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《安徽农业科学》 2007年33期
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O型口蹄疫病毒VP1T细胞、B细胞表位双拷贝基因与大肠杆菌LTB基因融合表达产物的免疫应答

庄娟  尤永进  陈波  饶忠  潘洁  
【摘要】:[目的]为预防口蹄疫与幼畜腹泻、生产安全高效的基因工程联合疫苗提供试验依据。[方法]通过基因工程技术,把O型口蹄疫病毒VP1双拷贝21-40(20aa)与141-160(20aa)表位肽基因——2020VP1与产肠毒素大肠杆菌LTB连接到表达载体上,在大肠杆菌中表达出具有抗O型口蹄疫病毒与产肠毒素大肠杆菌双重作用的融合蛋白。[结果]运用基因工程技术构建了融合表达载体r2020-B-2020。转化宿主菌BL21(DE3)RIL后的表达产物经SDS-PAGE分析,结果显示,重组融合蛋白的分子量约为41 kD,表达量较高。动物实验表明,融合蛋白能够诱发兔体产生较强的抗FMDV中和抗体,免疫豚鼠在低浓度FMDV刺激下产生特异性T淋巴细胞增殖反应,说明融合蛋白可以诱导机体产生有效的抗FMDV细胞及体液免疫反应。融合蛋白能够与霍乱毒素CTB抗体特异结合,免疫雌鼠能够抵抗一定强度的大肠杆菌毒株攻击。[结论]融合蛋白可以同时诱导机体产生较好的抗FMDV及ETEC免疫应答反应,具有开发成为FMDV与ETEC基因工程疫苗的应用价值。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 李润成;余兴龙;白霞;向卫军;葛猛;黎满香;;O型口蹄疫病毒VP1基因与大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因的融合表达及表达产物的免疫原性分析[J];生物工程学报;2009年04期
2 庄娟;尤永进;陈波;饶忠;潘洁;;口蹄疫病毒VP1 T、B细胞表位与大肠杆菌肠毒素融合蛋白的免疫保护性研究[J];畜牧兽医学报;2009年03期
3 庄娟;;口蹄疫病毒VP1 T、B细胞表位与大肠杆菌肠毒素融合蛋白的免疫应答[J];中国预防兽医学报;2008年12期
4 葛俊伟;姜艳平;汪淼;刘敏;乔薪瑗;唐丽杰;李一经;;大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在干酪乳杆菌中的分泌表达及其GM1结合活性分析[J];中国预防兽医学报;2010年07期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 易建中,黄海斌,杨志军,黄妤,邓余,严维耀,丁恩雨,龙永进,徐泉兴,郑兆鑫;A型口蹄疫病毒VP1免疫活性肽基因串联片段的化学合成及克隆与表达[J];复旦学报(自然科学版);1997年05期
2 杨志军,林焱,李光金,严维耀,徐泉兴,尤永进,郑兆鑫;含T细胞表位和B细胞表位的抗O型FMDV基因工程疫苗诱导豚鼠产生免疫反应[J];复旦学报(自然科学版);2000年05期
3 宋锦平,钟萍,汪涛,温秀兰,张虹;测定淋巴细胞增殖的MTS和XTT比色法的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2001年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王光俊;刘志宏;安晓丹;张晓宇;张勇;刘贺荣;朱玲勤;马小梅;;硫酸铍对人胚肺成纤维细胞的细胞毒性和遗传毒性[J];癌变.畸变.突变;2009年03期
2 邓淑华;高巍;杨鹤松;孟艳彬;;MTS/PMS比色分析方法测定LA795细胞活性的实验条件[J];承德医学院学报;2006年04期
3 张森;万德森;肖锡宾;潘志忠;高枫;;大蒜油激活鼠肝枯否细胞抗癌作用的实验研究[J];大肠肛门病外科杂志;2005年04期
4 周俊;陈敦金;廖秦平;余艳红;;孕期、哺乳期暴露十溴联苯醚对子代大鼠免疫功能的影响[J];南方医科大学学报;2006年06期
5 彭煦;范晓静;石贤爱;陈剑锋;郭养浩;孟春;;香菇多糖对小鼠脾T/B淋巴细胞TLR4、TLR9表达的影响[J];中国临床药理学杂志;2008年03期
6 吕学泽;王雪敏;梁玉荣;王宏俊;;免疫活性肽的研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年04期
7 罗鸣;潘琼;阙晓南;;口蹄疫新型疫苗的研究进展[J];广西畜牧兽医;2009年02期
8 杨帆;席伟;谢裕安;黎远冬;罗小玲;匡志鹏;吴继宁;李蕾;;蛤蚧肽对小鼠免疫功能的调节作用[J];广西医科大学学报;2011年03期
