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人脂肪源性干细胞成骨诱导过程中Ⅰ型胶原的表达

王敏  孙新华  申玉芹  王景云  冯志远  
【摘要】:目的:研究人脂肪源性干细胞(hADSCs)成骨诱导后其合成和分泌Ⅰ型胶原能力的变化,探讨hADSCs作为组织工程骨的种子细胞的效能。方法:从人脂肪抽吸物中分离基质细胞,体外培养、扩增及鉴定。采用成脂诱导剂诱导hADSCs向脂肪细胞分化,采用油红O染色鉴定。采用成骨诱导剂诱导hADSCs向成骨细胞分化,将成骨诱导组分为0、7、14、21和28d组,分别于0、7、14、21及28d行茜素红染色检测矿化结节、VanGieson胶原纤维特殊染色染胶原纤维、Ⅰ型胶原细胞免疫荧光染色检测细胞Ⅰ型胶原的表达。用FVViewer1.7软件对Ⅰ型胶原表达的强度进行定量检测。结果:hADSCs成脂诱导14d后油红O染色阳性;hADSCs成骨诱导21d茜素红染色阳性;成骨诱导21dVanGieson胶原纤维特殊染色阳性;hADSCs成骨诱导后Ⅰ型胶原染色21d所有的细胞均阳性表达,28d呈强阳性表达。统计结果显示:Ⅰ型胶原的表达从7d开始,到28d逐渐升高,7、14、21和28d组与0d组比较差异均有显著性(P0.05)。结论:hADSCs成骨诱导后全部细胞呈现成骨表型,成骨能力强,可以作为骨种子细胞应用于临床骨再生治疗。

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