重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体

程烽盛燕施静艺陈漪徐潮刘智梁军潘春明朱忠勇宋怀东

【摘要】：背景与目的:构建UGRP1基因启动子的定点突变表达载体。材料与方法:以插入UGRP1基因正常启动子的质粒pGL3-UGRP1(-112G)为模板,用重叠延伸PCR定点诱变技术,对-112位点的碱基进行定点突变,并构建定点突变表达载体。结果:DNA测序表明,UGRP1基因启动子-112处的碱基已由G突变为A,成功实现定点诱变。结论:重叠延伸PCR定点诱变技术高效、简便。pGL3-UGRP(-112A)的成功构建,为进一步研究-112G/A多态性对该基因转录活性的影响奠定了基础。

子宫球蛋白相关蛋白1(uteroglobin-related protein1,UGRP1)基因是2001年报道的,功能了解甚少的新基因。它是用消减抑制杂交法从T/EBP/NKX2.1-null小鼠的胚胎肺中分离鉴定出来的,定位于小鼠染色体18C-D。人的UGRP1基因,定位于染色体5q31-5q34,与小鼠染色体18C-D相对应。该基

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前1条

1	司少艳;宋淑军;张建中;刘俊丽;张铭;路浩军;;重叠延伸PCR定点诱变技术纠正SEA基因中的点突变[J];总装备部医学学报;2010年02期

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前1条

1	朱曼丽;利用重叠延伸PCR技术在酿酒酵母中构建木糖代谢相关基因[D];天津大学;2009年

	【参考文献】
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前1条

1	孙玲玲,王艺,黄薇;UGRP1基因及其与疾病相关性的研究[J];医学分子生物学杂志;2005年03期

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1	陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
2	温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
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4	王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
5	陈静;胡晓辉;苗华荣;张建成;禹山林;;花生SRAP-PCR技术体系的优化[J];山东农业科学;2008年05期
6	陈长宝;朱树华;周杰;;改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA[J];山东农业科学;2009年05期
7	葛宏华,肖亚中,姚建平;人心室肌球蛋白轻链1基因的克隆及其体外的表达与纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年06期
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10	牟艳军;廖和荣;赵宗胜;李大全;;生长激素受体(GHR)mRNA在绵羊皮肤组织切片定位[J];安徽农业科学;2006年07期

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1	朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2	徐波;张莉;李启云;王景会;姜媛媛;杨贞耐;;牛凝乳酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达[A];中国奶业协会年会论文集2008（下册）[C];2008年
3	刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009（上册）[C];2009年
4	张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
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6	李玫;廖宝文;;红树林湿地烷烃降解菌的分离筛选[A];第十三届中国科协年会第16分会场-沿海生态建设与城乡人居环境学术研讨会论文集[C];2011年
7	郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
8	于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
9	龚束芳;杨涛;车代弟;;偃麦草根茎非质体蛋白质修饰冰晶能力的观察[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
10	王英;滕齐辉;曹慧;胡锋;崔中利;;淹水和旱作水稻土中细菌群落多样性的空间分布[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年

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1	徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2	殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3	杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4	宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
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9	温武军;鲤抗菌肽基因的克隆及其功能研究[D];山东师范大学;2011年
10	王秀娟;嗜热真菌纤维二糖水解酶（CBHⅠ、CBHⅡ）和内切葡聚糖酶（EGⅠ）的分子改造[D];山东农业大学;2011年

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1	高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
2	王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3	汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
4	王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
5	黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
6	段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
7	龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
8	刘源;猪胸膜肺炎放线杆菌双组分调控系统ΔnarQ/narP突变株构建及功能研究[D];华中农业大学;2010年
9	李善文;蟾蜍灵对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响[D];南京医科大学;2009年
10	辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年

