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《动物学报》 2002年04期
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鸡Ⅹ期胚盘细胞体外培养

杜立新  尹春光  
【摘要】:为证实经遗传修饰的鸡X期胚盘细胞具有参与受体胚胎发育和形成嵌合体的能力 ,本研究将由鸡X期胚盘制成的细胞悬液与经脂质体包埋的抗鸡传染性支气管炎病毒基因重组质粒PGS1共孵育后 ,直接显微注入同期受体胚盘 (14 0枚 ) ;或对转染后供体细胞进行G418抗性筛选后显微注入同期受体鸡胚盘 (14 0枚 ) ;或将供体细胞体外培养 4 8h ,再与脂质体 PGS1复合物共孵育后显微注入同期受体鸡胚盘 (190枚 ) ,制备转基因嵌合体鸡 ,并应用PCR和RAPD方法 ,对鸡胚和雏鸡不同组织或血液中的DNA进行检测。结果表明 :直接注射组孵化率(5 7% )显著 (P 0 0 1)高于G418筛选处理组 (1 4 % )和培养 4 8h处理组 (2 1% ) ;G418筛选处理组不同胚龄鸡胚组织、器官中外源DNA的PCR检测阳性率均高于其它二个组。实验结果证明 ,体外培养 4 8h并经遗传修饰的胚盘细胞仍然具有形成嵌合体的能力 ,利用早期胚盘细胞途径制备转基因鸡是可行的。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 安静,杜立新;鸡胚胎干细胞的分离、培养和鉴定[J];动物学报;2003年05期
2 张传生,杜立新;基于Cre重组酶体系的鸡卵清蛋白基因打靶载体的构建[J];动物学报;2005年04期
3 王娟,杜立新;胚胎干细胞及种系嵌合体的研究进展[J];动物医学进展;2003年04期
4 蔡琳琳,肖小珺,秦洁,李碧春;鸡胚盘细胞的研究进展[J];中国畜牧兽医;2005年04期
5 杨娜娜;朱靖;孟春花;杜立新;;小鼠白血病抑制因子真核表达载体的构建及测序分析[J];家畜生态学报;2006年01期
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10 王娟;孔祥华;杜立新;;鸡胚胎生殖细胞在鼠胚成纤维细胞饲养层上的生长[J];生物技术通讯;2007年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张传生;鸡X期胚盘细胞体外培养与输卵管生物反应器的研制[D];山东农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 索剑飞;转人类胰岛素基因鸡的研究[D];河南科技大学;2010年
2 赵英会;人促红细胞生成素鸡输卵管特异表达载体的构建及其转基因鸡的制备[D];山东农业大学;2002年
3 王继英;逆转录病毒表达载体的构建及其鸡输卵管生物反应器的制作[D];山东农业大学;2003年
4 燕海峰;家鸡囊胚细胞嵌合体技术研究及应用[D];湖南农业大学;2004年
5 王娟;从原始生殖细胞中分离克隆鸡胚胎生殖细胞[D];山东农业大学;2004年
6 孟春花;用BRL条件培养基分离克隆鸡胚胎干细胞及诱导分化[D];山东农业大学;2005年
7 杨娜娜;小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及维持鸡胚胎干细胞未分化状态的研究[D];山东农业大学;2005年
8 李玉芳;鹌鹑体外受精和胚胎移植的研究[D];福建农林大学;2006年
9 孙鹏翔;鸡胚原始生殖细胞体外转染及其介导的转基因研究[D];扬州大学;2007年
10 邓缘;鸡X期胚盘细胞的冷冻保存及复苏后嵌合体鸡制备的研究[D];湖南农业大学;2009年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 李善刚,杜立新;鸡胚胎体外培养的研究[J];山东农业大学学报(自然科学版);2000年02期
2 杜立新,李善刚;通过转移早期囊胚期细胞制备嵌合体鸡[J];山东农业大学学报;1998年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 安静,杜立新;鸡胚胎干细胞的分离、培养和鉴定[J];动物学报;2003年05期
2 杜立新,蒋满喜;脂质体介导精子载体制备转基因鸡的研究[J];山东畜牧兽医;2001年01期
3 李玉芳;庄益芬;徐芹伟;徐国正;贾海燕;张文昌;;鹌鹑胚胎的换壳培养[J];福建畜牧兽医;2006年02期
4 徐国正;张文昌;庄益芬;张丽;李明;祁喜可;;禽类胚胎体外培养的研究进展[J];福建畜牧兽医;2007年S1期
5 蔡琳琳,肖小珺,秦洁,李碧春;鸡胚盘细胞的研究进展[J];中国畜牧兽医;2005年04期
6 高旺龙;郝志明;;鸡胚大头开孔加抽蛋清原壳体外培养的研究[J];贵州畜牧兽医;2009年03期
