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《癌变.畸变.突变》 2003年01期
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酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定

牛永东  许丽艳  李恩民  
【摘要】:目的 :构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒 pHis_NF和 pLacZ_NF。 方法 :人工合成44bp的三重NF_κB元件寡聚核苷酸 ,通过DNA重组技术将靶序列NF_κB串定向插入细菌_酵母穿梭质粒pHisi和pLacZi的多克隆位点MCS后 ,用特异性酶切、琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳、DNA测序等方法进行鉴定。 结果 :PAGE电泳和DNA测序分析证实定向插入的寡聚核苷酸串与预先设计的插入序列一致。 结论 :成功地构建了重组质粒 pHis_3NF和 pLacZ_3NF ,为借助酵母单杂交实验技术平台深入探讨NF_κB因子相关基因的转录调控机制奠定了实验材料和技术基础。

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 牛永东;许丽艳;韩溟;方王楷;沈忠英;李恩民;;酵母单杂交筛选人食管癌细胞系SHEEC中NF-kappa B元件结合蛋白[J];癌变.畸变.突变;2006年04期
2 牛永东;许丽艳;韩溟;方王楷;沈忠英;李恩民;;酵母单杂交筛选实验中的关键问题[J];中国实验诊断学;2006年07期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 胡振林,孙树汉,戴建新,周凤娟;应用酵母单杂交系统筛选CpG免疫激活序列的特异性结合蛋白[J];第二军医大学学报;2001年06期
2 许丽艳,李恩民,熊华淇,蔡唯佳,沈忠英;NGAL基因在永生化食管上皮细胞恶性转化中过表达的研究[J];生物化学与生物物理进展;2001年06期
3 黄建,侯春晖,钱若兰;用酵母单杂交系统筛选与人ε-珠蛋白基因表达相关的基因[J];生物化学与生物物理学报;2001年02期
4 廖名湘,左瑾,刘东远,方福德;应用酵母单杂交体系筛选与大鼠谷胱甘肽S-转移酶P增强子GPEⅠ相互作用的转录激活因子[J];中国医学科学院学报;2000年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许丽艳,李恩民,蔡唯佳,沈忠英,曾毅;NGAL基因5’侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体的构建与鉴定[J];癌变.畸变.突变;2004年01期
2 欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;人PTEN基因表达载体的构建及其在U_(251)细胞中的表达[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
3 李涛,石年,吴又桐,周丽,董洁,王素青,陈亮;Bcl-2在溴氰菊酯诱导神经细胞凋亡机制中的作用[J];癌变.畸变.突变;2004年05期
4 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
5 吴炳礼;许丽艳;应晓敏;牛永东;李伍举;李恩民;;食管癌相关功能未知基因的电子克隆延伸与ncRNA的发现[J];癌变.畸变.突变;2008年02期
6 史冬燕;程在全;;元江普通野生稻金属硫蛋白基因的获得和序列分析[J];安徽大学学报(自然科学版);2009年03期
7 鞠玉栋;郑回勇;吴维坚;陈永快;何炎森;吴松海;;中国水仙MADS-box基因克隆及其序列分析[J];安徽农学通报;2008年21期
8 张金洲;项智锋;王清华;李学斌;赵海涛;张廷虎;郭玉娇;;利用RAPD标签分析3种鲤科鱼群体的遗传变异[J];安徽农业科学;2008年23期
9 曾青兰;;纤维素降解细菌的分离鉴定和筛选方法的研究[J];安徽农业科学;2008年24期
10 王延云;;峨边花牛肌肉生长抑制素基因cDNA克隆及序列分析[J];安徽农业科学;2008年25期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 田永强;张荣意;朱中元;;人乳头瘤病毒线性平行杂交分型检测条件的建立及优化[A];2009年海南省微生物学检测及质量保证研讨会论文集[C];2009年
