收藏本站
《江西师范大学学报(自然科学版)》 2011年03期
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定

易海涛  夏立新  刘芳  闫浩  黄钟  汤慕瑾  陈大玮  刘志刚  
【摘要】:克隆克氏原螯虾主要过敏原原肌球蛋白的一个片段区基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫原性.提取克氏原螯虾总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆得到目的基因;将目的基因连入pMD19-T载体,提质粒酶切鉴定并测序;将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2+亲和层析(FPLC)纯化目的蛋白;利用Western-blotting和ELISA检测该重组蛋白的免疫原性.克隆获得目的基因,其片段长为291 bp,编码97个氨基酸.重组蛋白纯化后经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符.Western-blotting和ELISA结果表明该蛋白与克氏原螯虾过敏病人混合血清中IgE结合,具有免疫原性.

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 刘志刚;易海涛;夏立新;;低致敏原应用于特异性免疫治疗的研究进展[J];江西师范大学学报(自然科学版);2011年04期
2 胡志和;;虾类过敏原及消减方法研究进展[J];食品科学;2013年01期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 闫浩;邬玉兰;夏立新;刘志刚;;牛乳主要过敏原α-乳白蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年03期
2 易海涛;刘志刚;闫浩;刘芳;赵郭存;夏立新;;花生过敏原Ara h2.02的克隆、表达及免疫学鉴定[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年05期
3 龚世园;吕建林;孙瑞杰;李浪平;何绪刚;;克氏原螯虾繁殖生物学研究[J];淡水渔业;2008年06期
4 佟平;高金燕;陈红兵;;鸡蛋清中主要过敏原的研究进展[J];食品科学;2007年08期
5 董方勇;谢文星;谢山;梁友光;黄道明;陈文祥;胡传林;;克氏原螯虾洞穴的生态特征及其对水利工程安全影响的初步研究[J];水生生物学报;2008年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 戴颖;巩雪洁;李兵;王玉凤;黄卫国;;武汉地区克氏原螯虾繁殖期的研究[J];动物学杂志;2008年02期
2 易海涛;刘志刚;闫浩;刘芳;赵郭存;夏立新;;花生过敏原Ara h2.02的克隆、表达及免疫学鉴定[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年05期
3 魏波;夏立新;陈红兵;邬玉兰;刘志刚;;小龙虾钙结合蛋白基因表达及纯化[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年06期
4 刘志刚;易海涛;夏立新;;低致敏原应用于特异性免疫治疗的研究进展[J];江西师范大学学报(自然科学版);2011年04期
5 周向红;阎斌伦;李士虎;;中国明对虾主要过敏原基因分子克隆与序列分析[J];水产科学;2011年02期
6 Haider Samee;Jamil Khalid;;Studies on the Specific Degranulation of Mast Cell Sensitized by Several Allergens in vitro[J];Cellular & Molecular Immunology;2009年02期
7 陈寅;李会强;王萍;李韶深;孙静;;以特异性IgE为探针的鸡蛋过敏原成分分析[J];第三军医大学学报;2010年18期
8 龚世园;吕建林;孙瑞杰;李浪平;何绪刚;;克氏原螯虾繁殖生物学研究[J];淡水渔业;2008年06期
9 张在军;向军俭;;河虾中主要过敏原组分鉴定及分离纯化[J];广东医学;2006年05期
10 白卫东;沈棚;钱敏;黄静瑜;;花生过敏原物质及其脱敏方法研究进展[J];广东农业科学;2012年07期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 杨剑婷;白果过敏蛋白及其致敏机理的研究[D];南京林业大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 秦倩茹;抗卵清蛋白单克隆抗体的制备及卵清蛋白、醇溶蛋白ELISA检测方法的建立[D];中国海洋大学;2010年
2 李进;水环境理化因子对红螯螯虾繁殖性能和幼体发育的影响研究[D];中国海洋大学;2009年
3 陈寅;牛奶、鸡蛋过敏原的鉴定、纯化及应用研究[D];天津医科大学;2011年
4 王小丹;转基因牛乳腺生物反应器表达的重组人乳铁蛋白食用安全性和功能研究[D];中国疾病预防控制中心;2011年
5 柯燕娜;食品中谷物致敏原的常规PCR检测方法研究[D];华东理工大学;2012年
6 邓小芳;食品中四种重要过敏原酶联免疫检测方法的研究[D];江南大学;2012年
7 李浪平;克氏原螯虾食性、生长与掘洞行为的研究[D];华中农业大学;2006年
