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《病毒学报》 2008年01期
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表达猪瘟病毒石门株E0基因重组鸡痘病毒的构建及动物免疫试验

王养会  李谱华  张淼涛  张彦明  
【摘要】:应用PCR从质粒pMD18-T-E0中扩增编码CSFVE0蛋白的基因片段,定向克隆到重组鸡痘病毒表达载体FPV-P11上,进一步构建出重组鸡痘病毒转移载体FPV-pSY-E0。用脂质体将该质粒转染至鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)后,通过蓝斑纯化实验筛选出重组鸡痘病毒FV282-CSFV-E0。PCR证实E0基因已整合至鸡痘病毒基因组中,Western blot检测到重组病毒感染CEF细胞中E0蛋白的表达。重组病毒3次腹腔接种小鼠,ELISA检测血清抗体滴度高达1:4096。重组病毒免疫猪3次之后,接种猪瘟病毒强毒进行攻毒试验,结果对免疫组产生75%的保护率,为研制猪瘟活载体疫苗奠定了基础。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 朱小甫;吴旭锦;徐德乾;杨萍;;古典猪瘟病毒基因组及ORF编码蛋白的结构和功能[J];中国畜牧兽医;2012年05期
2 南文金;胡鸿惠;彭国良;娄高明;;猪瘟病毒分子生物学与致病机制研究进展[J];韶关学院学报;2011年08期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 徐彦召;猪瘟病毒E2糖蛋白分泌型表达载体的构建及其免疫效果研究[D];西北农林科技大学;2009年
2 蒋大良;猪瘟病毒NS3蛋白的原核表达及其应用[D];湖南农业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 孙永科,王云峰,杨增岐,童光志;禽痘病毒分子生物学特性及在哺乳动物中的应用[J];动物医学进展;2004年05期
2 乔传玲,于康震,姜永萍,张建林,邓国华,孟庆文,田国斌,唐秀英;表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究[J];中国农业科学;2003年06期
3 丁炜东,曹丽萍,张体银,刘秀梵,张如宽,吴艳涛;表达新城疫病毒F HN基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性和免疫效力试验[J];中国兽医杂志;2005年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 徐之勇;仲崇岳;李军民;宝银梅;;禽流感疫苗的研究概况[J];家禽科学;2007年11期
3 姜建波;提金凤;李志杰;;新型疫苗研究概况[J];动物医学进展;2007年01期
4 孙鹏;王云峰;胡桂学;;禽痘病毒载体及其应用[J];中国畜牧兽医;2010年09期
5 郗洪生;王滨坤;郑世民;;重组鸡痘病毒载体及其在禽流感疫苗中的应用[J];黑龙江畜牧兽医;2006年05期
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7 智海东;王云峰;张晶;王玫;刘娣;童光志;;表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建[J];中国预防兽医学报;2007年01期
8 甘军纪;田志鹏;陶鸽;陈素娟;彭大新;刘秀梵;;单表达和共表达NDVF和HN基因重组鸡痘病毒活疫苗的免疫效力比较试验[J];中国预防兽医学报;2010年10期
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10 钟利;李婉宜;李明远;李虹;张卫东;蒋忠华;;甲型流感病毒NP基因真核载体的构建及初步表达[J];中国人兽共患病学报;2007年04期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
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2 李永清;禽流感病毒M2基因克隆、表达及其重组马立克氏病病毒的构建[D];中国农业大学;2004年
3 孙蕾;外源基因插入不同复制非必需区影响重组鸡痘病毒抵抗母源抗体干扰的能力[D];扬州大学;2005年
4 胡思顺;禽流感病毒H9N2亚型和鸡毒霉形体HS株主要抗原性基因的克隆与表达研究[D];华中农业大学;2005年
5 黄兵;表达禽流感病毒H5血凝素禽腺病毒重组体的构建及其特性研究[D];南京农业大学;2005年
6 王群;H5N1亚型禽流感病毒核蛋白T细胞表位区的研究[D];中国农业科学院;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周晓芬;金黄色葡萄球菌肠毒素B作为免疫佐剂的研究[D];华中农业大学;2010年
