| | | | | 彗星试验非荧光染色研究 | | | 赵蓉,衡正昌 | | | 目的为了建立一种非荧光染色的彗星试验。方法将Feulgen法、甲基绿染色法、全染料 (stains_all)法和银染法等几种非荧光DNA特异染色方法试用于彗星试验 ,并与溴化乙锭 (EB)染色进行了比较。结果在所试验的染色法中 ,仅银染法有满意的效果 ,染色清晰 ,“彗星”头和尾的边界易于判断 ,染色持久 ,敏感性高 ,可染出EB不能染出的DNA小片段 ,得到“彗星”头长和尾长均为EB染色的2倍以上 ,安全、价廉。结论银染法摒弃了EB染色的不足 ,在彗星试验中可以替代EB染色 ,为彗星试验的进一步推广提供了可能。
【作者单位】：四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室 成都610041
(赵蓉);四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室 成都610041(衡正昌)
【关键词】：DNA损伤;实验室诊断;彗星试验;银染法
【基金】：国家自然科学基金资助 (39670625)
【分类号】：R994.6
【DOI】：cnki:ISSN:1001-5914.0.2002-02-022
【正文快照】：
彗星试验 (ＣｏｍｅｔＡｓｓａｙ)是一种能在单细胞水平检测ＤＮＡ损伤的新技术 ,由于该试验具有快速、简便、样品用量少、敏感性高、检测谱宽等优点 ,其应用范围越来越广泛 ,并已列入常规的遗传毒理学评价试验组［１＿３］。但该试验一直沿用溴化乙锭 (ＥＢ)染色 ,在荧光显微镜下观察结果。这不仅需要价格昂贵的荧光显微镜 ,而且ＥＢ与ＤＮＡ结合后激发的荧光会在数分钟内发生淬灭 ,无法进行持续观察 ;另外 ,ＥＢ是强诱变剂 ,用荧光显微镜观察必须在暗室中进行 ,还会给实验者带来安全上的问题和操作上的不便。许多学者认为荧光染色观察结果… | | |  推荐 CAJ下载  PDF下载 | | | CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式 | | | | Studies on Un-fluorescent Staining Methods in Comet Assay | | | ZHAO Rong;HENG Zheng_chang. Department of Environmental Health;Huaxi College of Public Health;Sichuan University;Chengdu 610041 | | | Objective To develop an un_fluorescent staining method in Comet Assay. Methods Some special un_fluorescent DNA staining methods, Feulgen, Methyl Green, Stains_all and Silver_Stain were tested in Comet Assay and the comparison studies with EB stain were carried out. Results Among the stain methods tested, just the silver_stain could give a satisfactory effect: legible, ease to judge the stained area of the comets head and tail, permanent, sensitive, could make little segment of DNA be stained, which couldnt be stained by EB stain, the length of comets head and tail, were over 2 times of that of EB stain, safety and economical. Conclusion The silver_stain method discarded the defects of EB stain, so that it could replace EB stain and make comet assay possible to be extended.
【Keyword】：DNA damage;Laboratory diagnosis;Comet assay;Silver stain method |
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