《现代实用医学》2002年09期 加入收藏    获取最新    产青霉素酶淋病奈瑟菌的DNA检测   黄瑞萍;曹佩霞;郑亚芬;汤韧;程晓京;糜祖煌;秦玲   　　目的　了解产青霉素酶淋病奈瑟菌 (PPNG )耐青霉素的分子机制。　方法　收集常州地区 5 0株淋病奈瑟菌 ,应用TEM基因通用引物套式聚合酶链反应 (nPCR)和以TEM 1的 3’末端及与之相邻基因的 5’末端为靶基因的PPNG型特异引物nPCR两种方法进行配对检测。　结果　TEM 1型的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、沙雷杆菌、不动杆菌经TEM通用引物nPCR扩增均能呈现 5 35bp的目的条带 ,而经PPNGTEM 1基因型特异引物nPCR扩增无任何条带出现。 5 0株淋病奈瑟菌检测结果 :TEM通用引物nPCR与PPNGTEM 1基因型特异引物nPCR扩增结果一致 ,有 32例呈阳性 ,阳性率均为 6 4 %。对 31号菌株PPNGTEM 1基因型特异引物nPCR产物进行全自动DNA测序 ,测得的序列与NCBI已登录的 3种质粒序列 (gi 15 0 36 2、gi 17774 2 2、gi 17774 2 8)高度同源。　 结论　常州地区 6 4 %的淋病奈瑟菌为PP NG。由于PPNGTEM 1基因型特异的nPCR只能扩增含TEM基因的PPNG ,因此本检测有望用于淋病患者病灶部标本的PPNGDNA流行病学研究和用药参考。 【作者单位】：江苏省常州市妇幼保健医院;江苏省常州市妇幼保健医院;江苏省常州市妇幼保健医院;江苏省常州市妇幼保健医院;江苏省常州市妇幼保健医院;无锡市克隆遗传技术研究所;无锡市克隆遗传技术研究所 213003;213003;213003;213003;213003 【关键词】：奈瑟氏球菌;淋病/分离和提纯;青霉素酶;序列同源性;核酸 【分类号】：R446.5 【DOI】：cnki:ISSN:1671-0800.0.2002-09-004 【正文快照】： 　　产青霉素酶淋病奈瑟菌 ( ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃ ｉｎｇＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ ,ＰＰＮＧ )因淋病奈瑟菌获得内含ＴＥＭ 1基因的质粒所致。ＰＰＮＧ因其产生的β 内酰胺酶能水解青霉素 ,故表现为对青霉素类药物的拮抗。ＰＰＮＧ首次发现     推荐 下载CAJ全文           下载PDF全文   CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式   DNA detection of penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae   HUANG Rui Ping;CAO Pei Xia;ZHENG Ya Fen;et al.Changzhou Women and Children's Hospital;Changzhou 213003;Jiangsu China   　Objective To investigate the molecular mechanism of penicillin resistance in penicillinase producing Neisseria gonorrhoeae (PPNG). Methods Fifty isolate strains of N gonorrhoeae collected from Changzhou were detected by the nested polymerase chain reaction (nPCR) technics of TEM 1 gene general primers and PPNG TEM 1 type special primers. Results Escherichia coli,Klebsiella peumoniae,Serratia spp and Acinetobacter baumannii with TEM 1 gene were amplifed 535 bp products by the nPCR of TEM 1 gene general primers,but were not amplified by the nPCR of PPNG TEM 1 type special primers.Among 50 isolate strains of N gonorrhoeae collected from Changzhou,32 strains were detected by two nPCR technics. Conclusion Sixty four per cent of 50 strains of N gonorrhoeae collected from Changzhou are PPNG.Because of the nPCR of PPNG TEM 1 type special primers amplified only PPNG,this method maybe use for clinical diagnosis and study of molecular epidemiology in PPNG infection. 