7 刘凤军,庄益芬,张文昌;鹅胚胎体外培养的研究[J];黑龙江畜牧兽医;2004年01期
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10 郝志明;马文芝;祁茂铜;闵亨辉;;空气对X期鸡胚原壳发育的影响[J];西北农业学报;2005年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 成荣;外源基因在鸡早期胚胎内整合及表达的研究[D];扬州大学;2004年
2 孟春花;用BRL条件培养基分离克隆鸡胚胎干细胞及诱导分化[D];山东农业大学;2005年
3 谢蓓;鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养及嵌合体鸡的制备和分子鉴定[D];南京师范大学;2005年
4 李玉芳;鹌鹑体外受精和胚胎移植的研究[D];福建农林大学;2006年
5 徐国正;鸭体外受精和胚胎移植的研究[D];福建农林大学;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑艳玲;彭树英;张涌;;人胰岛素基因的克隆及其乳腺特异性表达载体的构建[J];安徽农业科学;2006年16期
2 徐珊珊;;畜禽种质资源的评估·利用与保护[J];安徽农业科学;2008年25期
3 陈宇萍,司徒镇强,吴军正,陈建元,王为;DMSO诱导的MEC—1细胞在裸鼠中的致瘤性实验[J];癌症;1996年05期
4 王海波,孙振青,周岩冰,张建立,李世宽,牛兆建;人类肿瘤细胞诱导分化模型的建立[J];青岛大学医学院学报;2003年01期
5 刘荣秀;鸟类原生殖细胞的研究 Ⅰ.鸡胚生殖新月区原生殖细胞超微结构的观察[J];动物学报;1990年02期
6 李赞东,刘春海,黄劲松,沙金,危华,孙明军,赵晨,姜盛花,Hiroshi KAGAMI;鸡鸭异种间嵌合体的制备[J];动物学报;2002年04期
7 李世杰,郑瑞珍,岳奎忠,陈瑛,杨增明;猪原始生殖细胞的分离、培养与鉴定[J];动物学报;2003年04期
8 安静,杜立新;鸡胚胎干细胞的分离、培养和鉴定[J];动物学报;2003年05期
9 李碧春,秦洁,肖小珺,陈国宏,吴信生,吴圣龙;鸡胚不同发育时期原始生殖细胞的分离方法[J];动物学报;2003年06期
10 秦洁,李碧春,陈国宏,蔡琳琳,韩威,周冠月,吴洪,孙思宇;鸡胚胎原始生殖细胞的培养和传代[J];动物学报;2005年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李碧春;生产转基因鸡基础理论和方法的研究[D];西北农林科技大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 李松;从原始生殖细胞中分离克隆牛胚胎干细胞[D];西北农林科技大学;2001年
2 赵英会;人促红细胞生成素鸡输卵管特异表达载体的构建及其转基因鸡的制备[D];山东农业大学;2002年
3 安静;鸡胚胎干细胞的分离、培养及鉴定[D];山东农业大学;2002年
4 郝小静;鸡胚原始生殖细胞的分离与培养[D];山东农业大学;2003年
5 何光余;转基因鸡制备技术的研究[D];扬州大学;2003年
6 成荣;外源基因在鸡早期胚胎内整合及表达的研究[D];扬州大学;2004年
7 王娟;从原始生殖细胞中分离克隆鸡胚胎生殖细胞[D];山东农业大学;2004年
8 周冠月;鸡精原干细胞冷冻保存及其转基因的探索[D];扬州大学;2006年
9 蔡中涛;鸡早期胚胎发育规律和干细胞培养及其转基因的研究[D];扬州大学;2006年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 丁志丽;采克俊;刘莉;张易祥;张念慈;;第28期鸡胚原始生殖细胞的分离培养[J];安徽农业科学;2009年02期
2 李碧春,秦洁,肖小珺,陈国宏,吴信生,吴圣龙;鸡胚不同发育时期原始生殖细胞的分离方法[J];动物学报;2003年06期
3 张传生,杜立新;基于Cre重组酶体系的鸡卵清蛋白基因打靶载体的构建[J];动物学报;2005年04期
4 王娟;潘效红;杜立新;;体外诱导鸡胚胎生殖细胞分化为神经干细胞[J];动物学报;2008年05期
5 杨娜娜;朱靖;史卫峰;孟春花;杜立新;;小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及其对维持鸡原始生殖细胞未分化状态的影响[J];动物学报;2008年05期
6 陈胜锋;王丙云;计慧琴;;鸡胚胎干细胞及其应用研究进展[J];动物医学进展;2006年01期
7 陈胜锋;王丙云;计慧琴;陈志胜;刘雪芬;;鸡胚胎干细胞的分离、培养与鉴定的初步研究[J];佛山科学技术学院学报(自然科学版);2006年04期