9 白挨泉;邵永昌;刘为民;;猪O型口蹄疫合成肽疫苗与灭活疫苗免疫效果比较[J];黑龙江畜牧兽医;2011年09期
10 林瑞庆,罗满林,黄毓茂,刘镇明,辛朝安;O型口蹄疫病毒VP1基因的克隆与表达[J];华南农业大学学报;2004年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 齐旭阳;冷寒冰;郎久义;秦淑杰;庄国宏;;冬虫夏草液体发酵技术及其多糖对小鼠免疫功能影响的研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姚若进;蜕膜细胞中孕激素受体及TNF-α、IL-1β、NF-κB改变致自然流产的研究[D];中南大学;2011年
2 吴礼襄;肠毒素超抗原在金黄色葡萄球菌脓毒症发病机制的研究[D];广州医学院;2010年
3 罗利华;中药风湿宁对实验性类风湿关节炎的疗效及作用机制研究[D];成都中医药大学;2002年
4 韩哲林;艾灸介导AA大鼠T细胞凋亡的作用机制研究[D];成都中医药大学;2003年
5 卢幸吉;中药风湿宁治疗活动期RA的实验及临床研究[D];成都中医药大学;2003年
6 吴雨霞;口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在原核和真核细胞中的表达[D];甘肃农业大学;2003年
7 史喜菊;牛IFN-α/γ基因的克隆、表达及重组蛋白的应用研究[D];中国农业大学;2004年
8 邵寒娟;A、O型口蹄疫双价疫苗研究[D];厦门大学;2004年
9 吴洁;健脾益肾解毒法防治胃癌复发转移作用及对凋亡信号传导的调控机制[D];中国中医科学院;2006年
10 李江;南极适冷菌Pseudoalteromonas sp. S-15-13胞外多糖的研究[D];中国海洋大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高琳琳;羊口蹄疫灭活疫苗免疫程序的研究[D];中国农业科学院;2010年
2 王宝秋;黄芪中药种衣剂及包衣技术研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 席玮;蛤蚧肽的免疫调节及抗肿瘤作用实验研究[D];广西医科大学;2011年
4 李浩烜;香菇多糖对小鼠T细胞功能的影响[D];广州中医药大学;2011年
5 陈启伟;口蹄疫A型病毒AF/72株主要B细胞表位的筛选鉴定[D];甘肃农业大学;2010年
6 曹冬梅;几种典型抗生素的协同γ辐照降解效应的研究[D];南京航空航天大学;2011年
7 石晓妮;小反刍兽疫病毒H、F蛋白抗原表位的鉴定和免疫学特性研究[D];甘肃农业大学;2011年
8 苗加伟;牛黄解毒片、雄黄与其它砷化物急性毒性的比较研究[D];遵义医学院;2011年
9 张雪梅;大豆蛋白酶解产物中的糖肽及其对小鼠脾细胞增殖效果的研究[D];中国农业大学;2003年
10 张春玲;猪繁殖与呼吸综合征多表位疫苗的基础研究[D];新疆农业大学;2003年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨志军,林焱,李光金,严维耀,徐泉兴,尤永进,郑兆鑫;含T细胞表位和B细胞表位的抗O型FMDV基因工程疫苗诱导豚鼠产生免疫反应[J];复旦学报(自然科学版);2000年05期
2 李润成;余兴龙;白霞;侯强红;罗维;刘忠华;向卫军;;O型口蹄疫病毒代表性抗原VP1基因的人工合成与表达及其免疫原性检测[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2008年03期
3 苏春霞;段相国;王秀青;任雪枫;曹瑞兵;周斌;陈溥言;;FMDV VP1基因与HSP70基因在毕赤酵母中的融合表达及免疫特性[J];生物工程学报;2006年05期
4 张金波;祝建波;彭晓明;陈创夫;;产肠毒素大肠杆菌K88-STII-LTA2/LTB融合基因在烟草中的表达[J];西北农业学报;2007年05期
5 徐义刚;唐丽杰;崔丽春;赵丽丽;李一经;;分泌型和非分泌型表达猪细小病毒VP2蛋白的重组乳酸菌经口免疫小鼠的效果分析[J];畜牧兽医学报;2007年12期
6 蒙学莲;房永祥;窦永喜;陈国华;景志忠;才学鹏;;猪IFN-γ和IL-4重组质粒对口蹄疫疫苗的免疫佐剂效应研究[J];畜牧兽医学报;2008年09期
7 许崇波,卫广森,冯书章,刘子,刘晓明,黄培堂,岳军明;大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合基因的构建及其免疫原性研究[J];畜牧兽医学报;1997年04期
