提高抗地高辛人单链抗体在大肠杆菌分泌型表达的研究--《军医进修学院学报》2002年01期

《军医进修学院学报》 2002年01期

提高抗地高辛人单链抗体在大肠杆菌分泌型表达的研究

【摘要】：目的 :提高从半合成噬菌体抗体库中克隆的抗地高辛 (Dig)人单链抗体 (ADAscFv)在大肠杆菌 (E .coli)的分泌表达水平。方法 :①通过PCR从表达质粒 pHEN2 ADAscFv扩增ADAscFv基因并重组于质粒 p3MH构建表达质粒p3MH ADAscFv后 ,转化到E .coliXL1 blue及HB2 15 1;②ADAscFv分别在带有上述 2种表达质粒的E .coliHB2 15 1以及带有表达质粒 p3MH ADAscFv的E .coliXL1 blue进行表达 ,通过ELISA分析培养基上清中的可溶性ADAscFv ;③在培养基中加入蔗糖、甘氨酸及TritonX

【作者单位】：海军总医院中心实验科海军总医院中心实验科海军总医院中心实验科海军总医院中心实验科海军总医院中心实验科
【关键词】：抗体 单克隆 大肠杆菌 地高辛
【基金】：“九五”军队医药科研基金项目 (98M 14 5 96Z0 0 4)
【分类号】：R392
【DOI】：CNKI:SUN:JYJX.0.2002-01-009
【正文快照】：

通过噬菌体抗体库技术可不经免疫 (ｂｙｐａｓｓｉｎｇｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ)制备单抗[1,2 ] ,使得制备地高辛 (ｄｉｇｏｘｉｎ ,Ｄｉｇ)特异性人单抗成为可能。我们已从半合成噬菌体抗体库中不经免疫克隆了抗地高辛人单链抗体(ｓｉｎｇｌｅｃｈａｉｎｖａｒｉａｂｌｅ

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