蓝猪耳启动子捕获系统的建立

龙海涛李洪清李玲

【摘要】：为了分离基因启动子,构建了陷阱植物表达载体pHAHCA,用农杆菌介导的无启动子GUS方法转化蓝猪耳,经抗性筛选和PCR检测,获得82株转基因植株,转化率达12.5%。12株GUS染色呈阳性,其中10株GUS在叶脉表达,2株在茎和叶脉表达。对转基因植株进行盐胁迫处理,有1株根部出现GUS染色蓝色斑点。通过TAIL-PCR扩增和测序,获得5个T-DNA侧翼序列。

【作者单位】：华南师范大学生命科学学院华南师范大学生命科学学院华南师范大学生命科学学院
【关键词】： 启动子捕获 T-DNA侧翼 GUS报告基因 蓝猪耳
【基金】：广东省自然科学基金资助项目(003062)
【分类号】：Q943.2
【正文快照】：

蓝猪耳(Torenia fournieriLinden)属玄参科蓝猪耳属,是热带亚热带地区1 a生观赏花卉植物,其生长周期短、容易再生且具备特殊的裸露胚囊[1],是植物细胞分化、花器官发育和授粉受精研究的理想模式植物[2]。近年来通过传统育种和分子育种等方法已获得了蓝猪耳的变种,其改变了花

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	【引证文献】
	【引证文献】

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前2条

1	魏小慧;郑肖兰;郑服丛;;启动子捕获技术及其研究进展[J];江西农业学报;2009年04期
2	魏小慧;林春花;郑肖兰;张新春;贺春萍;郑服丛;;利用启动子捕获技术构建橡胶炭疽病菌突变体库[J];热带作物学报;2009年06期

	【参考文献】
	【参考文献】

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前1条

1	刘博;苏乔;汤敏谦;袁晓东;安利佳;;应用于染色体步移的PCR扩增技术的研究进展[J];遗传;2006年05期

	【共引文献】
	【共引文献】

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前10条

1	王葵娣;郑服丛;;一种快速·有效分离T-DNA插入位点的侧翼序列的方法——DW-ACP-PCR技术[J];安徽农业科学;2007年28期
2	张向前;朱海涛;邹金松;曾瑞珍;;T-DNA插入产生的水稻小粒突变体遗传分析[J];安徽农业科学;2008年27期
3	刘春香;;基于随机引物的PCR-Walking技术[J];安徽农业科学;2010年06期
4	李凤龙;姚利晓;马园园;陈善春;;植物根特异性启动子研究进展[J];安徽农业科学;2012年15期
5	李清贤;陈睿;杨绍华;;水稻花药发育相关基因研究进展[J];现代农业科技;2010年04期
6	苗灵凤;刘运广;杨帆;;TAIL-PCR技术及其在医学上的应用[J];重庆医学;2007年10期
7	李平;杨玲玲;陈其新;史莹华;严学兵;陈占宽;王成章;;两种策略分别克隆紫花苜蓿光敏色素A、B基因[J];草业学报;2011年06期
8	巢伟;刘永杰;陆承平;;基因组步移技术扩增嗜水气单胞菌J-1株脂酶基因全长及原核表达[J];动物医学进展;2010年09期
9	胡宗利;陈国平;王中康;彭国雄;殷幼平;蔡绍皙;夏玉先;;绿僵菌NTL基因上游调控序列的克隆及分析[J];重庆大学学报(自然科学版);2006年04期
10	江贤章;陈金卿;田宝玉;高媛媛;舒正玉;李欣;蓝灿华;黄建忠;;破囊壶菌Δ~4-脂肪酸脱饱和酶基因5'端侧翼区域的克隆与鉴定[J];福建师范大学学报(自然科学版);2008年06期

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前2条

1	李平;王成章;严学兵;郭玉霞;史莹华;;两种策略分别克隆紫花苜蓿光敏色素A、B基因[A];中国草学会饲料生产专业委员会第十六次学术研讨会论文集[C];2011年
2	张倩;王宝维;王巧莉;范永存;姜晓霞;王娜;孙鹏;;鹅源草酸青霉CBHⅠ基因克隆及序列分析[A];中国家禽科学研究进展——第十四次全国家禽科学学术讨论会论文集[C];2009年

