| | | | | 天花粉蛋白基因的克隆、序列测定及在大肠杆菌和烟草中的表达 | | | 鲍一明;储瑞银;韩晋华;张会;潘乃禾遂;顾孝诚;陈章良 | | | 本文利用DNA多聚酶链式反应(PCR)技术,从括楼基因组DNA中扩增并克隆了天花粉蛋白基因,核苷酸序列分析结果表明,我们克隆的是天花粉蛋白的成熟肽及N端23个氨基酸的信号的编码序列,与前人从基因组或cDNA中克隆的该基因的比较发现,其同源性为99.25％,并且证实与发表的蛋白质一级结构的序列有较大差异,将该基因克隆到大肠杆菌高效表达质粒pJLA_(502)的P_RP_L启动子下游,通过温度诱导,得到了表达产物,进一步将该基因克隆到植物中间载体pE_3的花椰菜花叶病毒35S启动子下游,应用根癌农杆菌Ti质粒介导的遗传转化系统,成功地将该基因导入了烟草基因组,获得了转基因植株,Western blotting分析结果证实,天花粉蛋白基因已在大肠杆菌和转基因烟草中表达。
【作者单位】：北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室;北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室;北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室;北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室;北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室;北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室;北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室 北京 100871;北京 100871;北京 100871;北京 100871;北京 100871;北京 100871;北京 100871
【关键词】：天花粉蛋白;DNA多聚酶链式反应;核苷酸序列分析;基因表达;转基因植物
【DOI】：cnki:ISSN:1006-9240.0.1992-09-007
【正文快照】：
天花粉人药已有两千多年的历史,它是由多年生宿根草质藤本括楼〔Trichosantheskt’rild wiiM以劝”(cucurbitaceae)1的块根制成的,其主要功效是“通月水”和“治胞衣不下”·天花粉的有效成分为天花粉蛋白(T richosanthin,TCS),我国科技工作者对该蛋白进行了分离、纯化、理化性 | | |
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