2 梁权;毛培菊;罗春贞;王缦;;HIV-1跨膜蛋白gp41的截短表达及其免疫反应性[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
3 朱勤勋;严雪;韩友斌;;鼠源IgG抗体F(ab')2片段及Fab片段的制备纯化及其免疫活性研究[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
4 朱美财;占志;王雅静;蔡庆;;刺桐胰蛋白酶抑制剂突变体在大肠杆菌中的表达及在TPA纯化中的应用[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
5 刘俊莹;张华鹏;王聪聪;张剑峰;;马铃薯卷叶病毒ORF1克隆及序列分析[A];马铃薯产业与科技扶贫(2011)[C];2011年
6 冯琦;孙秉中;赵永同;孙凯;张英起;颜真;韩苇;;Bcr-abl特异性系列核酶载体的构建及初步鉴定[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
7 白玉杰;苏成芳;杨安刚;;抗人CD3单链抗体基因的构建及表达[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
8 赵洁;刘楚吾;;笛鲷AFLP分析体系的确立[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
9 马艳芝;张玉星;;梨属植物基因组DNA提取部位对RAPD扩增的影响[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
10 高水平;范丙友;刘改秀;史国安;李嘉珏;孔祥生;;牡丹ACS反义基因植物表达载体的构建[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王庆莲;苹果多胺和脯氨酸合成代谢相关基因的功能鉴定[D];山东农业大学;2009年
2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 郑小坚;家蚕类胰岛素基因BBX-B8的功能研究[D];苏州大学;2010年
4 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
5 于蕾;野西瓜极性生物碱A10组分诱导SGC-7901细胞凋亡线粒体通路的研究[D];北京中医药大学;2010年
6 王欣梅;大肠杆菌f2噬菌体分子印迹膜的制备、评价和应用[D];华中科技大学;2011年
7 罗兵;甘蓝SRK-SCR相互作用研究及作用强度与酵母生长关系模型的构建[D];西南大学;2011年
8 赵雪倩;维甲酸相关孤核受体α在α-黑素细胞刺激素及其类似物STY39调控树突状细胞成熟中的作用[D];第二军医大学;2011年
9 张荻;百子莲花芽分化及开花机理研究[D];东北林业大学;2011年
10 罗其花;中国小蜂螨自然种系构成、流行病学调查及寄生生物学研究[D];中国农业科学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩秀萍;幽门螺杆菌基因敲除方法的建立及其应用研究[D];华中农业大学;2010年
2 余姣姣;天蓝放线紫红素生物合成上调基因的克隆及其对阿维菌素产量的影响[D];华中农业大学;2010年
3 黄潘;鸡胚性分化早期性别差异表达miRNAs的鉴定及其特性分析[D];华中农业大学;2010年
4 王萍萍;盾壳霉产孢相关基因的克隆及腺苷脱氨酶(CMADA)基因的初步研究[D];华中农业大学;2010年
5 曹晶;风疹病毒(RV)包膜糖蛋白E1特异基因片段的原核表达[D];南京医科大学;2009年
6 王涛;糖皮质激素受体基因转染阿霉素肾病大鼠模型改善糖皮质激素疗效的研究[D];南京医科大学;2009年
7 高岩;拟南芥fad8基因在烟草叶绿体基因组表达研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
8 王丽;MAGE-A3、HLA-A1及HLA-A2在食管鳞癌中的表达及其相关性研究[D];郑州大学;2010年
9 邬成业;禽流感病毒H5N1亚型河南分离株NP基因的原核表达及T细胞表位筛选[D];郑州大学;2010年
10 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 许丽艳,李恩民,牛永东,蔡唯佳,韩溟,吴炳礼,张灿,沈忠英,曾毅;人食管癌cDNA酵母杂交文库的构建与鉴定及其应用[J];生物化学与生物物理进展;2003年02期