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前10条

1	佘茂云;小麦组织培养再生相关基因克隆及分子特性分析[D];中国农业科学院;2011年
2	胡昌泉;水稻胚乳发育相关基因的筛选及功能分析[D];福建农林大学;2011年
3	李莉;水稻花药发育控制基因OsADF的功能分析[D];中南大学;2011年
4	李兴旺;水稻绒毡层细胞程序性死亡调控育性的分子机理研究[D];华中农业大学;2011年
5	侯毅平;禾谷镰孢菌（Fusarium graminearum）对氰烯菌酯的抗药性机制研究[D];南京农业大学;2011年
6	苟敏;基于宏基因组的芳烃加氧酶获取及特性研究[D];大连理工大学;2011年
7	李鹄鸣;盾叶薯蓣适光生理生态及机理的研究[D];中南林学院;2002年
8	徐娟;几个柑桔产区果实色泽评价及红肉脐橙（Citrus sinensis L.cv.Cara cara）果肉呈色机理初探[D];华中农业大学;2002年
9	任茂智;棉花nodulin-like和arf1基因及其启动子的分离和功能分析[D];中国农业科学院;2004年
10	尉万聪;草甘膦诱导高表达基因及启动子的克隆和功能分析[D];中国农业科学院;2005年

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前10条

1	王岩;早实枳成花相关基因的表达分析及PtFLC的功能特征[D];华中农业大学;2010年
2	王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3	李启芳;玉米矮秆基因Dt的精细定位及其矮化机理的初步研究[D];山东农业大学;2010年
4	刘学英;梨S-RNase基因启动子克隆及雌雄不育植物表达载体构建[D];中南林业科技大学;2010年
5	曹慧慧;青岛文昌鱼Sox1/2/3-like基因的扩增与表达研究[D];鲁东大学;2011年
6	郭燕风;转基因玉米中外源基因检测方法的研究[D];山东农业大学;2011年
7	陈君;矮牵牛PMADS9基因的启动子克隆与功能分析[D];西南大学;2011年
8	徐超;绿豆8S球蛋白基因启动子的克隆及分析[D];暨南大学;2011年
9	李再禹;马鹿KGF基因上游顺式作用元件分离与结构分析[D];东北林业大学;2011年
10	张荔;赤丸芜菁BrCHS表达特性及启动子特性分析[D];东北林业大学;2011年

	【同被引文献】
	【同被引文献】

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前10条

1	龙朝钦;邓军;李芹芥;周村建;郝飞;;根癌农杆菌介导的烟曲霉几丁质合成酶chsC基因缺失突变体的构建[J];中国感染控制杂志;2008年02期
2	党素英;王铸钢;;基因捕获技术[J];国际遗传学杂志;2006年01期
3	郑肖兰;崔昌华;刘文波;郑服丛;;尖孢镰刀菌西瓜专化型遗传转化体系的优化[J];热带农业科学;2006年01期
4	李琳;崔昌华;郑肖兰;郑服丛;;海南岛橡胶炭疽菌基础生物学特性研究[J];热带农业科学;2007年02期
5	冯淑芬,刘秀娟,郑服丛,张开明;橡胶树炭疽菌生物学和侵染特征研究[J];热带作物学报;1998年02期
6	黄贵修;薛迎春;卢昕;;胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及其分子分析[J];热带作物学报;2008年01期
7	江树业,陈启锋,葛学军;基因捕捉及其在植物基因分离和功能基因组学上的应用[J];热带亚热带植物学报;2003年02期
8	汤华,唐任宽;利用捕获载体解析小鼠基因在生物发育过程中的功能[J];生命的化学;2005年01期
9	黄亚丽;潘玮;蒋细良;郭平;田云龙;李记鹏;朱昌雄;;根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的研究进展[J];生物技术通报;2007年03期
10	方华舟;涂知明;;水稻花粉组织特异性启动子捕获实验[J];生物学杂志;2007年05期

	【二级引证文献】
	【二级引证文献】

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前3条

1	张驰;陈其新;李明;周建设;秦楠;;哺乳动物BMP4基因A型启动子的比较分析[J];安徽农业科学;2010年11期
2	余红仙;许文涛;程国灵;戴蕴青;黄昆仑;田洪涛;罗云波;;乳酸乳球菌乳脂亚种MG1363中盐诱导启动子的克隆[J];食品工业科技;2012年11期
3	蔡志英;林春花;时涛;霍姗姗;蔡吉苗;刘先宝;黄贵修;;橡胶树胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库构建及其致病缺陷转化子筛选[J];微生物学通报;2012年06期