8 刘容珍;李万利;施振旦;陈学进;田允波;;用高代数小鼠胚胎干细胞制作嵌合体小鼠[J];佛山科学技术学院学报(自然科学版);2008年01期
9 邓缘;洪亚辉;燕海峰;胡雄贵;;鸡囊胚细胞玻璃化冷冻保存技术的研究[J];湖北畜牧兽医;2009年11期
10 金刚;蔡国平;洪水根;;干细胞技术进展及其在海洋动物研究中的应用展望[J];海洋科学;2005年12期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 朱靖;金东庆;窦如海;杨娜娜;;小鼠LIF基因分泌型真核表达载体的构建及其应用研究[A];中国实验动物学会第七届学术年会论文集[C];2006年
2 罗晓琴;毛东风;阿依木古丽;陈士恩;马忠仁;;静宁鸡胚胎干细胞分离培养研究Ⅰ原生殖细胞的分离及形态学观察[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2006年
3 安立龙;效梅;张土保;董喜芳;许英梅;;不同浓度犊牛血清对三黄鸡原始生殖细胞生长、增殖的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜生态学分会第七届全国代表大会暨学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 张传生;鸡X期胚盘细胞体外培养与输卵管生物反应器的研制[D];山东农业大学;2005年
2 唐新燕;鸡胚原始生殖细胞增殖调控机制的研究[D];浙江大学;2006年
3 武建中;用于分离昆明小鼠治疗性胚胎干细胞的囊胚生成途径相关问题研究[D];西南大学;2009年
4 满朝来;利用转基因技术研究肌抑素基因对鸡骨骼肌发育的影响[D];哈尔滨工业大学;2008年
5 燕海峰;病毒载体介导家鸡多能细胞系的转基因技术研究[D];湖南农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙丹;绵羊成纤维细胞肌肉生长抑制素(Myostatin)基因敲除的初步研究[D];辽宁师范大学;2011年
2 韦光辉;转牛生长激素基因鸡的研究[D];河南科技大学;2010年
3 李振红;转人抗癌基因P53鸡的研究[D];河南科技大学;2011年
4 王继英;逆转录病毒表达载体的构建及其鸡输卵管生物反应器的制作[D];山东农业大学;2003年
5 燕海峰;家鸡囊胚细胞嵌合体技术研究及应用[D];湖南农业大学;2004年
6 王娟;从原始生殖细胞中分离克隆鸡胚胎生殖细胞[D];山东农业大学;2004年
7 华云芳;聚合法制作猪嵌合胚胎初步研究[D];西南农业大学;2005年
8 孟春花;用BRL条件培养基分离克隆鸡胚胎干细胞及诱导分化[D];山东农业大学;2005年
9 杨娜娜;小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及维持鸡胚胎干细胞未分化状态的研究[D];山东农业大学;2005年
10 房浩霞;暂态表达重组蛋白鸡输卵管生物反应器的优化[D];扬州大学;2006年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 马玉忠,李赞东;DNA探针鉴定转基因鸡早期性别[J];中国家禽;1999年06期
2 魏峰;许越;张西臣;蔡亚男;;利用单孢子囊接种技术建立鸡柔嫩艾美耳球虫克隆[J];中国兽医学报;2010年12期
3 安静,杜立新;鸡胚胎干细胞的分离、培养和鉴定[J];动物学报;2003年05期
4 刘娣;鸡品种随机引物扩增多态DNA的研究[J];东北农业大学学报;1999年04期
5 吴天星,金勇丰,曹广力,张耀洲;鸡肠道菌基因组DNA的RAPD分类的研究[J];畜牧兽医学报;2002年03期
6 尹春光,杜立新;转基因鸡的研究策略[J];生物学通报;2004年03期
7 杨勇,朱庆,胡刚安;运用微卫星和RAPD标记分析家鸡群体的杂合度[J];黑龙江畜牧兽医;2003年02期
8 张斯钟;磺胺嘧啶在鸡体内代谢动力学研究[J];绵阳经济技术高等专科学校学报;1995年04期
9 吴洁,崔玉君,张萌,喻绍亮,聂磊;鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活苗的免疫效果试验[J];辽宁畜牧兽医;1995年06期
10 王泽霖,王丽,闫若潜,钟凯,金亚美;RT-PCR和核酸探针在IBV检测中的应用[J];河南农业大学学报;1998年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杜红丽;凌飞;罗庆斌;张细权;;鸡HSP70蛋白三维结构的同源建模[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