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前10条

1	杨宇;吴元华;郑雅楠;;利用重叠延伸PCR技术进行DNA的人工合成[J];安徽农业科学;2006年09期
2	周爱萍;;国内外燃料乙醇的生产与研究进展[J];安徽农业科学;2008年20期
3	刘玲丽,谭岩,刘力华,张琨,时阳,许淑芬,方艳秋,段秀梅,姜艳芳,王晓祺;获得重构基因的简捷方法——重叠延伸PCR[J];吉林大学学报(医学版);2004年05期
4	苏燕;邵国;高嵩单;于明华;修瑞娟;;一种简便高效利用重叠延伸PCR进行基因定点突变的方法[J];包头医学院学报;2007年06期
5	徐芳;姚泉洪;熊爱生;彭日荷;侯喜林;曹兵;;重叠延伸PCR技术及其在基因工程上的应用[J];分子植物育种;2006年05期
6	张远欣;燃料乙醇的发展状况[J];甘肃科技;2005年04期
7	高卫华,张敏华,刘成,邹少兰,吴经才;能利用五碳糖和六碳糖生产乙醇的基因工程菌菌株的构建[J];工业微生物;2004年01期
8	龚大春;田毅红;李德莹;龚美珍;涂志英;;纤维素乙醇的研究进展[J];化学与生物工程;2007年01期
9	曹阳;李冬田;尹冰楠;佟惠春;;重叠延伸PCR方法的建立与应用[J];河北医药;2005年11期
10	曲音波;;纤维素乙醇产业化[J];化学进展;2007年Z2期

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1	刘玉冰;李晓霞;王宝利;张镜宇;;一步PCR法在单碱基定点诱变中的应用[J];天津医科大学学报;2007年01期
2	罗杰;寸韡;车艳春;王丽春;李卫中;刘龙丁;李琦涵;;HSV1 ICP22对HCMV主要即刻早期启动子结构的效应分析[J];中国科学(C辑:生命科学);2007年03期
3	邱实;蔡云;高兴;顾寿智;刘泽军;;定点诱变法构建p53基因多态质粒[J];癌变·畸变·突变;2010年03期
4	张万里;李伟;吴川清;林学科;李航;王国斌;陶凯雄;;小鼠EDNRB基因启动子生物信息学分析[J];生物信息学;2011年01期
5	李志新;曹双河;张相岐;张怀刚;;伪鹅观草高分子量麦谷蛋白基因启动子的克隆[J];长江大学学报(自科版)农学卷;2007年02期
6	油红捷;闫韶飞;丁卫;;脂肪因子visfatin的调节与功能多样性[J];生物化学与生物物理进展;2008年12期
7	张传宇;孙奋勇;时宿妹;马纪;谢秋玲;;人血小板源性生长因子受体β启动子的结构与功能分析[J];中国生物化学与分子生物学报;2010年04期
8	李勃;熊海燕;邓继先;;猪血清白蛋白基因5′-端调控区的克隆与分析[J];武汉生物工程学院学报;2006年02期
9	魏勇;应大君;侯春丽;朱楚洪;崔晓萍;邢艳;郭洪峰;;人工锌指蛋白(ZFP)的设计及原核表达分析[J];生物医学工程学杂志;2008年03期
10	孙亮先;谢宪兵;桑庆亮;陈怀宇;陈朝阳;黄周英;;用5’LongSAGE标签分析蜜蜂Yps基因转录起始位点的多样性[J];泉州师范学院学报;2009年02期

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1	董菁;施双双;张国庆;皇甫竞坤;洪源;成军;王勤环;李莉;斯崇文;;乙型肝炎病毒C基因启动子区异质性检测的初步研究[A];中华医学会第七次全国感染病学术会议论文汇编[C];2001年
2	麦卫华;胡学强;陆正齐;;AQP4基因多态性与多发性硬化及视神经脊髓炎遗传易感性关系的研究[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
3	李春笋;刘芝华;;p53蛋白对S100A9基因的转录调控研究[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2007年
4	冯鸿;徐文中;徐云远;种康;;茉莉酸甲酯对春化作用相关基因VER2动子的诱导效应[A];2009中国植物学会植物细胞生物学学术年会论文摘要集[C];2009年
5	林忠宁;凌文华;Fred K Kadlubar;;ERCC6基因启动子区-6530C→G单核苷酸多态性的功能性分析[A];中国毒理学会第四届全国学术会议论文（摘要）集[C];2005年
6	刘五高;吕伟超;王伟;王艳;丁友法;;肿瘤坏死因子-α基因启动子区多态性与肝衰易感性的Meta分析[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
7	宋于刚;肖法嫚;姚永莉;;胃粘膜肠上皮化生和胃癌中CDX2基因启动子区甲基化状态及意义[A];第二十一届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨国家级中西医结合消化系统疾病新进展学习班论文汇编[C];2009年
8	符爽;孙开来;富伟能;;MYCT1基因全长cDNA的克隆及其启动子的结构与功能分析[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
9	刘树强;罗昊澍;刘佳利;崔胜;;Sp1可通过与GC框结合直接调控Lhx4基因的表达[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
10	仇雪梅;张风;赵主江;苏献伟;刘东声;樊红;;TSA诱导肝癌细胞系SMMC-7721中CDH1的表达[A];江苏省遗传学会第七届二次代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年

