期抗叶锈性鉴定及抗叶锈基因研究[D];河北农业大学;2006年
2	刘华梁;Pavon76抗叶锈性基因的鉴定[D];河北农业大学;2006年
3	司玉君;抗白粉病小麦—中间偃麦草种质系的选育与鉴定[D];山东农业大学;2006年
4	高海波;小麦—中间偃麦草抗锈病易位系的创制及分子生物学鉴定[D];内蒙古农业大学;2006年
5	王凤涛;波斯小麦—粗山羊草双二倍体的抗叶锈性遗传分析及抗病基因的微卫星标记[D];中国农业科学院;2006年
6	左艳春;扁穗牛鞭草与白三叶混播的优化管理模式研究[D];四川农业大学;2006年
7	那潼;两种锦鸡儿种子人工老化中生理生化变化及基因组DNA损伤的ISSR研究[D];扬州大学;2007年
8	刘雅辉;23个小麦抗叶锈病近等基因系的SRAP多态性分析及Lr19的SRAP标记[D];河北农业大学;2007年
9	褚栋;小麦抗叶锈近等基因系TcLr38的cDNA-AFLP分析[D];河北农业大学;2007年
10	李莉;RAPD及SRAP标记在中国枣属植物系统分类学中的应用研究[D];河北农业大学;2007年

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1	郭瑞林;关立;秦广庆;;蛋白质凝胶电泳技术与小麦亲本分类[J];小麦研究;2004年03期
2	张超,陆和平,葛昌斌,徐如宏,张庆勤;偏凸山羊草的抗条锈病新基因YrG775的AFLP标记[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2005年S1期
3	杨文香,刘大群,贾璇,阎红飞,刘占良,孟庆芳,张汀;小麦抗叶锈基因Lr44的AFLP分子标记[J];农业生物技术学报;2005年03期
4	胡小荣,卢新雄,张云兰,张志娥,陈晓玲,辛萍萍;AFLP技术运用于小麦种子超干燥保存遗传完整性的初探[J];植物遗传资源学报;2003年02期
5	杨文香,贾璇,闫红飞,魏新燕,刘大群,孟庆芳,张汀;小麦抗叶锈基因Lr44的AFLP分子标记[J];河北农业大学学报;2005年02期
6	李星,杨文香,李亚宁,刘大群,闫红飞,孟庆芳,张汀;小麦抗叶锈病基因Lr19的AFLP标记[J];中国农业科学;2005年09期
7	高国庆,He Guo-bao,李杨瑞;花生微卫星DNA分离方法的研究[J];中国油料作物学报;2003年03期
8	高世斌,李晚忱,荣廷昭,陈永燕;玉米骨干自交系AFLP指纹图谱鉴定[J];四川农业大学学报;2001年02期
9	吕振岳,周达民,黄东东;AFLP标记及在微生物和动物中的应用[J];生物技术通报;2001年06期
10	伍春莲,孙敏,王颖,汪洪;AFLP分子标记及其在禾本科作物遗传改良中的应用[J];作物研究;2001年04期

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前10条

1	刘伟华;于嘉林;何震天;陈秀兰;聂桓;韩月澎;王锦荣;;小麦抗黄花叶病基因的AFLP标记[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
2	张超;陆和平;葛昌斌;徐如宏;张庆勤;;偏凸山羊草的抗条锈病新基因YrG775的AFLP标记[A];中国植物病理学第七届青年学术讨论会论文集[C];2005年
3	温春秀;吴志明;田伟;刘铭;周巧梅;谢晓亮;;丹参不同种质资源AFLP指纹系谱分析及其应用[A];2006海峡两岸暨CSNR全国第七届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2006年
4	黄文坤;郭建英;万方浩;高必达;彭德良;谢丙炎;;紫茎泽兰群体遗传多样性及遗传结构的AFLP分析[A];生物入侵与生态安全——“第一届全国生物入侵学术研讨会”论文摘要集[C];2007年
5	陈晓静;李广苹;申艳红;;漳州水仙单染色体文库的构建及其AFLP标记的研究[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
6	黄特跃;商晗武;高永生;崔旭红;于奎峰;;加拿大一枝黄花AFLP反应体系的建立及居群间遗传多样性分析[A];第二届全国生物入侵学术研讨会论文摘要集[C];2008年
7	廖华俊;宁志怨;董玲;江芹;李卫文;张雪娇;;马铃薯钴60辐照后代基因遗传变异的AFLP分析[A];中国园艺学会2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
8	杨锦红;刘洋;蒋伟燕;李方去;李向阳;;肺炎链球菌的AFLP基因分型和同源性研究[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
9	李鸣;谭裕模;李杨瑞;李容柏;高国庆;;用AFLP分子标记技术鉴定甘蔗品种[A];中国作物学会甘蔗专业委员会第十一次学术讨论会论文集[C];2004年
10	郑嫩珠;黄虹虹;陈晖;朱志明;缪中纬;李盛霖;董晓宁;;半番鸭AFLP标记与羽色性状的关联分析[A];福建省畜牧兽医学会2009年学术年会论文集[C];2009年