8 庾庆华;杨倩;;乳酸杆菌作为一种新型活疫苗抗原递送载体[J];世界华人消化杂志;2005年18期
9 庄娟;尤永进;陈波;饶忠;潘洁;;O型口蹄疫病毒VP1 T细胞、B细胞表位双拷贝基因与大肠杆菌LTB、STⅠ肠毒素基因融合表达产物的免疫应答[J];遗传;2006年05期
10 庄娟,曹祥荣,陈波,饶忠,潘洁,徐泉兴,尤永进;O型口蹄疫病毒VP1 T细胞与B细胞表位基因双拷贝串联表达产物的免疫应答[J];中国预防兽医学报;2005年06期
【二级引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 胡博;Asia 1型、O型FMDV复合多表位口服疫苗构建与实验免疫研究[D];吉林大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 卢会英;猪肺炎支原体p97R1区基因与LTB基因的重组表达及重组蛋白的免疫原性研究[D];中国兽医药品监察所;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 郑兆鑫,贺沛富,严维耀,王启松,施文,赵洪兴,周智爱,朱慈晖,徐泉兴,陈嘉棣,李致勋,施履吉;编码口蹄疫病毒VP1免疫活性肽基因片段的化学合成及克隆与表达[J];病毒学报;1989年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郑敏,金宁一,鲁会军,韩松,李昌,金扩世;C型口蹄疫病毒VP1基因的串联与原核表达[J];中国生物制品学杂志;2005年05期
2 邹伟;赵玉军;孟令研;杨剑洁;刘永;;口蹄疫新型疫苗的研究现状[J];畜禽业;2007年08期
3 焦颖;龚劲峰;何校澎;黄辉荣;刘德辉;张春红;吴锋;黄毓茂;;O型口蹄疫病毒VP1基因在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析[J];动物医学进展;2010年02期
4 卢曾军,刘在新;口蹄疫病毒研究概况[J];中国兽医科技;2003年02期
5 付薇;陈磊;熊毅;潘琼;王常伟;陈进喜;胡晓静;刘棋;;O型口蹄疫病毒结构蛋白基因VP1的克隆与原核表达[J];安徽农业科学;2008年35期
6 代文君;王洪梅;刘晓;高运东;于力;王立群;仲跻峰;何洪彬;;口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体的构建及VP1基因稳定表达细胞系的建立[J];中国农业科学;2010年16期
7 胡媛媛;张文东;宋建领;赵焕云;吕粤;岳亮;张应国;李作生;范泉水;张富强;;云南边境O型口蹄疫监测及病毒VP1基因序列分析[J];畜牧与兽医;2008年04期
8 刘湘涛,李忠润,胡弘博,马军武,韩雪清,姜艳春,胡艳君,罗公平;口蹄疫病毒12S抗原免疫学性质的研究[J];中国兽医科技;1996年08期
9 肖扬;;不可忽视口蹄疫的防治[J];农家科技;1999年08期
10 张彦明;王晶鈺;;口蹄疫的诊断与防制[J];中国动物保健;1999年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨鑫;王红宁;周英顺;高荣;曾博;徐昌文;丁梦蝶;;猪源O型口蹄疫病毒分离株VP1基因特征分析[A];四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会论文集[C];2011年
2 邬苏晓;刘镇明;罗满林;戚一达;;口蹄疫病毒3ABC基因的原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(上)[C];2003年
3 沈小燕;丛国正;常惠芸;邵军军;独军政;林彤;谢庆阁;;持续感染口蹄疫病毒VP1和3ABC基因变异研究[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
4 邱杨;肖性龙;刘建丽;李惠芳;张经纬;余以刚;吴晖;;口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
5 潘群兴;王永山;何孔旺;欧阳伟;王晓丽;诸玉梅;夏兴霞;;重组口蹄疫病毒T细胞表位基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
6 李夏莹;王建昌;郑世军;;口蹄疫病毒VP1,2C蛋白与宿主细胞相互作用机制的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒RNA组成、功能及分子致病机制的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
