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《病毒学报》 1999年01期
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人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮细胞恶性转化的研究

沈忠英  蔡维佳  沈健  许锦阶  岑山  滕智平  胡智  曾毅  
【摘要】:为了研究病毒和促癌物在食管癌形成中的作用,用带有人乳头状瘤病毒18型E6E7片段的载体腺病毒(简称HPV18E6E7AAV)感染人胚食管上皮细胞,然后加TPA协同作用,观察细胞转化。将人胚食管切碎,与HPV18E6E7AAV同孵育2小时,在加有10%小牛血清的199培养液培养和传代,形成永生化细胞株,即人胚食管上皮细胞汕头株(SHEE)。实验分两组:一组SHEE细胞在传代至第5和13代时,两次在培养基中加入TPA(12Otetradecanoylphorbol13acetate)5ng/ml,每次诱导2周,所获得的细胞株称为人胚食管上皮癌细胞汕头株1号(SHEEC1);另一组SHEE细胞培养条件相同,未加TPA,为对照组。细胞转化的形态表型由光学显微镜、电子显微镜和荧光显微镜检查;DNA含量和细胞周期用流式细胞仪检测;用35mm软琼脂培养皿接种103细胞(第20代),每组5碟,计算集落形成率;裸鼠皮下接种106细胞检测致瘤性;用荧光原位杂交(FISH)和PCR检测HPV18E6E7。结果表明:细胞DNA合成和增殖指数(PIx),SHEEC1组(45%)高于SHEE组(34%);高倍体细胞数,SHE

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许丽艳,李恩民,沈忠英,蔡唯佳,沈健;非同位素标记法检测人染色体端粒长度[J];癌变.畸变.突变;2001年01期
2 许丽艳,沈忠英,李恩民,蔡唯佳,沈健,李淳,洪超群,陈炯玉,曾毅;HPV18E6E7基因诱发的人胎儿食管上皮永生化和恶性转化细胞端粒长度和端粒酶活性[J];癌变.畸变.突变;2001年03期
3 熊兴东,许丽艳,沈忠英,蔡唯佳,韩溟,牛永东,韩雅莉,李恩民;双向凝胶电泳图像分析方法的建立[J];癌变.畸变.突变;2002年03期
4 高书颖;李恩民;杜则澎;陆晓峰;许丽艳;;食管癌细胞ezrin基因启动子TPA反应性的研究[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
5 熊兴东,李恩民,许丽艳,刘新光,蔡唯佳,韩雅莉,沈忠英;新候选癌基因STRBP8在人永生化食管上皮细胞癌变过程中差异表达的分析[J];癌症;2005年04期
6 高社干;王立东;冯笑山;曲智锋;单探幽;谢萱虎;;食管癌细胞系对光敏剂photofrin-Ⅱ的吸收和排出研究[J];癌症;2009年12期
7 沈忠英,陈晓红,沈健,蔡维佳,陈炯玉,黄天华,曾毅;人乳头状瘤病毒诱导人胚食管上皮永生化细胞恶性转化[J];病毒学报;2000年02期
8 蒋义国,陈家堃,陈学敏;二羟环氧苯并芘诱导16HBE细胞转化最佳实验方案[J];环境与健康杂志;2001年03期
9 李晓昀,苏敏,吴贤英,郑燕銮,沈忠英;食管上皮细胞永生化及恶变中染色体异常和HPV18E6、HPV18E7表达[J];环境与职业医学;2002年02期
10 熊华淇,许丽艳,李恩民,蔡唯佳,沈忠英,徐小虎;NGAL基因cDNA的克隆及其表达载体的构建[J];肿瘤防治杂志;2001年05期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 陈庆云;一、二氟甲基鸟氨酸、木黄酮对宫颈永生化上皮细胞、宫颈癌细胞及裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其细胞周期调控机理 二、宫颈癌前病变液基细胞中人乳头瘤病毒16亚型物理状态的检测[D];中国协和医科大学;2004年
2 许丽艳;NGAL基因在食管癌细胞中的表达调控机制[D];北京工业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 廖佩花;HLA-DRB1*0901基因、HPV16E6及相关因素与新疆哈萨克族食管癌关系研究[D];石河子大学;2009年
2 谢萱虎;卡培他滨对食管细胞系SHEE及SHEEC作用研究[D];河南科技大学;2010年
3 白雪鹏;人乳头瘤病毒(HPV)16/18E6感染与食管鳞癌相关性研究[D];苏州大学;2011年
4 朱有凯;应用PCR技术检测头颈部粘膜鳞状细胞癌组织人乳头瘤病毒DNA[D];广西医科大学;2002年
5 刘艳丽;河北省食管癌高发区食管癌组织HPV检测及FHIT表达的研究[D];河北医科大学;2002年
6 牛永东;从食管癌细胞系SHEEC中克隆调控NGAL基因的NF-κB因子的初步研究[D];汕头大学;2003年
7 熊兴东;食管癌细胞差异表达核基质蛋白的分离与鉴定[D];汕头大学;2003年
8 唐滔;直肠癌手术治疗1例病例分析报告[D];武汉大学;2004年
