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《安徽农业科学》 2009年22期
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正交设计优化稻瘟病菌SSR-PCR反应体系

张崎峰  靳学慧  张亚玲  蔡鑫鑫  王士磊  
【摘要】:[目的]筛选最佳的稻瘟菌SSR-PCR反应体系。[方法]利用正交设计对稻瘟菌SSR-PCR反应体系中的5个因素(TaqDNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验,筛选出各反应因素的最佳水平并进行退火温度梯度试验筛选最佳的退火温度。[结果]稻瘟菌SSR-PCR反应的最佳体系为:反应总体积为20μl,TaqDNA聚合酶1.0 U,Mg2+2.0 mmol/L,DNA100 ng,dNTP50μmol/L,引物(ms355~356)0.4μmol/L,最佳退火温度为58.5℃。在此体系下可从稻瘟菌材料基因组DNA中扩增出300 bp左右清晰的目的条带,说明该体系稳定,适用于稻瘟菌基因组DNA的SSR标记。[结论]该研究为稻瘟菌的分子标记、遗传多样性研究和分子育种奠定了基础。

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前5条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 杨俊;王维香;赵文生;孔令安;孙静;薛敏峰;陈小林;王大伟;王瑞金;王立霞;张燕;许金荣;彭友良;;Con2作为剪切体的新成员控制稻瘟病菌的致病性和分生孢子产生[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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6 刘小红;利用启动子陷阱技术(Promoter trapping)构建稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)突变体库[D];浙江大学;2004年
7 金鑫;稻瘟病生防菌Af1、Af4的初步研究[D];华中农业大学;2010年
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9 刘娟;稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)致病相关基因的分子标记及克隆[D];南京农业大学;2003年
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