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《癌变.畸变.突变》 2004年03期
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外源DNA转染精子的实验研究

阮烨  王晓云  谢庆东  黄天华  
【摘要】:背景与目的 :探索精子作为外源基因载体的可行性及阳离子脂质体的存在对精子转染率的影响。材料与方法 :取性成熟雄性金黄地鼠附睾内精子 ,采用共培养及脂质体介导两种方法与外源DNA共孵育后 ,用PCR、Southernblot及荧光原位杂交(FISH)等技术检测外源基因在精子细胞中的存在及存在部位 ,并对两种方法进行比较分析。结果 :金黄地鼠附睾内的活精子具有主动捕获外源基因的能力 ,荧光原位杂交证明部分外源基因进入了精子头部 ,脂质体介导组精子外源基因携带率较共培养组高 ,两组精子用DNA酶处理前后外源基因携带率间差异也有统计学意义 ,且观察发现死精子经洗涤后没有携带外源基因者。 结论 :即是在没有脂质体存在的情况下 ,活的精子细胞仍然能被外源基因所转染 ,这一过程涉及到精子对外源基因的主动性捕获 ,脂质体的存在能提高精子外源基因的转染率

【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李茜;pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒的构建及其在小鼠精子内的表达[D];青岛大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 刘红林,陈宜峰,姜志华,丁波,黄月英;脂质体介导鸡精子与外源DNA的结合[J];生物工程学报;1996年S1期
2 黄建民,黄天华,方小武,庄天罡,刘鸿禧;用荧光原位杂交技术检测人精子核的非整倍性[J];中华医学遗传学杂志;1997年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 黄建民,黄天华,邱焕英,邱杰文,方小武,陈晓红,庄天罡,蔡树深,王永华,刘鸿禧,杨风霞,刘卫东;乙型肝炎病毒对精子染色体的影响[J];癌变.畸变.突变;1999年02期
2 李欣,郑履康,邓丽霞,张桥;双色荧光原位杂交检测正常人精子9、18号染色体非整倍体率[J];癌变.畸变.突变;2002年02期
3 吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;pEgr-P16重组质粒的构建及其在EC9706细胞中的辐射诱导表达[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
4 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
5 陈传德,吴中亮,陈家堃;乙酸镍诱导的人支气管上皮细胞系转化细胞基因组不稳定性分析[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
6 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
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8 吕慧贞;张建朋;陈新;刘静;张元湖;;一种改进的鸭梨总RNA提取方法[J];山东农业科学;2007年05期
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10 张学民,王金生;碱裂解法提取质粒DNA方法的改进[J];安徽大学学报(自然科学版);2000年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 郭昱嵩;王中铎;刘楚吾;陈志明;刘筠;;勒氏笛鲷(Lutjanus russellii)线粒体DNA全序列的测定与分析[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集(下册)[C];2007年
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4 樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;子房注射法获得转基因甜瓜植株[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
5 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫表面抗原SAG2基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
6 李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;弓形虫致密颗粒蛋白GRA4基因体外扩增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表达[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
7 唐小江;马争;黄建勋;黄汉林;李来玉;牛侨;;正己烷引起红细胞膜血影蛋白交联的研究[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年