9 邢宝春;p53、c-myc基因蛋白及PCNA在食管癌及癌前病变中的表达及意义[D];山西医科大学;2004年
10 郭伟鹏;新疆食管癌患者HPV16E6基因的克隆及序列分析[D];新疆医科大学;2005年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许丽艳,沈忠英,李恩民,蔡唯佳,沈健,李淳,洪超群,陈炯玉,曾毅;HPV18E6E7基因诱发的人胎儿食管上皮永生化和恶性转化细胞端粒长度和端粒酶活性[J];癌变.畸变.突变;2001年03期
2 熊兴东,许丽艳,沈忠英,蔡唯佳,韩溟,牛永东,韩雅莉,李恩民;双向凝胶电泳图像分析方法的建立[J];癌变.畸变.突变;2002年03期
3 王朝阳,许丽艳,荣举,李劲涛,李恩民;NGAL蛋白Ni~(2+)-金属鏊合层析纯化及其鉴定[J];癌变.畸变.突变;2004年02期
4 黄吉武,林建成;以人类成纤维细胞体外转化体系为模型研究环境致癌多步骤机制[J];癌变.畸变.突变;1998年06期
5 潘可杰;;食管癌危险因素研究进展综述[J];安徽预防医学杂志;2006年06期
6 吕丽春,沈忠英,游绍进,沈健,蔡唯佳;PCR和原位杂交检测食管癌组织中人乳头状瘤病毒[J];癌症;1999年02期
7 彭心昭,沈忠英,黎妙娟,蔡唯隹,朴英杰;平阳霉素诱导人食管癌细胞EC8712凋亡的研究[J];癌症;1999年06期
8 宋春英,谭文,林东昕;中国人DNA修复基因XRCC1单核苷酸多态及其与食管癌风险的关系[J];癌症;2001年01期
9 詹显全,陈主初,关勇军,李萃,何春梅,梁宋平,谢锦云,陈平;双向凝胶电泳-飞行时间质谱法分析人肺鳞癌细胞NCI-H520蛋白质组成分[J];癌症;2001年06期
10 李恩民,许丽艳,熊华淇,蔡唯佳,吴炳礼,张灿,张永发,林艳,沈忠英;食管癌细胞SHEEC中NGAL基因5'-UTR和3'-UTR的克隆与鉴定[J];癌症;2003年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王朝阳;NGAL基因的原核融合表达、抗体制备及其在食管癌组织中的表达模式[D];汕头大学;2004年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沈健,吴敏华,陈铭华,郑瑞明,沈忠英;氧化砷促进食管癌细胞增殖[J];癌变.畸变.突变;2002年03期
2 牛永东,许丽艳,李恩民;酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定[J];癌变.畸变.突变;2003年01期
3 许丽艳,李恩民,蔡唯佳,沈忠英,曾毅;NGAL基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体的构建与鉴定[J];癌变.畸变.突变;2004年01期
4 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
5 安社娟;陈家;陈华洁;常薇;刘莉莉;赵艳丰;陈学敏;;反式二羟环氧苯并(a)芘相关新基因brg的全长克隆[J];癌变.畸变.突变;2006年04期
6 牛永东;许丽艳;韩溟;方王楷;沈忠英;李恩民;;酵母单杂交筛选人食管癌细胞系SHEEC中NF-kappa B元件结合蛋白[J];癌变.畸变.突变;2006年04期
7 吴炳礼;许丽艳;应晓敏;牛永东;李伍举;李恩民;;食管癌相关功能未知基因的电子克隆延伸与ncRNA的发现[J];癌变.畸变.突变;2008年02期
8 李恩民,许丽艳,熊华淇,蔡唯佳,吴炳礼,张灿,张永发,林艳,沈忠英;食管癌细胞SHEEC中NGAL基因5'-UTR和3'-UTR的克隆与鉴定[J];癌症;2003年02期
9 荣举,许丽艳,蔡唯佳,熊兴东,李劲涛,方王楷,沈忠英,李恩民;Fascin 1基因在永生化食管上皮细胞癌变中的表达[J];癌症;2004年03期
10 沈忠英,许丽艳,陈铭华,蔡维佳,陈炯玉,洪超群,沈健,曾毅;人乳头状瘤病毒诱导食管上皮永生化细胞的双相分化[J];病毒学报;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 安社娟;陈家堃;刘莉莉;赵艳丰;陈学敏;;层粘连蛋白受体基因的表达谱分析[A];第五届广东省环境诱变剂学会暨第三届广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术交流会论文集[C];2006年
2 金华;谢伟;;三氧化二砷治疗恶性肿瘤的细胞实验研究进展[A];'2012第五届全国临床中药学学术研讨会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周彩虹;金安粉针剂诱导肺癌细胞凋亡及其分子机制研究[D];北京中医药大学;2003年
2 肖涛;三氧化二砷诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡分子机制的研究[D];中南大学;2003年