2 林彬彬;禽流感病毒H9亚型福建分离株的全基因组测定及遗传演化分析[D];福建农林大学;2011年
3 郭闯;水禽禽流感H5N1亚型超微病理研究及其基质蛋白单克隆抗体的制备与初步应用[D];扬州大学;2004年
4 焦凤超;减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒口服DNA疫苗的免疫效力研究[D];扬州大学;2005年
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6 毕玉海;鹅副粘病毒F基因与鹅细小病毒VP3基因遗传变异及其表达研究[D];吉林大学;2006年
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8 胡拥军;农杆菌介导新城疫病毒Lasota株HN基因在苜蓿表达研究[D];西南大学;2007年
9 钟功勋;H9N2亚型禽流感病毒进化分析及H5N1亚型禽流感变异株疫苗株的构建[D];中国农业科学院;2007年
10 张智明;黑龙江部分地区野生鸟类AIV和NDV感染状况的初步研究[D];东北林业大学;2007年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 金扩世,涂长春,殷震;猪瘟病毒保护性囊膜糖蛋白E1基因的研究进展[J];病毒学报;1996年03期
2 孙永科;杨玉艾;王养会;张彦明;;表达猪瘟病毒石门株E2抗原的重组腺病毒构建及免疫性研究[J];病毒学报;2007年02期
3 郑杰;赵启祖;赵耘;宁宜宝;;黄病毒NS2-3/NS3蛋白的结构与功能[J];病毒学报;2007年03期
4 周远成;王琴;范学政;徐璐;徐志文;郭万柱;刘俊;陈蕾;汤波;;人工接种猪瘟病毒对猪外周血白细胞的影响[J];病毒学报;2009年04期
5 俞伏松;车勇良;江斌;吴胜会;林琳;陈少莺;林天龙;;RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究[J];福建农业学报;2007年03期
6 余兴龙,涂长春,徐兴然,张茂林,李作生,于师宇;猪瘟病毒兔化弱毒(HCLV)疫苗株基因组全长cDNA的克隆与序列分析[J];高技术通讯;2003年05期
7 郑杰;宁宜宝;;猪瘟病毒NS3蛋白ATPase/RNA解旋酶功能区的表达与纯化[J];中国畜牧兽医;2007年10期
8 何若钢;张恒博;李秀宝;张文明;段福君;;荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用研究[J];黑龙江畜牧兽医;2008年09期
9 涂亦娴;张馨玉;金华利;杨福;刘明羽;张富春;王宾;;猪瘟病毒E2基因真核表达载体表达效率和免疫效果的比较[J];中国农业大学学报;2005年06期
10 徐志文,郭万柱,石谦,阳爱国;猪瘟病毒基因组及基因工程疫苗研究进展[J];四川畜牧兽医;2005年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王茁;CSFV NS2基因导入PK-15细胞后对该病毒复制的影响[D];吉林农业大学;2011年
2 朱元源;猪瘟病毒结构蛋白与生物学特性的关系[D];中国兽医药品监察所;2010年
【二级引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 王津津;猪气管上皮细胞的永生化及副猪嗜血杆菌对其黏附能力的研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 江馗语;猪瘟病毒四种不同抗原卵黄抗体中和效力评价[D];东北农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 吴艳涛,彭大新,刘秀梵,刘伟忠,张如宽;表达新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力[J];生物工程学报;2000年05期
2 金宁一,方厚华,郭志儒,罗坤,古长庆,殷震,邵一鸣,王虹;HIV-1 env基因在重组鸡痘病毒中的表达[J];中国生物制品学杂志;1999年04期
3 高维凡,宋世勇,韩露,杜绍范,李义,宁志利;应用酶联免疫吸附测定检测鸡血液中抗新城疫病毒抗体的动力学研究[J];沈阳农业大学学报;1997年03期
4 唐秀英,田国斌,赵传删,周金法,于康震;中国禽流感流行株的分离鉴定[J];中国畜禽传染病;1998年01期
5 邓国华,马文军,于康震;禽流感病毒核蛋白基因在重组杆状病毒中的表达[J];中国预防兽医学报;1999年02期
6 曹殿军,刘惠莉,王莉林,闵平,张莹,卢景良;鸡新城疫病毒HN基因在重组鸡痘病毒中的表达及其保护性的研究[J];中国免疫学杂志;1998年01期
7 陈化兰,于康震,田国滨,唐秀英,卢景良;DNA免疫诱导鸡对禽流感病毒的免疫保护反应[J];中国农业科学;1998年05期
8 王兴龙,金宁一,丁壮,金扩世,米志强,王宏伟,郭志儒,殷震;新城疫病毒F基因在新型杆状病毒表达系统中的表达及重组病毒的免疫原性[J];中国兽医学报;2001年06期