8 顾可飞;辐照对虾过敏原生化性质及抗原性的影响[D];中国农业科学院;2007年
9 戴颖;克氏原螯虾繁殖和胚胎发育的研究[D];华中师范大学;2008年
10 张华;刀额新对虾主要致敏原的分离纯化与鉴定[D];江南大学;2008年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 闫浩;邬玉兰;夏立新;刘志刚;;牛乳主要过敏原α-乳白蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年03期
2 易海涛;刘志刚;闫浩;刘芳;赵郭存;夏立新;;花生过敏原Ara h2.02的克隆、表达及免疫学鉴定[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年05期
3 董晓颖;高美须;潘家荣;张春红;王志东;李淑荣;;不同处理方法对虾过敏蛋白分子量及抗原性的影响[J];核农学报;2010年03期
4 杜欣军;张伟伟;孙伟英;王硕;;凡纳滨对虾原肌球蛋白基因表达模式与重组表达[J];渔业科学进展;2009年04期
5 龚祖埙,曹天钦;对虾原肌球蛋白晶体和纤维的电子显微鏡观察[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;1964年04期
6 李庆丽;李振兴;林洪;张轶群;吕鹏;;美拉德反应中麦芽糖、葡萄糖对虾过敏原活性影响的研究[J];食品工业科技;2009年01期
7 吴海明;胡志和;王超;;免疫印迹法对4种海虾主要过敏原的鉴定[J];食品科学;2010年16期
8 吴海明;胡志和;王丽娟;;凡纳滨对虾主要过敏原鉴定及酶法消减技术的研究[J];食品科学;2010年17期
9 吴海明;胡志和;;凡纳滨对虾过敏原酶法消减技术的研究[J];食品科学;2010年19期
10 王丽娟;胡志和;陈照丽;周汛;吴海明;;虾蛋白过敏实验动物模型的建立[J];食品科学;2010年19期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李振兴;虾(Penaeus Vannamei)过敏原免疫活性的研究[D];中国海洋大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 乌云娜;超高压处理对牛骨骼肌原肌球蛋白结构的影响[D];内蒙古农业大学;2011年
2 郑礼娜;虾类过敏原的活性分析及其抗原表位的研究[D];中国海洋大学;2011年
3 王晓斐;中国对虾(Penaeus chinensis)主要过敏原的鉴定及性质研究[D];中国海洋大学;2008年
4 张轶群;海产品过敏原免疫芯片检测方法的研究[D];中国海洋大学;2009年
5 黄园园;水产过敏原的模拟胃肠液消化[D];集美大学;2009年
6 黄建芳;河虾主要过敏原单克隆抗体的制备及河虾过敏原不同组分共同表位分析[D];暨南大学;2010年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 彭俊玲;马主要过敏原Equ c1的重组表达及其低过敏原性的改造[D];暨南大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 魏青山;关于河(螯)虾类名称的商榷[J];动物学杂志;1989年06期
2 闫浩;邬玉兰;夏立新;刘志刚;;牛乳主要过敏原α-乳白蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建[J];江西师范大学学报(自然科学版);2010年03期
3 唐建清,宋胜磊,潘建林,吕佳,黄成;克氏原螯虾对几种人工洞穴的选择性[J];水产科学;2004年05期
4 赵志常;张建军;张皖蓉;刘震;李旭锋;杨毅;;拟南芥DnaJ蛋白的过量表达对细菌耐盐性的影响[J];广西师范大学学报(自然科学版);2010年01期
5 朱崇梅;克氏原螯虾的生物学特性及开发利用[J];河南水产;2000年04期
6 魏青山;武汉地区克氏原螯虾的生物学研究[J];华中农学院学报;1985年01期
7 张湘昭,朱娟;淡水龙虾虾苗的人工繁殖与培育[J];中国农村科技;2002年07期
8 江河,汪留全;克氏螯虾生物学特性和人工养殖技术[J];齐鲁渔业;2002年12期
9 刘志刚;张杰;林格;;家蚕30kD特异性变应原的分析、纯化与质谱鉴定[J];昆虫学报;2007年02期
10 杨勇,阚建全,赵国华,付陈梅;食物过敏与食物过敏原[J];粮食与油脂;2004年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 殷悦;郝忱;唐建清;;克氏原螯虾养殖技术(中)[J];农家致富;2007年09期
2 顾启华;陈天兄;冀玉健;;鱼种池套养克氏原螯虾养殖试验[J];水产养殖;2007年06期
3 胡火庚;谌海虎;;大水面克氏原螯虾人工增殖技术[J];中国水产;2008年03期
4 史克荣;严维辉;;克氏原螯虾与河蟹混养试验初探[J];渔业致富指南;2008年06期
5 强晓刚;周凤建;王彬;;克氏原螯虾水泥池高密度养殖试验初报[J];水产养殖;2008年03期
6 舒新亚;;克氏原螯虾与中稻的轮作技术[J];农家顾问;2008年11期
7 宋雪明;;克氏原螯虾人工养殖中存在的误区与解决方法[J];渔业致富指南;2009年03期
8 陈昌福;;患病螯虾可导致螯虾暴发性疾病[J];农家顾问;2009年06期
9 唐建清;;克氏原螯虾养殖技术(五)[J];水产养殖;2009年06期
