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《安徽农业科学》 2009年34期
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荧光探针法研究铅离子对小牛胸腺DNA构象的影响

赵霞  范阔海  
【摘要】:[目的]利用荧光探针法研究铅离子与DNA的作用方式。[方法]采用紫外可见分光光度法检测了DNA的纯度,采用荧光滴定法研究了铅离子对DNA构象的影响。[结果]随着铅离子的加入,DNA-EB复合物的荧光强度逐渐降低。在DNA-EB体系中加入铅离子后,荧光强度随着铅离子浓度的增加而降低,且荧光峰位略有红移。按生物分子的荧光寿命τ0为10ns计算,DNA-EB与铅离子的双分子猝灭常数分别为1.01×1013和4.0×1014L/(mol.s),二者均大于生物分子的最大动态猝灭常数2.0×1010L/(mol.s),说明由铅离子引起的DNA-EB的荧光猝灭属于静态猝灭。根据斜率和外推截距计算出DNA-EB与猝灭剂的解离常数为1.13×10-5mol/L。铅离子与DNA-EB的结合位点为5.56,结合常数为1.51×1029。[结论]铅离子容易与DNA结合,引起DNA构象的变化。

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