2 杨曦,王冀姝,韩骅;HTLV-1转录激活因子Tax和Taxreb107的相互作用[J];生物化学与生物物理学报;2002年02期
3 ;核糖体蛋白的核糖体外功能[J];生命的化学(中国生物化学会通讯);1997年01期
4 曾锦章,洪毅,王红阳,王征旭,陈正军,吴孟超;核糖体蛋白L26基因的克隆及其在肝癌中的表达[J];中华实验外科杂志;2001年02期
5 莫志成,陆瑜,高超,吴宁华,沈珝琲;人Jurkat细胞GAGA样元件结合蛋白cDNA的克隆[J];中国医学科学院学报;2002年03期
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 吴炳礼;许丽艳;应晓敏;牛永东;李伍举;李恩民;;食管癌相关功能未知基因的电子克隆延伸与ncRNA的发现[J];癌变.畸变.突变;2008年02期
2 张荣娟;于颖彦;;肿瘤相关基因转录调控蛋白的识别与研究进展[J];中国实验诊断学;2010年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 徐晨曦;柽柳eIF5A基因的抗逆功能研究[D];东北林业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 沈忠英,蔡维佳,沈健,许锦阶,岑山,滕智平,胡智,曾毅;人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮细胞恶性转化的研究[J];病毒学报;1999年01期
2 廖名湘,刘东远,左瑾,张红云,方福德;3种化学诱导物对大鼠GST-P基因表达的影响及机理[J];科学通报;1999年23期
3 胡赓熙;检查基因表达分析的生物技术——cDNA阵列开发成功[J];中国科学院院刊;2000年03期
4 沈忠英,岑山,蔡维佳,滕智平,沈健,胡智,曾毅;人乳头状瘤病毒18型E6E7基因诱导人胚食管上皮永生化[J];中华实验和临床病毒学杂志;1999年02期
5 刘东远,廖名湘,方福德;大鼠谷胱甘肽S-转移酶P1基因增强子及其反式作用因子的研究[J];自然科学进展;2000年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈峰,李洁,张贵友,刘强;酵母单杂交的原理与应用实例[J];生物工程进展;2001年04期
2 邹丽娟;高玉娜;周平;叶冰莹;陈由强;陈如凯;;筛选甘蔗SPSⅢ启动子诱饵片段结合蛋白的酵母单杂交诱饵质粒的构建[J];福建师范大学学报(自然科学版);2011年01期
3 武丽娟;章镇;刘金戈;付晓燕;高峰;姚泉洪;;水稻热休克转录因子OsHSF13的克隆与生物信息学的初步分析(简报)[J];分子细胞生物学报;2007年03期
4 刘卫群;冯锋;郭红祥;陈红歌;赵同金;周海梦;;DREB1A类转录调控域中对转录激活功能起关键作用的氨基酸[J];中国生物化学与分子生物学报;2008年02期
5 王强,白增亮,李璇,侯琳,张波;转录因子COUP-TFII对端粒酶活性的抑制及其相互作用蛋白的分离和鉴定[J];山东大学学报(理学版);2004年04期
6 刘骥;张秀娟;范建平;张子义;;酵母双杂交技术的应用及进展[J];安徽农业科学;2008年19期
7 魏刚,雷娟,巩威,朱玉贤;拟南芥QRAP2基因的克隆、表达、DNA结合能力及体外转录活性分析[J];科学通报;2005年17期
8 胡振林,孙树汉,戴建新,周凤娟;应用酵母单杂交系统筛选CpG免疫激活序列的特异性结合蛋白[J];第二军医大学学报;2001年06期
9 盛德乔,陆瑜,李宏帆,吴宁华,沈珝琲;用酵母单杂交系统筛选人IL-2Rα基因NIRS元件结合蛋白的cDNA[J];基础医学与临床;2005年03期
10 齐眉,陈凡,齐眉,黄美娟;酵母单杂交系统分离胡萝卜生长素应答元件结合因子[J];中国科学C辑;2002年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 高世庆;陈明;马有志;;一种有效构建酵母单杂交的报道子的方法[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
2 胡国库;冯红;吴波;张义正;;黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(lipC)转录调控因子的研究[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
3 金晓芬;张扬;姚泉洪;熊爱生;彭日荷;洪义欢;陈建民;;水稻bZIP类转录因子OsAREB1的功能分析[A];江苏省遗传学会第七届二次代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
