《中国激光》1999年11期 加入收藏    获取最新    用激光微束穿刺法将PAP cDNA导入油菜获得抗病毒转基因植株   张海燕,党本元,周奕华,王兰岚,刘桂珍,张丽华,陈正华   　　采用激光微束穿刺法将损伤诱导型启动子控制之下的商陆抗病毒蛋白（PAP）CDNA导入了甘蓝型油菜（BrassicanapusL．）双低品种H165，经庆大霉素筛选，获得了抗性再生植株。PCR扩增检测及Southern杂交分析表明，PAPcDNA连同损伤诱导型启动子已稳定整合至受体基因组，转化效率为1．7％。攻毒实验表明，转基因油菜植株对供试病毒芜菁花叶叶（TuMV）具有较高抵抗能力。 【作者单位】：中国科学院遗传研究所!北京;100101;中国科学院遗传研究所!北京;100101;中国科学院遗传研究所!北京;100101;中国科学院遗传研究所!北京;100101;中国科学院遗传研究所!北京;100101;中国科学院遗传研究所!北京;100101;中国科学院遗传研究所!北京;100101 【关键词】：激光微束穿刺;商陆抗病毒蛋白（PAP）cDNA;转基因甘蓝型油菜 【基金】：国家自然科学基金 【分类号】：Q78 【DOI】：cnki:ISSN:0258-7025.0.1999-11-019 【正文快照】： 　　1引言激光微束穿刺转化法是利用聚焦到微米级的激光微束对组织进行穿刺，从而导入外源DNA的一种基因直接转化技术。中国科学院遗传所经过数年摸索，已建立了激光微束穿刺向植物细胞导入外源基因的实验程序，并在多种植物上实现了外源基因的瞬时或稳定表达［’－’j。研究表明，激光微束转化技术具有操作简便、转化频率高等特点，已引起广泛重视。油菜是我国的重要经济作物，但由于芜青花叶（TllMV）等多种病毒的浸染，导致产量与品质严重下降，造成巨大的经济损失。因而，培育对病毒具广谱抗性的油菜品种已成为一个迫切问题。由于病毒来…   推荐 CAJ下载           PDF下载   CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式，AdobeReader仅支持PDF格式   Introduction of PAP cDNA into Brassica napus L. and Acquisition of Tansgenic Plants via Laser Microbeam Puncture   Zhang Haiyan; Dang Benyuan ;Zhou Yihua; Wang LanlanLiu Guizhen ;Zhang Lihua ;Chen Zhenghua(Instisute of Genenetics;The Chinese Academy of Sciences;Beijing 100101)   　The PAP cDNA controlled by a wound-inducible promoter was introduced into Brassica napus via laser microbeam puncture, and plantlets resistant to Gentamycin were obtained. The transgenicity of these plantlets was verified by PCR amplification and the Southern blotting analysis, which showed that PAP cDNA together with the woundinducible promoter and a terminator have been integrated into the rape genome, with the transformation frequency being 1. 7%. The test of virus challenge showed that all these transgenic rape plants were resistant to virus TuMV mechanically inoculated in higher degree. 【Keyword】：laser microbeam puncture, pokeweed antiviral protein (PAP) cDNA,transgenic Brassica napus   【参考文献】   共（4）篇    西文参考文献 找到 4 条   1 G. Weber, S. Monajembashi, K. O. Greulich et al; Injection of DNA into plant cell with UV-laser microbeam [M];Nalurwissens Chafler; 1988年 2 P. Vain, M. D. McMullen, J. J. Finer; Osmotic treatment enhances partlcle bombardment-mediatal transient and stable trans formation of maize [M];Plant Cell Reports; 1993年 3 G. Weber, S. Monajembashi, J. 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