8 严家彬;李新辉;吴淑勤;杜合军;;鳜鱼病毒核酸特异片段表达及高效价抗体制备[A];可持续水产养殖——资源、环境、质量——2003水产科技论坛论文集[C];2003年
9 赵晓瑜;柳伟强;李晓霞;;蚯蚓抗菌肽40kDa Fetidin基因的原核表达与复性[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
10 张核子;王保捷;丁酶;肖仰哲;巴颖;李剑平;李春梅;刘利民;赖跃;;短串联重复位点FGA扩增片段长度多态性研究[A];第二次全国法医物证学学术交流会论文集[C];1998年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 梁勇;白念珠菌高铁还原酶基因表达调控及Aft2p转录因子的功能研究[D];南开大学;2010年
2 于双妮;胰腺癌差异表达microRNAs的鉴定及功能研究[D];北京协和医学院;2008年
3 陈其华;前癃通胶囊治疗良性前列腺增生症临床观察及其对间质细胞作用的实验研究[D];湖南中医药大学;2011年
4 马丽菊;云南宣威肺癌细胞系侧群细胞特征分析[D];昆明医学院;2011年
5 许雷;大青杨纤维素合酶基因的克隆与遗传转化的研究[D];东北林业大学;2011年
6 朱伟;摄食抑制因子NUCB2/Nesfatin-1对机体胰岛素敏感性的影响[D];重庆医科大学;2011年
7 王金鹏;4α糖基转移酶环化活性定向控制及其大环糊精产物的分离及应用研究[D];江南大学;2011年
8 程光平;巴马繐唇鲃生物学及遗传学研究[D];中国海洋大学;2011年
9 宋娜;西北太平洋两种海洋鱼类的分子系统地理学研究及分子标记在褐牙鲆增殖放流中的应用[D];中国海洋大学;2011年
10 郭里;若干图论问题的DNA计算机算法研究[D];湖南大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱晓娟;重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL的构建、表达、纯化及初步鉴定[D];南京医科大学;2009年
2 钱静;携带Apoptin双调控溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究[D];浙江理工大学;2010年
3 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
4 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
5 吕文兵;杜氏盐藻异养转化藻株的鉴定及初步功能分析[D];郑州大学;2010年
6 李静;父源性HLA-A基因与子痫前期相关性研究[D];郑州大学;2010年
7 张燕松;肾移植术后患者PBMCs中NF-κB的活性和TNF-α mRNA的表达研究[D];郑州大学;2010年
8 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
9 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
10 陈操;日本七鳃鳗抗增殖蛋白Prohibitin1研究及类B淋巴细胞免疫调节初探[D];辽宁师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张清健,黄天华,谢庆东,曾丽萍;HBV DNA重组质粒转染小鼠卵母细胞的研究[J];癌变.畸变.突变;2004年06期
2 熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;精子携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
3 陈桂兰,黄天华,谢庆东,王晓梅,熊小芳;卵母细胞携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
4 黄天华,谢庆东,陈霓彤,曾曦凡,吴丛梅,王晓梅;精子携带的乙肝病毒基因在金黄地鼠胚胎中的复制与表达[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
5 张秋菊;黄天华;谢庆东;谭小方;刘戈飞;陈德宇;周小玲;;人精子携带的HBs和HBc基因在早期胚胎细胞中的蛋白表达[J];癌变.畸变.突变;2008年03期
6 谭小方;黄天华;;HBV基因经生殖细胞垂直传播与DNA甲基化研究进展[J];癌变.畸变.突变;2008年03期
7 吴翠娇,StojanovaT,O'NeillC;血小板激活因子受体m RNA在小鼠附睾精子内的表达[J];青岛医学院学报;1999年03期
8 訾晓渊,姚玉成,熊俊,金艳花,叶煦亭,李建秀,刘红,朱海英,王新民,倪文君,胡以平,余宏宇,丛文铭;乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征[J];第二军医大学学报;2002年11期
9 刘红,姚玉成,何金,李文林,李建秀,苏小平,张钦宪,胡以平;乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠的建立[J];第二军医大学学报;2003年02期
10 金艳花,訾晓渊,姚玉成,熊俊,李建秀,苏小平,王新民,倪文君,丛文铭,杨康鹃,胡以平;乙型肝炎病毒preS2蛋白在转基因小鼠肝脏中的表达[J];第二军医大学学报;2003年02期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 王培林;乙型肝炎病毒基因组的垂直传递及其突变与表达[D];中国海洋大学;2007年