9 张瑞婷,张立春,夏业才,刘惠文;兽用生物制品的支原体污染检验及注意事项[J];中国兽药杂志;2001年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙永科;杨玉艾;王养会;张彦明;;表达猪瘟病毒石门株E0抗原的重组腺病毒构建及免疫性的研究[J];畜牧兽医学报;2007年05期
2 孙永科;杨玉艾;王养会;李普华;张彦明;;表达猪瘟病毒石门株E0和/或E2基因重组非复制型腺病毒疫苗的免疫保护试验[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2007年05期
3 周鹏程,陈建国,翟中和,丁明孝;猪瘟病毒糖蛋白E0基因的克隆及其表达研究[J];微生物学通报;2000年03期
4 王莹;任向阳;张昶;刘秋燕;王江辉;王川庆;;猪瘟病毒分子生物学研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2006年02期
5 李国新;李娜;仇华吉;朱庆虎;李艳;王明杰;李继昌;童光志;;猪瘟病毒石门株基因组全长cDNA的克隆与序列分析[J];中国预防兽医学报;2006年03期
6 高华峰;李富祥;张念祖;李华春;;猪瘟病毒E~(rns)基因的克隆及原核表达[J];动物医学进展;2007年02期
7 王家富,张楚瑜,王宁,傅烈振,黄茜华;猪瘟病毒石门株与兔化弱毒株E0糖蛋白基因的克隆及序列分析[J];微生物学报;2000年01期
8 胡建和;杭柏林;王青;李任峰;刘兴友;王三虎;;猪瘟强弱毒鉴别多重RT-PCR方法的建立及应用[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2008年11期
9 王海震,王秀花,李学仁,周斌,陈溥言;含CSFV E2基因A/D区原核表达载体的构建、表达及其抗原性研究[J];中国生物工程杂志;2004年08期
10 程晓盈;张彦明;王(韦华);邢福珊;郭抗抗;洪海霞;;猪瘟病毒E2基因的克隆及原核表达[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2005年12期
中国重要会议论文全文数据库 前8条
1 朱妍;涂长春;;免疫压力下猪瘟病毒的变异研究[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
2 王海震;苏小运;曹瑞兵;陈溥言;;含猪瘟病毒石门株E2蛋白A,D抗原区双拷贝基因原核表达载体的构建及其表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
3 周斌;刘珂;陈溥言;;猪瘟病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
4 徐和敏;徐璐;范学政;王琴;;猪瘟病毒石门强毒株和兔化弱毒疫苗株E2蛋白抗原结构域差异研究[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
5 郜玉钢;杜锐;王全凯;王树志;张连学;;梅花鹿CCSYD株BVDV基因E_0的克隆与序列分析[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年
6 李江南;郭焕成;史子学;涂长春;;逆转录病毒载体介导shRNA抑制猪瘟病毒增殖的研究[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
7 孙金福;史子学;郭焕成;涂长春;;猪瘟病毒感染猪外周血白细胞凋亡及CD4~+、CD8~+T淋巴细胞变化动力学[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
8 刘燕瑜;张丹;金扩世;金宁一;;两种佐剂诱导鸡胚成纤维细胞抵抗鸡痘病毒感染的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 孙永科;表达猪瘟病毒石门株E0/E2基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究[D];西北农林科技大学;2007年
2 郭抗抗;猪瘟病毒的shRNA干扰、强弱毒鉴别及基因工程疫苗研究[D];西北农林科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 马思杰;猪瘟病毒囊膜蛋白E0基因的表达及鼠抗E0多抗血清的制备[D];扬州大学;2008年
2 李鹏;猪瘟病毒E0基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立[D];西北农林科技大学;2008年
3 陈振海;猪瘟病毒E0基因在原核与真核表达系中的表达[D];中国农业大学;2003年
4 孔鹏;猪瘟地方流行株(BJCY/96)的全长ORF测序及E0基因的分段表达[D];中国兽医药品监察所;2006年
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