4 李昂;张执金;王俊英;张海文;黄荣峰;;ERF转录调控因子TERF1在糖应答反应中的调控功能[A];中国农业生物技术学会第三届会员代表大会暨学术交流会论文摘要集[C];2006年
5 刘卫群;郭红祥;石永春;冯锋;;DREB1A-like转录调控域中对转录激活功能起关键作用的氨基酸[A];全国“植物生物技术及其产业化”研讨会论文摘要集[C];2007年
6 陈旭君;郭泽建;;增加表达AP2/EREBP类转录因子OPBP1基因提高烟草的抗逆能力[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
7 马东明;蒲高斌;雷彩燕;马兰青;王红;叶和春;李国凤;刘本叶;;青蒿AaWRKY1转录因子的分离与功能分析[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
8 高峰;夏瑞强;熊爱生;肖宁;洪义欢;姚泉洪;陈建民;;水稻AP2/EREBP类转录因子基因的功能研究[A];江苏省遗传学会植物分子育种学术研讨会论文摘要汇编[C];2007年
9 李煦;景寅;汪晓峰;;肌醇半乳糖苷酶在种子耐干性获得中的作用及其调控机制[A];第二届全国种子科学与技术学术研讨会论文摘要集[C];2011年
10 朱英;蔡秀玲;洪孟民;王宗阳;;dsRNAi抑制OsBP-5基因的表达对水稻胚乳直链淀粉含量的影响[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年
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1 ;我国成功破译乙肝病毒基因组新编码基因[N];中国高新技术产业导报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 童畅;尿激酶型纤溶酶原激活物在人肺癌细胞中表达调控的研究[D];复旦大学;2005年
2 胡国库;黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(lipC)转录调控因子的研究[D];四川大学;2006年
3 杨予涛;一个光合组织特异表达启动子的克隆、功能分析及其转录因子的鉴定[D];山东农业大学;2005年
4 冀芦沙;烟草核基质结合序列TM6在转基因植物中的功能鉴定及机理分析[D];山东农业大学;2009年
5 张杰道;烟草TM2 MAR序列作用机理研究及其应用[D];山东农业大学;2008年
6 孙静文;构树DREB转录因子及木质素合成代谢相关基因的克隆及功能分析[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2006年
7 戴怡龄;红豆杉中与异戊二烯代谢途径相关的AP2类转录调控因子的克隆与功能研究[D];复旦大学;2008年
8 徐晨曦;柽柳eIF5A基因的抗逆功能研究[D];东北林业大学;2010年
9 秦秋琳;银杏中与木质素合成和苯丙氨酸代谢相关的转录调控因子的克隆与研究[D];复旦大学;2007年
10 陈晓博;参与番茄花柄离区发育的转录因子SPL3的基因功能研究[D];中国农业科学院;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 付晓燕;八棱海棠与水稻AP2/EREBP类转录因子的克隆及功能分析[D];南京农业大学;2007年
2 金晓芬;水稻bZIP类转录因子OsAREB1的功能分析[D];扬州大学;2008年
3 李燕强;香蕉乙烯合成关键酶基因上游调控因子克隆[D];华南热带农业大学;2005年
4 冯锋;烟草(Nicotiana tabacum)中DREB转录因子的克隆和功能分析[D];河南农业大学;2008年
5 宗俊梅;冰凌花转录因子AaDREB1基因的表达分析及功能鉴定[D];吉林农业大学;2011年
6 张芳芳;红豆杉体细胞杂交及其紫杉醇合成关键酶基因DBTNBT启动子功能分析[D];山东大学;2010年
7 杨鹏程;BrCHS1启动子光反应顺式作用元件结合蛋白的筛选和分析[D];东北林业大学;2012年
8 刘晓雪;碱蓬DREB同源基因的克隆与功能分析[D];南京农业大学;2010年
9 郭晋艳;CMO启动子盐诱导功能元件鉴定及转录因子分离[D];辽宁师范大学;2011年
10 夏宁;小麦抗条锈病相关NAC转录因子基因的克隆及特征分析[D];西北农林科技大学;2010年
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