8 鲁会军;韩松;郑敏;贾雷立;王凯;金宁一;;口蹄疫病毒3AB基因在重组杆状病毒中的表达及检测[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
9 张洪勇;金宁一;;口蹄疫病毒分子流行病学的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
10 郑敏;金宁一;张洪勇;刘棋;韦婷;郭建刚;李华明;尹革芬;鲁会军;;口蹄疫病毒O/NYOO株的分子生物学特性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集(下)[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 吴星;口蹄疫对农产品市场的影响[N];期货日报;2005年
2 廖学时;构建感染性口蹄疫病毒粒子成功[N];医药导报(中药报);2004年
3 河北省畜牧兽医站 韩庆安(高级兽医师);春防牲畜口蹄疫[N];河北科技报;2006年
4 罗学宏;“手足口病”不是“口蹄疫”[N];家庭医生报;2007年
5 江南雪舞;谈谈口蹄疫病毒[N];大众卫生报;2005年
6 本报记者 刘丁;口蹄疫阴影下的“英国病人”[N];华夏时报;2007年
7 ;猪口蹄疫病的诊治[N];中国畜牧兽医报;2008年
8 刘书梅;春季应做好猪口蹄疫的防治工作[N];河南科技报;2007年
9 刘晔;“山羊绒洗净因素对口蹄疫病毒影响”通过鉴定[N];中国国门时报;2008年
10 郭林;口蹄疫扩大:欧盟对英出口亮红灯[N];光明日报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱远茂;表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组牛疱疹病毒1型的构建及其免疫研究[D];东北农业大学;2010年
2 王芳;表达FMDV vp1基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特性研究[D];中国农业科学院;2007年
3 赫冬梅;猪瘟和口蹄疫病毒抗原基因在植物内的重组与表达[D];浙江大学;2005年
4 海岗;表达FMDV vp1基因和山羊γ-干扰素基因的重组山羊痘病毒的构建及其生物学特性研究[D];中国农业科学院;2008年
5 李勇;口蹄疫病毒3C(D)蛋白与宿主细胞因子Fascin-1相互作用研究[D];武汉大学;2010年
6 孙萌;口蹄疫病毒VP1抗原基因在模式植物叶绿体中的重组和表达[D];浙江大学;2003年
7 吴雨霞;口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因在原核和真核细胞中的表达[D];甘肃农业大学;2003年
8 邵寒娟;A、O型口蹄疫双价疫苗研究[D];厦门大学;2004年
9 白兴文;我国O型泛亚1系口蹄疫病毒表型差异的分子基础[D];中国农业科学院;2012年
10 洪琦;口蹄疫—伪狂犬病二价与口蹄疫—猪细小—伪狂犬病三价基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 范翠翠;O型口蹄疫病毒VP1重组蛋白的表达及其免疫原性的研究[D];扬州大学;2008年
2 张先锋;口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC、3AB、3A的克隆表达及3A蛋白间接ELISA方法的初步建立[D];新疆农业大学;2010年
3 裴志花;牛O型口蹄疫病毒内蒙古疫苗株p1基因的克隆与序列分析[D];内蒙古农业大学;2005年
4 金华利;口蹄疫病毒vp1体外表达和DNA疫苗免疫效果的研究[D];新疆大学;2004年
5 孙琳;MUC1肿瘤抗原和口蹄疫病毒抗体检测方法的建立[D];吉林大学;2004年
6 王钢;口蹄疫病毒VP1基因的序列分析及巢式PCR检测研究[D];四川农业大学;2005年
7 田飞鹏;杆状病毒介导O型口蹄疫病毒P12A和3C基因在Sf9细胞和BHK细胞中的共表达[D];西北农林科技大学;2010年
8 杜宇;猪O型口蹄疫病毒VP_1基因的原核表达及重组蛋白的反应原性检测[D];山西农业大学;2005年
9 赵磊;抗口蹄疫病毒单克隆抗体的制备和抗原模拟表位的筛选[D];安徽农业大学;2008年
10 徐宗香;口蹄疫病毒VP2蛋白B细胞线性表位的鉴定[D];东北农业大学;2009年
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