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《吉林大学学报(医学版)》 2003年03期
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电泳凝胶与转膜的原位切割方法

程熠  洪敏  高琳  李奇  
【摘要】:目的 :建立简易的快速分离高活性纯度酶以及用于氨基酸测序的转膜方法。方法 :以考马斯亮蓝 R- 2 5 0的磺基水杨酸水基染色液 ,确定聚丙烯酰胺凝胶与转印到 PVDF膜的蛋白电泳带的位置 ,以等位切割方法获得未受染色液污染的高纯度的活性酶组分以及转印的 PVDF膜。结果 :以适当浓度的考马斯亮蓝 R- 2 5 0的磺基水杨酸水基染色液染色 ,能保证聚丙烯酰胺凝胶和 PVDF膜在染色前后保持等长。结论 :等位切割方法能避免目前常见的如 SDS、染色液组分对酶活性以及测序结果造成的干扰

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张新军;谢洁;蓝希钳;肖杰;潘国庆;周泽扬;;具几丁质酶抑制活性的中性蛋白酶的筛选与纯化[J];西南农业大学学报;2006年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张新军;一株中性蛋白酶产生菌Bacillus sp.的筛选及其酶的纯化研究[D];西南大学;2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 程熠,史方亮,王之光,洪敏;溶栓素的纯化研究[J];白求恩医科大学学报;2001年01期
2 程牛亮,牛勃,张祖珣,赵景亥,单鸿仁;双胸蚓纤溶酶的纯化及性质[J];中国生物化学与分子生物学报;1990年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张祖珣;钟良玮;郑国平;王惠珍;赵建滨;单鸿仁;王峰峰;;地龙提取液的活血化瘀作用[J];中国中西医结合杂志;1992年12期
2 陈季旺;刘英;刘刚;王慧溪;;大米淀粉纯化工艺及其性质的研究[J];农业工程学报;2007年09期
3 张风凯,Malcom G.P.Page,金少鸿;铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药性主决定因素的研究[J];中国抗生素杂志;2000年05期
4 张瑞军,田志刚,魏海明,王增鑫,刘金生,王郡甫,张捷,孙汭;重组人白细胞介素18的纯化及其生物学活性研究[J];中国免疫学杂志;2001年08期
5 邵平;姜绍通;李岩;;分子蒸馏耦合脂肪酶催化浓缩菜籽油脱臭馏出物中维生素E研究[J];中国农业科学;2006年12期
6 王庆梅,王智炘,刘娟,王冬梅,陈珈;感染叶锈菌的小麦细胞间隙液中激发子的定性及初步分离[J];植物生理学报;2000年05期
7 姜玲,蔡礼鸿;一种提取银杏中DNA的方法[J];植物生理学通讯;2000年04期
8 黄峙,向军俭,郑文杰,郭宝江;钝顶螺旋藻富集转化硒及硒在藻体中的分布[J];植物生理学通讯;2001年01期
9 徐勤松,施国新,杜开和;锌胁迫下水车前叶细胞自由基过氧化损伤与超微结构变化之间关系的研究[J];植物学通报;2001年05期
10 胡文军,傅庭治;一种新型蚯蚓纤溶酶的研究[J];中药材;1997年02期
中国重要会议论文全文数据库 前7条
1 张娟;赵利;魏丽;刘建涛;曾志将;;贮藏温度和时间对蜂王浆水溶性蛋白质的影响[A];中国养蜂学会蜜蜂饲养管理专业委员会第十三次学术研讨会论文集[C];2007年
2 邹莹;;硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的提取[A];第十二届山东省药剂学术会议论文集[C];2006年
3 李强;陈明;夏蕊蕊;张玉臻;;生物絮凝剂产生菌M-503的分离鉴定及絮凝特性研究[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年
4 付加雷;宋长征;张更林;;壳聚糖/海藻酸钠微囊对干扰素-tau的控释作用[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
5 任慧霞;赵雪;聂晓燕;;健脾止遗片有效成分对家兔膀胱明胶酶的影响[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
6 任慧霞;赵雪;聂晓燕;;健脾止遗片有效成分对家兔膀胱明胶酶作用的研究[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