2 孙国波;;白消安诱发建立鸡无精子症模型的研究[A];中国家禽科学研究进展——第十四次全国家禽科学学术讨论会论文集[C];2009年
3 成钧;赵启民;张翼翔;邓少东;;占鸡岗歼灭战[A];转战淮南——新四军第二师史料专册[C];1989年
4 李建喜;高杰;王学智;梁剑平;杨志强;;喹胺醇在鸡体内的一种代谢标示物分析[A];中国毒理学会第五次全国学术大会论文集[C];2009年
5 唐军;聂庆华;张德祥;何丹林;梁少东;张细权;;鸡脂肪性状QTL的精细定位[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
6 姚婧;王宁;王宇祥;王维世;李辉;;Solexa高通量鉴定鸡前脂肪细胞的miRNA表达谱[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
7 姚俊峰;曲鲁江;徐桂云;郑江霞;李俊英;杨宁;;东乡绿壳蛋鸡与矮小型粉壳蛋鸡输卵管子宫部蛋白质组差异表达分析[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
8 刘香;刘红林;陈杰;;鸡输卵管特异性表达人组织型纤溶酶原激活剂的研究[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
9 刘立波;赵桂苹;文杰;陈继兰;郑麦青;;鸡MHC B-L基因SNPs单倍型与免疫性状关系的研究[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
10 姚丽贤;周修冲;陈婉珍;;鸡粪对蔬菜产量及品质的影响[A];中国青年农业科学学术年报[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 范胜利;鸡年难掩降价激情[N];华夏时报;2005年
2 记者 车亭;鸡年将至 旅游升温[N];威海日报;2005年
3 王惟恒;鸡年漫话鸡之药(二)[N];中国中医药报;2005年
4 左 同;期盼鸡“昂首”[N];证券日报;2005年
5 周伟 宋学娜 本报记者 杨树义;质量铸就“劲量”美味鸡精[N];中国食品质量报;2004年
6 周耀华;鸡身皆是药[N];大众卫生报;2005年
7 曾庆;糖尿病和高血压:先有鸡还是先有蛋[N];上海中医药报;2005年
8 吴建华;锦绣中华“鸡景”遍地[N];中国社会报;2005年
9 李永钩;鸡年车市十大“猜想”[N];中国消费者报;2005年
10 东方;鸡年首日 低价股呈强[N];证券日报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 罗素兰;中国野葡萄资源的RAPD标记及其应用的研究[D];西北农业大学;1999年
2 李周岐;鹅掌楸属种间杂种优势的研究[D];南京林业大学;2000年
3 吴孝兵;扬子鳄保护遗传学及线粒体基因组全序列研究[D];南京师范大学;2001年
4 晁岳恩;东南景天锌超积累过程中基因表达差异的cDNA-AFLP分析[D];浙江大学;2008年
5 宋廷宇;薹菜品质分析及种质资源的亲缘关系研究[D];南京农业大学;2009年
6 逯晓萍;高丹草遗传图谱构建及重要农艺性状的基因定位研究[D];内蒙古农业大学;2005年
7 王丽;珍稀濒危植物华山新麦草的胚胎学及其遗传多样性研究[D];西北大学;2005年
8 李振侠;苹果砧木耐盐突变体的筛选及其鉴定[D];河北农业大学;2006年
9 薛建华;黑龙江流域野生莲的遗传多样性[D];东北林业大学;2006年
10 刘宪华;受典型氨基甲酸酯农药污染土壤的生物修复及相关研究[D];南开大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孟春花;用BRL条件培养基分离克隆鸡胚胎干细胞及诱导分化[D];山东农业大学;2005年
2 戴建明;鸡胚胎干细胞的分离培养及其诱导分化[D];扬州大学;2007年
3 何先红;鸡ES单细胞培养与SSCs介导转座子-GFP的研究[D];扬州大学;2008年
4 杨海燕;鸡胚盘细胞培养及其转基因条件的研究[D];扬州大学;2010年
5 鲍鸣;鸡IFN-γ基因的克隆与原核表达[D];安徽农业大学;2005年
6 杜云良;口服头孢拉定对鸡大肠杆菌病的治疗研究[D];中国农业大学;2005年
7 舒秀伟;鸡IL-2基因的克隆、原核表达及对DNA疫苗免疫增强作用的实验性研究[D];吉林大学;2005年
8 薛伟芳;甲砜霉素在健康及多杀性巴氏杆菌感染鸡的药动学[D];扬州大学;2008年
9 罗李媛;川牛膝多糖的提取工艺及其对肉鸡免疫调节作用的研究[D];四川农业大学;2008年
10 马群;不同发育阶段黄粉虫及虫粪蛋白质的利用效益评价[D];四川农业大学;2009年
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