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1	刘洪春;怀远145万亩小麦全面开镰[N];蚌埠日报;2006年
2	通讯员杨玉栋朱永生;泗水抓好小麦秸秆禁烧及利用[N];济宁日报;2007年
3	史润生;山西小麦去年减产较多今年与去年一样不容乐观[N];粮油市场报;2006年
4	万达期货李警卫;美盘利多恐慌挥之不去郑盘徘徊之中意欲突破[N];粮油市场报;2007年
5	王伟民;我市夏收进入收官[N];苏州日报;2007年
6	高传立;我市万亩连片小麦亩产创新高[N];徐州日报;2008年
7	记者李冬玲;河南小麦“出访”东南亚[N];中国质量报;2003年
8	;2002我国小麦出口优势分析有备便有商机[N];农民日报;2003年
9	课屏昕;邢台小麦交易平淡[N];农民日报;2004年
10	农业部市场与经济信息司供稿;小麦、大米价升玉米价降[N];农民日报;2005年

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1	马守才;小麦多子房性状的遗传研究及AFLP分子标记[D];西北农林科技大学;2005年
2	宁红;玉米弯孢菌叶斑病菌检测技术及遗传多样性研究[D];四川大学;2002年
3	逯晓萍;高丹草遗传图谱构建及重要农艺性状的基因定位研究[D];内蒙古农业大学;2005年
4	赵辉;玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum）生理分化和遗传多态性研究[D];沈阳农业大学;2009年
5	刘振虎;中国苜蓿品种资源遗传多样性研究[D];北京林业大学;2004年
6	杨元明;四川省玉米杂交种种质研究[D];四川农业大学;2004年
7	李振侠;苹果砧木耐盐突变体的筛选及其鉴定[D];河北农业大学;2006年
8	王保通;中国小麦条锈菌优势种群预测及主要流行菌系的AFLP指纹分析[D];西北农林科技大学;2007年
9	郑红梅;西藏几种嵩草种子萌发特性与分子系统发育研究[D];西北农林科技大学;2008年
10	申雪艳;孔雀鱼微卫星DNA标记的研制及其遗传连锁图谱的构建[D];中国海洋大学;2007年

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前10条

1	贾璇;小麦抗叶锈基因Lr38的AFLP分子标记[D];河北农业大学;2003年
2	顾丽红;我国主要小麦品种的AFLP指纹图谱的建立[D];华南热带农业大学;2004年
3	温小杰;我国陆地棉抗枯黄萎病品种遗传多样性分析[D];河北农业大学;2004年
4	洪丕征;刺槐耐盐优良无性系初步选育及AFLP遗传多样性分析[D];山东农业大学;2011年
5	廖勇;AFLP分子标记与米产量杂种优势的关系的研究[D];中国农业大学;2003年
6	潘文嘉;利用AFLP技术对谷子抗锈基因进行分子标记[D];河北农业大学;2010年
7	朱肖艳;嫁接对西瓜品质性状的影响及AFLP多态性分析[D];河南大学;2011年
8	杜长青;小麦抗白粉病基因的分子标记研究[D];山东农业大学;2002年
9	沈恩健;利用AFLP和SSR对南海区域马氏珠母贝群体的遗传结构分析[D];广东海洋大学;2010年
10	赵宏;我国棉花抗枯黄萎病部分骨干品种的AFLP研究[D];河北农业大学;2002年

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