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前1条

1	王明科;多潜能C3H/10T1/2细胞增殖、分化相关新基因的捕获、克隆及功能研究[D];第三军医大学;2010年

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前1条

1	邱玲玉;葡萄PDF基因的启动子功能分析及ERF转录因子对PDF基因表达的调控[D];辽宁师范大学;2011年

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前10条

1	朱英,蔡秀玲,王宗阳;用无启动子的GUS报告基因捕获水稻基因启动子[J];植物生理与分子生物学学报;2003年04期
2	王爱民;陈石燕;沈革志;王新其;鞠丹花;王钟林;王宗阳;蔡秀玲;;Ac/Ds(GUS)结构介导的水稻启动子捕获系统的建立[J];植物生理与分子生物学学报;2005年06期
3	李强,卢孟柱,陈颖,韩一凡,田颖川;杨树因伤诱导型启动子的克隆及功能分析[J];林业科学;1999年04期
4	刘山鸣，赖康，郑学勤，刘公社;基因直接转化植物小孢子方法的探讨[J];热带作物学报;1994年S1期
5	崔永兰;钟晓丽;张永明;杨仲南;;两个水稻胚乳启动子的克隆及表达分析[J];中国生物工程杂志;2008年08期
6	张晓鸣，张燕珠，李业越，王金忠，李少游，麻密，张金忠;用电穿孔法将外源基因高效导入水稻胚盾片细胞[J];南开大学学报(自然科学版);1996年02期
7	柴玉荣,侯卫红,王天云,王宁,袁保梅,王建民,薛乐勋;盐藻的一种盐诱导碳酸酐酶基因转录起始点的确定及表达载体的构建[J];海洋科学;2005年04期
8	杨永智;;T-DNA标签技术及其在植物功能基因组研究中的应用[J];青海大学学报(自然科学版);2006年06期
9	李元元;张靖溥;;基因捕获技术及其最新进展(英文)[J];遗传学报;2006年03期
10	张丕燕,朱春宝,朱宝泉,赵文杰;一个从顶头孢霉中筛选具有启动子功能的DNA片段的简便方法[J];微生物学通报;2004年03期

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前5条

1	陈石燕;王宗阳;;T-DNA介导的promoter trap系统[A];中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编[C];2004年
2	刘宏涛;孙大业;周人纲;;钙-钙调素对拟南芥热激基因表达的影响[A];中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编[C];2004年
3	刘宏涛;孙大业;周人纲;;钙-钙调素对拟南芥热激基因表达的影响[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
4	师福山;赵德明;;朊蛋白受体基因敲除的打靶载体构建[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年
5	谢先芝;陈凡;吴乃虎;;番茄(Solanum esculentum L.)蛋白酶抑制剂基因内含子增强外源基因表达的研究[A];全国植物分子生物学与生物技术学术研讨会论文集[C];2000年

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前3条

1	陈石燕;1.用T-DNA（GUS）结构的基因捕获系统分离水稻基因 2.OsRRM，用基因捕获系统获得的一个在水稻胚乳中特异表达的基因[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2007年
2	胡昌泉;水稻胚乳发育相关基因的筛选及功能分析[D];福建农林大学;2011年
3	许骏;一．拟南芥多磷酸肌醇激酶AtIPK2α在花粉萌发和根生长中的作用二．拟南芥胚胎发育早期合子激活的分子遗传研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2004年

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前10条

1	王爱民;水稻启动子捕获系统的建立[D];华东师范大学;2005年
2	兰家细;籼稻明恢86T-DNA插入突变体库的构建[D];福建农林大学;2005年
3	刘次桃;利用水稻启动子捕获系筛选启动子的研究[D];华南师范大学;2007年
4	李世鹏;两个水稻Ⅰ型金属硫蛋白基因启动子功能初步分析[D];吉林大学;2007年
5	洪璇;杂环芳香化合物降解菌群与降解基因克隆方法研究[D];上海交通大学;2008年
6	袁林;根结线虫诱导的巨型细胞研究[D];厦门大学;2007年
7	巩艳青;水稻胚特异性启动子的克隆及其功能验证[D];山东农业大学;2007年
8	聂丽娜;小麦Vp-1和W73基因启动子的克隆与功能鉴定[D];内蒙古农业大学;2008年
9	董玉梅;水稻启动子捕获及T-DNA标签技术的研究[D];华南师范大学;2007年
10	刘艳;橡胶炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）致病相关突变体表型分析及插入位点定位[D];海南大学;2010年

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