7 曾义勇;陈洪;;超临界二氧化碳中的脂肪酶稳定性及香茅酯的合成[A];2006年中国香料香精学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘玉红;茶藨子木层孔菌多糖及其硫酸化衍生物的制备、结构分析与生物活性研究[D];山东大学;2007年
2 陈磊磊;eNOS基因转染对心肌梗死后心脏保护作用的实验研究[D];南京医科大学;2007年
3 崔凤霞;海参胶原蛋白生化性质及胶原肽活性研究[D];中国海洋大学;2007年
4 马丽艳;海洋细菌褐藻胶裂解酶在大肠杆菌中表达,加工与转运及重组酶的纯化与性质研究[D];中国海洋大学;2007年
5 余勃;枯草芽孢杆菌发酵豆粕生产大豆活性多肽的研究[D];南京农业大学;2006年
6 周琳;雷公藤总生物碱杀虫作用研究[D];西北农林科技大学;2007年
7 黄现青;Bacillus subtilis fmbJ产生的脂肽抗微生物效果及安全性评价[D];南京农业大学;2006年
8 谢东扬;灵芝中一种DNase的特征和MT基因序列分析[D];福建农林大学;2007年
9 邱业先;红壤稻田脲酶研究[D];湖南农业大学;2000年
10 陈明杰;草菇低温应答研究[D];南京农业大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李敏;油菜花粉多糖的分离、纯化、结构鉴定及抗氧化活性的研究[D];南昌大学;2007年
2 余玮;粗壮脉纹孢菌发酵对豆渣营养成分的影响及多糖分离纯化研究[D];南昌大学;2007年
3 易明花;发酵型大豆多肽酸乳饮料的研究[D];南昌大学;2007年
4 崔建梅;强身固本胶囊对去势雄性大鼠生殖内分泌及运动能力的实验研究[D];山西大学;2007年
5 王迎华;大肠杆菌galU基因在乳酸乳球菌中的克隆及其对胞外多糖产生的影响[D];南昌大学;2007年
6 孟尧;长效尿酸酶(URICASE-PEG40KD结合物)的制备及基本性质研究[D];四川大学;2007年
7 尉研;郁金提取物对山葵墨入病菌的抑菌活性研究[D];四川大学;2007年
8 闫根全;丹参素钠的提取及注射用丹参素钠的研制[D];四川大学;2007年
9 萧培珍;日粮铁、锌补充量对异育银鲫生长、生理机能及器官中微量元素含量的影响[D];苏州大学;2007年
10 何雪莲;罗非鱼加工下脚料发酵生产鱼露的研究[D];华南热带农业大学;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张桂英;蚯蚓粉替代鱼粉对蛋鸡产蛋性能的影响[J];甘肃农业大学学报;1995年01期
2 严民宏,王二力,周元聪,陈远聪,陶宗晋;赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究[J];华东理工大学学报;1991年01期
3 王冲,郑冬梅,孙振钧;蚯蚓在畜牧生态系统中的应用[J];家畜生态学报;2005年02期
4 孙振军,刘清,尹辉,任洪香,迟建志;鲜蚓代替鱼粉、蚓粪代替部分饲粮饲喂蛋鸡试验研究[J];莱阳农学院学报;1994年02期
5 仓龙,李辉信,胡锋,王霞;赤子爱胜蚓处理畜禽粪的最适湿度和接种密度研究[J];农村生态环境;2002年03期
6 杨文霞;郑金伟;李志鹏;刘强;胡锋;李辉信;;果皮、菜叶混合垃圾的蚯蚓堆制处理[J];生态与农村环境学报;2006年02期
7 李辉信,胡锋,仓龙,陈庆青,何锋;蚯蚓堆制处理对牛粪性状的影响[J];农业环境科学学报;2004年03期
8 陈宝书,陈本建,张惠霞,罗俊强;蚯蚓粪营养成分的研究[J];四川草原;1998年03期
9 梁继东;周启星;孙福红;;蚯蚓在环境安全研究中的应用[J];生态学杂志;2006年05期
10 杨建雄;环毛蚓纤维素酶C_X的初步研究[J];陕西师范大学学报(自然科学版);1998年02期
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 吕美巧;几丁质酶抑制剂的研究[D];浙江工业大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 程牛亮,牛勃,张祖珣,赵景亥,单鸿仁;双胸蚓纤溶酶的纯化及性质[J];中国生物化学与分子生物学报;1990年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 杜丽萍,余其兴,周荣家,崔建勋,郭一清,赵则春;黄鳝二价体上微量DNaseⅠ敏感性和限制性内切酶原位切割分析[J];遗传学报;1998年04期
2 程熠,洪敏,高琳,李奇;电泳凝胶与转膜的原位切割方法[J];吉林大学学报(医学版);2003年03期
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