3 张民;枸杞多糖的特性、结构及生物活性评价——生物学前沿技术的应用[D];华中农业大学;2003年
4 王德林;三氧化二砷(As_2O_3)对人肾癌786-0细胞系的抑制作用及其机制的研究[D];重庆医科大学;2004年
5 李淳;食管鳞癌核基质蛋白LaminB1、NuMA的表达及核基质与端粒关系的研究[D];汕头大学;2005年
6 郭昱;黄芩甙对肝癌细胞体外作用及机制的实验研究[D];河北医科大学;2006年
7 李蕾;无核荔枝胚败育相关蛋白质的分离鉴定及cDNA克隆[D];华南热带农业大学;2006年
8 贺付成;分化相关基因NDRG1在食管鳞癌的表达及诱导分化治疗研究[D];郑州大学;2006年
9 朱彩平;枸杞多糖的结构分析及生物活性评价[D];华中农业大学;2006年
10 许丽艳;NGAL基因在食管癌细胞中的表达调控机制[D];北京工业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王琛;SDF-1、CXCR4在食管癌中的表达及对预后的影响[D];郑州大学;2010年
2 王晓虹;PDCD4在食管癌组织中表达的实验研究及临床意义[D];山东大学;2010年
3 张晶晶;山西省阳城县食管癌筛查人群癌症防治知识及行为危险因素调查研究[D];山西医科大学;2011年
4 张慧;六神丸对人食管癌裸鼠移植瘤的抑制作用及抗血管生成等机制的研究[D];湖南中医药大学;2011年
5 崔江涛;单端孢菌素诱导人肝癌细胞Hep G2凋亡的作用机制研究[D];南京大学;2011年
6 章颖;丁酸钠和1,25-(OH)_2D_3对HT29细胞增殖及对端粒酶逆转录酶的影响[D];南京大学;2011年
7 赵洪勇;110例可手术广东籍食管癌患者的临床病理特征分析[D];广州中医药大学;2011年
8 高钧;NGAL在结肠癌中的表达及其与预后关系的初步探讨[D];天津医科大学;2011年
9 曾同霞;HPV感染、TAP2等基因多态性与新疆哈族食管癌交互作用研究[D];石河子大学;2010年
10 谢萱虎;卡培他滨对食管细胞系SHEE及SHEEC作用研究[D];河南科技大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵宝全,张守峰,赵君,扈荣良,章金钢,殷震;tPA乳腺组织特异性表达载体构建及转基因小鼠建立[J];中国兽医学报;2002年02期
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3 李宝民,纪志武,刘振声,曾毅;Epstein-Barr病毒诱导永生化人上皮细胞恶性转化[J];病毒学报;1998年02期
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5 任彩萍,刘卫东,何志巍,蓝轲,王慧,姚开泰;EBV感染及TPA处理前后人CR2转染细胞的基因差异表达谱[J];生物化学与生物物理学报;2001年01期
6 邹福强;TPA完成临床试验[J];中国生物工程杂志;1987年01期
7 张震元;组织型纤溶酶原激活剂(TPA)[J];中国生物工程杂志;1991年05期
8 谢莲;曾锦章;杨汀;王力;孙德福;张海燕;张晓坤;;TPA诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡及与RXRα和TR3的关系[J];云南大学学报(自然科学版);2006年03期
9 师秀艳,付伟,赵咏梅,刘莹,刘奕,宗志红,于秉治;小鼠受精卵早期发育过程中PKC对cdc2和cdc25C活性的影响[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年06期
10 施斐曼;殷铭岩;杜德林;李秀森;;TPA 对人早幼粒白血病细胞系 HL-60诱导分化的超微结构研究[J];军事医学科学院院刊;1991年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 ;Preparation of Fluorine-Containing 2,4,6-Tristyryl-1,3,5-Triazines[A];中国化学会第十一届全国氟化学会议论文摘要集[C];2010年
2 高云华;华兴;谭开彬;徐亚丽;夏红梅;刘政;卓忠雄;王冬;钱频;;载溶栓剂tPA靶向超声造影剂对兔股动脉溶栓的研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
3 陈名声;徐焰;刘田;岳乔红;张志平;陈茂;吴昌归;郝晓柯;;SCC、TPS、TPA联合检测对宫颈癌的临床诊断价值[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
4 朱美财;占志;王雅静;蔡庆;;刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
5 熊敏;李世军;彭秀丽;俸艳萍;辛清武;龚炎长;;测试条件对鸭肉肉质TPA质地参数的影响[A];中国家禽科学研究进展——第十四次全国家禽科学学术讨论会论文集[C];2009年