【Keyword】：Neisseria gonerrhoeae/isolation and purification PenicillinaseSequential homology,nucleic acid   【参考文献】   共（4）篇    中国期刊全文数据库 找到 2 条   1 向辉,雍刚,叶梅君,李绍兴,廖巫山,周蓉,周启贵; 产青霉素酶的48株淋病奈瑟菌的耐药性、质粒特征及酶切分析 [J];中华微生物学和免疫学杂志; 1999年06期 2 邓艳,张宁,陆洪光,吴承龙; 贵阳市淋球菌耐药质粒及其与淋病流行的关系 [J];中国皮肤性病学杂志; 2001年06期  西文参考文献 找到 2 条   1 Dillon JR, Li H, Yeung KH, et al; A PCR assay for discriminating Neisseria gonorrhoeae beta-laclamase-producing plasmids [M];Mol Cell Probes; 1999年 2 Pagotto F, Aman AT, Ng LK, et al; Sequence analysis of the family of penicillinase-producing plasmids of Neisseria gonorrhoeae [M];Plasmid; 2000年   【引证文献】   共（1）篇    中国期刊全文数据库 找到 1 条   1 糜祖煌,黄瑞萍; 淋病奈瑟菌耐药基因检测 [J];现代实用医学; 2003年10期   【共引文献】   共（17）篇    中国期刊全文数据库 找到 10 条   1 郑亚芬,承晓京; 淋病奈瑟菌青霉素、四环素耐药的分子检测 [J];疾病监测; 2002年12期 2 郑亚芬,承晓京; 淋病奈瑟菌青霉素、四环素耐药的分子检测 [J];疾病监测; 2003年02期 3 曹佩霞,黄瑞萍,郑亚芬,承晓京,汤韧; 淋病奈瑟菌分离株3种药物耐药基因检测 [J];临床皮肤科杂志; 2003年12期 4 宋矿余,胡嘉,黎帆,余克花; 淋球菌116株β-内酰胺酶和营养分型测定及分析 [J];临床皮肤科杂志; 2005年02期 5 黄瑞萍,郑亚芬,承晓京,汤韧; 淋病奈瑟球菌药敏检测及耐药分子机制研究 [J];中国抗感染化疗杂志; 2003年04期 6 郑亚芬,承晓京,黄瑞萍; 淋病奈瑟菌青霉素耐药基因研究 [J];检验医学; 2005年02期 7 熊自忠,李涛,沈继录,张书梅; 淋病奈瑟球菌的耐药性检测 [J];中国微生态学杂志; 2005年03期 8 丁云芳,顾洪昭,糜祖煌,秦玲; 微生物耐药的分子检测现状 [J];中国优生与遗传杂志; 2001年05期 9 俞莲花,曲颖; 201株淋病奈瑟菌的耐药性分析 [J];浙江实用医学; 2004年01期 10 曹佩霞,黄瑞萍,郑亚芬,承晓京,汤韧; 50株淋病奈瑟菌喹诺酮耐药决定区的DNA测序研究 [J];中国优生与遗传杂志; 2002年05期  中国优秀硕士学位论文全文数据库 找到 1 条   1 赵立红; 实时荧光定量PCR检测临床标本中淋病奈瑟菌 [D];青岛大学; 2002年   【同被引文献】   共（9）篇    中国期刊全文数据库 找到 5 条   1 谢平,糜祖煌,李琴,张稷,肖琛月; 淋病奈瑟菌GyrA基因及ParC基因突变与耐喹诺酮类药物的关系 [J];中华男科学; 2003年04期 2 孙蓉,孙峰,张新华,朱进,时祝帅; 男性性病病人支原体、衣原体及淋病奈瑟菌感染分析 [J];中华男科学; 2002年06期 3 谢平,李琴,张稷,肖琛月; 无锡地区淋病患者产青霉素酶淋球菌基因检测 [J];临床皮肤科杂志; 2002年09期 4 曹佩霞,黄瑞萍,郑亚芬,承晓京,汤韧; 50株淋病奈瑟菌喹诺酮耐药决定区的DNA测序研究 [J];中国优生与遗传杂志; 2002年05期 5 糜祖煌,秦玲,李崇高; 超广谱β-内酰胺酶TEM和SHV型全长基因PCR直接测序 [J];中华微生物学和免疫学杂志; 2003年07期  西文参考文献 找到 4 条   1 Aminov RI, Garrigues-Jeangean N, Mackie RI; 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1992年04期 4 吴红!400016,朱道银!400016; 淋球菌营养型与耐药性及质粒的关系 [J];中华皮肤科杂志; 1998年03期  西文参考文献 找到 5 条   1 Meyer L, Harrison TG, Jaskct D, et al; Surveillance of sexually transmitted diseases in France: recent trends and incidence [M];Genitourin Med; 1994年 2 Backman M, Gill MJ, Falk ES, et al; The virgin population of Neisseria gonorrhoeae in stockholm has decreased and antimicrobial resistance is increasing [M];Genitourin Med; 1995年 3 Chitwarakorn A; Treating gonococcal infections resistant to penicillin in Bangkok.Comparison of cefuroxime and spectinomycin [M];Genitourin Med; 1985年 4 Yeung KH, Mopauze JD; Anovel 4. 9 kilobase plasmids associated with an outbreak of penicillinase producing neisseria gonorrhoeae [M];Infect Dis; 1986年 5 Dillon JR, Duck Pand Thomas DY; Molecular and phenotypic characterization of penicillinase-producing neisseria gonorrhea from canadian source [M];Antimicrob Agents Cheomother; 1981年   【读者推荐文章】   共（10）篇     1 黄瑞萍,郑亚芬,承晓京,汤韧; 淋病奈瑟球菌药敏检测及耐药分子机制研究[J]; 中国抗感染化疗杂志; 2003年04期; 43-45 2 王胜春,刘玉峰,陈群,李国明,王强; 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