10 成爱兰;;成蟹池套养克氏原螯虾试验[J];水产养殖;2009年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘志刚;邬玉兰;杨睿;吴海强;;家蚕变应原tropomyosin基因的克隆表达、纯化[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年
2 任慧慧;张喜逢;张妍;刘晓辉;李健;;~7Long R3 IGF-I的克隆表达[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
3 0liverCromwell;;变应原特异性免疫治疗的方法与机理[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
4 陈丽金;赖乃揆;刘灶梅;潘凤鸾;周萍;;变应原皮内试验做好质控的重要意义[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
5 高鲁芳;姚秀云;;变应原皮内试验的不良反应及防治[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
6 霍俊英;;IVT体外检测变应原286例观察[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
7 张秀月;周明果;;变应原皮内试验的护理体会[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
8 宋瑜欣;丁凤姝;刘旭昕;;340例哮喘儿童变应原检查结果分析[A];中华医学会第二次全国变态反应学术会议论文汇编[C];2004年
9 王元文;魏莉;;山东省临沂市768例支气管哮喘患者变应原检测结果分析[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
10 李军;冯静;;571例荨麻疹患者变应原试验检测分析[A];2002中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 柳富荣 李振;克氏原螯虾人工养殖法[N];中国渔业报;2006年
2 章文敏 胡廷尖 周颖 王雨辰;克氏原螯虾苗种繁殖与养殖[N];中国渔业报;2007年
3 柳富荣 李振;克氏原螯虾人工养殖法[N];中国渔业报;2006年
4 柳富荣 李振;克氏原螯虾人工养殖法[N];中国渔业报;2006年
5 章文敏胡廷尖 周颖 王雨辰;克氏原螯虾苗种繁殖与养殖试验[N];中国渔业报;2007年
6 柳富荣 李振;克氏原螯虾人工养殖法[N];中国渔业报;2005年
7 江苏省淡水水产研究所研究员 徐在宽;高效水产品种推荐——克氏原螯虾[N];江苏农业科技报;2002年
8 李师民;荆州推广克氏原螯虾养殖技术规范促增收[N];中国渔业报;2008年
9 麦迪信;快速变应原接种疫苗安全有效[N];医药经济报;2002年
10 河口区海洋与渔业局 王树刚王树海;黄河三角洲地区克氏原螯虾养殖技术[N];中国渔业报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李强;放射状土壤杆菌M-503产生物絮凝剂的制备、纯化及应用研究[D];山东大学;2005年
2 徐境羚;马鹿精子膜蛋白纯化与理化性质分析[D];东北林业大学;2007年
3 马翠丽;天花粉蛋白新有效组分的纯化、一级结构及免疫调节和抗肿瘤活性研究[D];吉林大学;2008年
4 王敏炜;碳纳米管的制备及负载非晶态NiB合金的催化性能的研究[D];华南理工大学;2003年
5 陈静;嗜热毛壳菌热稳定糖化酶纯化及其编码基因的克隆与表达[D];山东农业大学;2006年
6 朱洁;乳酸链球菌素耐药菌株的筛选和耐药机理研究[D];浙江大学;2009年
7 于金刚;碳纳米管的化学修饰及对甲磺酸帕珠沙星的缓释研究[D];中南大学;2008年
8 惠明;枯草芽孢杆菌B53的分离鉴定及产聚γ-谷氨酸的研究[D];中国农业大学;2005年
9 胡志明;血管内皮细胞生长因子的制备及其治疗股骨头坏死的实验研究[D];第一军医大学;2005年
10 张玉芹;亚硝胺生物降解与硝酸还原酶的纯化及其编码基因的克隆[D];山东农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘娜;茁酶多糖生产菌的复合诱变筛选及发酵条件研究[D];吉林农业大学;2005年
2 张红静;超滤法提取与纯化香菇多糖[D];天津大学;2006年
3 宋影;Armillariella tabescens EJLY2098β-甘露聚糖酶47K的生产、纯化及性质与79K(P2)的基因克隆[D];暨南大学;2007年
4 王建波;玉米花粉多糖的提取纯化及生物活性的研究[D];山东师范大学;2005年
5 陈文芳;重组人白细胞介素18的纯化、复性及其生物活性检测[D];山东大学;2005年
6 卢明艳;越橘原生质体分离纯化研究[D];吉林农业大学;2006年
7 崔富昌;米曲霉植酸酶的分离纯化、性质研究及其基因的克隆[D];山东大学;2006年
8 付博;狂犬病疫苗与蟾皮提取液联合应用预防狂犬病效果的研究[D];吉林大学;2007年
9 于桉;磁性复合微粒在mRNA纯化中的应用[D];西北大学;2007年
10 贡汉生;四株乳杆菌产细菌素的研究[D];东北农业大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026