2 牟劲松;乙型肝炎病毒HBsAg基因稳定转染Chang-Liver肝细胞系差异表达蛋白的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
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1 黄洁;绿色荧光蛋白标记的乙肝病毒全基因组真核表达载体的构建与表达分析[D];第二军医大学;2006年
2 王冲;HBV DNA卵细胞载体的构建与乙肝患者卵巢组织中HBV DNA的检测[D];青岛大学;2006年
【相似文献】
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1 王晓梅,阮烨,谢庆东,黄天华;精子为载体的基因转移研究[J];遗传;2005年02期
2 刘红林,陈宜峰;精子介导外源DNA转移的研究进展[J];生物工程进展;1997年02期
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4 郭旭东,森布尔,布赫,杨东山,旭日干;以精子载体法制备转基因小鼠的初步研究[J];内蒙古大学学报(自然科学版);2001年03期
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6 黄伟民,赖良学,乔桂林,岳军明,安靓,王凯,付殿国,殷震,李进;脂质体介导外源基因体外转染精子的研究[J];第一军医大学学报;2000年03期
7 李晓军,武建国;生育及不育男性淋巴细胞及精子中钙调素的定位研究[J];解放军医学杂志;1991年06期
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9 刘升安,胡月龄,岳文斌,何建民;He-Ne激光对精子影响的实验研究[J];中国计划生育学杂志;1995年04期
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4 池振兴;吴艳艳;刘汝涛;;苯胺与鲱鱼精子DNA毒性相互作用的荧光光谱研究[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
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6 黄震;张德义;束学松;吕其阔;;滋阴补肾法治疗精子过多不育症[A];全国性与生殖医学学术研讨会论文汇编[C];2004年
7 丁晓芳;官黄涛;田永红;熊承良;;尿激酶型纤溶酶原激活因子对小鼠精子体外受精能力的影响[A];湘鄂赣首届性与生殖健康学术研讨会论文汇编[C];2007年
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10 黄君艳;;介绍一种简易的精子速度计算方法[A];21世纪男科学——中华医学会第五次全国男科学学术会议论文集[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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7 刘正英;漏网的精子去“偷欢”[N];医药经济报;2002年
8 本文作者为北京煤炭总医院主任医师 钟伟;精子赖以生存的“家”[N];中国人口报;2003年
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1 张杰;人新的精子结合蛋白基因TSBP的定位及其功能的初步研究[D];中国医科大学;2004年
2 李斌生;载端粒酶ASODN-t的壳聚糖纳米粒的制备和对肝癌HepG-2细胞的转染[D];中南大学;2007年
3 刘屹;和厚朴酚脂质体治疗卵巢癌的实验研究[D];四川大学;2007年
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7 冯力蕴;复合荧光CdSe量子点的制备、表征与光学性质研究[D];中国科学院研究生院(长春光学精密机械与物理研究所);2006年
8 戚凤春;新型流感疫苗的研究[D];吉林大学;2006年
9 康建功;鲜无蹼壁虎抗肿瘤活性成分脂质体研制及抗肿瘤实验研究[D];中国海洋大学;2007年
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2 陆阳清;分离哺乳动物XY精子的初步研究[D];广西大学;2004年
3 黄静燕;豚鼠精子获能和超激活运动机理的研究[D];南京农业大学;2008年
4 霍立军;长期液态保存的公猪精液中精子的活率、线粒体活性、获能和顶体完整性检测[D];东北农业大学;2002年
5 李秋玲;马鹿精子体外获能及获能前后超微结构变化的研究[D];东北林业大学;2005年
6 丰一兴;已烯雌酚对青春雄性大鼠睾丸结构与功能的影响[D];暨南大学;2005年
7 杨宏毅;人精子甘露糖受体的表达及其与精子—透明带相互作用的关系[D];福建医科大学;2002年
8 陈田飞;家蚕冷冻精液的人工授精及生存评价研究[D];西南农业大学;2005年
9 范轶欧;纳米二氧化硅与微米二氧化硅对雄性大鼠生精功能影响的比较[D];中国医科大学;2005年
10 罗玉琴;FISH技术在染色体结构异常夫妇PGD中的应用[D];浙江大学;2008年
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