6 李赛美;凌家杰;王志高;;加味桃核承气汤及其拆方对糖尿病损伤HUVEC培养液中tPA和PAI-1含量的影响[A];第十次全国中医糖尿病大会论文集[C];2007年
7 郭蔚;沈智杰;王肖龙;赵亮;;益气活血法治疗心血瘀阻型房颤患者临床症状及纤溶相关性指标的研究[A];第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编[C];2008年
8 杨巍;刘以训;;FSH诱导卵巢颗粒细胞tPA表达的信号转导机制[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
9 袁勤生;;治疗酶的研究现状与展望[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
10 袁勤生;;治疗酶的研究现状与展望[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周报告集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 郭斐;健康险TPA:两年无盈利[N];中国经营报;2010年
2 吴剑洁;中国健康险TPA发展的优势与挑战[N];中国保险报;2011年
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4 外经贸部国际贸易经济合作研究院 王有莉;TPA:权利制衡的产物[N];国际经贸消息报;2002年
5 潘少婷;五企业接力投资黄江整合重组[N];东莞日报;2009年
6 本报记者 赵萍;TPA模式:新的救命稻草?[N];21世纪经济报道;2009年
7 吴京;2001年我国显示器产量与销量研究报告[N];中国计算机报;2002年
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10 ;移动存储前景看好[N];中国计算机报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王刚;tPA-VEGF165双基因静电纺丝涂层机械瓣膜的构建及体外实验研究[D];华中科技大学;2011年
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3 程龙;携带tPA真核表达载体PLGA纳米粒-超声微泡复合体的构建及体外实验研究[D];华中科技大学;2012年
4 Hubdar Ali Kaler;鸡输卵管特异性表达tPA和leptin的研究[D];南京农业大学;2011年
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6 罗文平;缺氧复氧对血管内皮细胞t-PA、PAI-1、NO及NOS表达的影响及辛伐他汀的干预研究[D];苏州大学;2006年
7 萧瑶;组织型纤溶酶原激活物(tPA)和尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在小鼠肝纤维化中的作用[D];复旦大学;2008年
8 郝莎;NK细胞的雌激素调控及肾间质纤维化的发生和干预[D];南京大学;2010年
9 张明秋;千斤拔黄酮抑制血栓形成机制研究[D];吉林大学;2007年
10 于静;As_2O_3对HPV感染阳性的宫颈癌治疗及降低宫颈癌癌前病变风险的研究[D];中国协和医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李延珍;壳聚糖纳米tPA基因质粒预防犬瓣膜植入后血栓形成的研究[D];南华大学;2011年
2 周政;脑池内灌注r-TPA防治蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的实验研究[D];苏州大学;2011年
3 刘玉兰;三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜局部tPA及PAI-1的影响[D];湖南中医药大学;2005年
4 张勤;非对称性二甲基精氨酸对血管内皮纤溶系统的调节及其细胞内机制[D];汕头大学;2010年
5 赖玉洁;亚低温治疗对大面积脑梗死患者血浆tPA、PAI-1活性的影响[D];中南大学;2011年
6 刘瑶;双眼形觉剥夺成年大鼠视皮层可塑性与CSPGs和tPA表达关系的研究[D];第三军医大学;2011年
7 吕月蒙;牛α S1casein-人tPA杂合基因座的构建及在小鼠乳腺中表达的鉴定[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
8 郭淑利;As_2O_3合并TPA诱导HL-60细胞凋亡的实验研究[D];郑州大学;2005年
9 邱伟明;Wnt/β-catenin信号通路与TPA诱导的毛囊干细胞异常活化关系的实验研究[D];第三军医大学;2012年
10 王晓琳;结核分枝杆菌PPE家族免疫相关蛋白PPE68免疫功能的研究[D];四川大学;2005年
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