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《重庆理工大学学报(自然科学)》 2017年06期
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抗HPV16E6全蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

顾盼  胡仁建  王玲玲  周康森  吴胜昔  蔡家利  
【摘要】:为了制备特异性识别HPV16E6蛋白的单克隆抗体,为建立HPV早期诊断试剂盒提供有效试剂,通过细胞融合、间接ELISA方法筛选阳性克隆、多次亚克隆得到稳定分泌抗体的单克隆杂交瘤细胞株,体内诱生法大量制备腹水,过UNOsphere SuPrA~(TM)柱和ENrich~(TM)SEC650分子筛柱纯化,通过蛋白电泳鉴定其纯度并测定抗体浓度,并采用Western Blot法和间接免疫荧光法验证纯化后HPV16E6抗体与HPV16型阳性Caski细胞和HPV18型阳性Hela细胞特异性结合。建立了亚型为IgG2a的单克隆HPV16E6-4D4杂交瘤细胞株,两步纯化后得到纯度较高的抗体,可特异性识别HPV16型阳性的Caski细胞中的E6蛋白,不与Hela细胞反应,为在蛋白水平上检测HPV16型病毒提供了新手段。
【作者单位】重庆理工大学药学与生物工程学院;
【关键词】HPVE全蛋白 单克隆抗体 纯化 蛋白免疫印迹 间接免疫荧光法
【基金】:重庆理工大学研究生创新基金资助项目(YCX2015225) 重庆高校优秀成果转化资助项目(KJZH14212)
【分类号】:R392-33
【正文快照】:
引用格式:顾盼,胡仁建,王玲玲,等.抗HPV16E6全蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].重庆理工大学学报(自然科学),2017(6):107-112.Citation format:GU Pan,HU Ren-jian,WANG Ling-ling,et al.Preparation and Identification of Monoclonal Antibody ofAnti-HPV16E6[J].Journal of

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