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1	;儿童系统性红斑狼疮中白细胞介素－10启动子区单核苷酸多态性对自身表达水平的影响[N];中国医药报;2003年
2	;21－羟化酶缺乏症患者CYP21基因点突变研究[N];中国医药报;2003年
3	记者刘传书;家蚕基因组甲基化谱发表[N];科技日报;2010年
4	记者谭大跃　通讯员蒋婷燕;家蚕基因组计划取得新突破[N];深圳特区报;2010年
5	记者胡德荣;一种蛋白分子能清除病原微生物[N];健康报;2010年
6	岳阳;第二军医大学发现免疫细胞诱导干扰素产生新机制[N];中国医药报;2010年
7	;汉族人群RANTES基因多态性与艾滋病病毒－1感染关系的初步研究[N];中国医药报;2003年

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1	杨志伟;嗜肺军团菌ip/piIE DNA疫苗的初步研究[D];四川大学;2007年
2	邬国斌;肝细胞癌中ASPP1、ASPP2基因表达及其启动子区CpG岛甲基化的实验研究[D];广西医科大学;2008年
3	彭旭;ITGB4BP调控TGF-β1表达的实验研究[D];第三军医大学;2011年
4	吴韩英;西瓜果实特异性基因wml1 5'端启动子区转录调控功能及其应用研究[D];浙江大学;2003年
5	杨晓敏;环加氧酶-2启动子区抑制性结合蛋白的鉴定和功能分析[D];南京医科大学;2007年
6	王虎;扩张型心肌病致病基因LMNA突变功能研究及心脏特异基因TNNI3K调控机制研究[D];中国协和医科大学;2007年
7	高静;NECL1蛋白在神经胶质瘤中表达缺失的表观遗传调控机制[D];中国协和医科大学;2008年
8	张子彦;遗传性纤溶酶原激活剂抑制物-1缺乏症的诊断、治疗及发病机理的研究[D];苏州大学;2004年
9	彭方毅;LAPTM4B新基因在肿瘤细胞中的表达和检测及启动子区的克隆和活性分析[D];重庆医科大学;2005年
10	张宏艳;肿瘤抑制基因PTEN调控Pleiotrophin的表达及与乳腺癌关系的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

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1	谢冬玲;河南贲门癌高发区贲门癌与癌前病变P15基因启动子区甲基化变化研究[D];郑州大学;2004年
2	王刚;白血病细胞中雄激素受体启动子CpG岛甲基化的实验研究[D];第三军医大学;2007年
3	刘利;白血病细胞雌激素受体启动子甲基化的实验研究[D];第三军医大学;2007年
4	丁淑琴;载脂蛋白M定点诱变及其生物学功能检测[D];蚌埠医学院;2011年
5	王荟;痛风与肿瘤坏死因子α基因启动子区-238A/G和-308A/G位点多态性的遗传易感性研究[D];青岛大学;2012年
6	黄丽珠;载脂蛋白M表达及其启动子基因多态性与冠心病及其相关因素的关联性分析[D];蚌埠医学院;2012年
7	刘凤鸣;人PDCD4启动子的确定及其转录调控的初步研究[D];山东大学;2010年
8	杜兴兰;海栖热袍菌基因aguA在常温下形成的mRNA二级结构与基因表达水平关系的初步研究[D];江南大学;2004年
9	张艳;FXR对apoM表达的影响及其机制的初步探讨[D];第三军医大学;2010年
10	林凡;HIF-1α对DDAH1的调节及机制研究[D];华中科技大学;2011年

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