核酶的体外合成及其对烟草叶病毒RNA靶的作用--《中国科学B辑》1992年01期

《中国科学B辑》1992年01期

核酶的体外合成及其对烟草叶病毒RNA靶的作用

　　通过微机对烟草花叶病毒(TMV)RNA二级结构的分析并参照烟草环斑卫星病毒(sTobRV)的锤头型(hammer head)催化性RNA(即ribozyme或核酶)序列,我们在体外分别合成了以TMV移动蛋白(MP)基因区域正链和负链及正链3’末端序列为靶的锤头型核酶RZ1,RZ3和RZ2。体外结果表明,RZ1在50,37和30℃都能切割含有其靶序列的体外转录TMV RNA BT1(+)和BT2(+);与之相比,RZ3在50,37和30℃都只能部分切割靶RNA BT2(-)。至于RZ2,它对TMV正链3’末端内的靶序列的任何切割作用则未能观察到。我们在核酶RZ1的催化序列的茎环内或其3’末端引入了一个起稳定作用的序列CUUCGG以观察该序列对核酶的影响,实验表明这种修饰并不改变核酶的作用效率。
【作者单位】：中国科学院上海植物生理研究所;中国科学院上海植物生理研究所;中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室;上海 200032;植物分子遗传国家重点实验室;上海 200032;植物分子遗传国家重点实验室;上海 200032
【关键词】：TMV;核酶;体外转录及核酶催化反应
【基金】：中国科学院院长基金;中国科学院所长择优基金;植物分子遗传国家重点实验室资助项目
【DOI】：cnki:ISSN:1006-9240.0.1992-01-006
【正文快照】：
　　从80年代初起,人们陆续发现了四膜虫(Tetrah卿ena)的rRNA内含子(intronl’])、酶RNaseP内的RNA成分12孟以及多个类病毒阴和卫星病毒仪一司的中间产物多聚RNA内一段序列具有高度专一的催化RNA内特定碱基间的磷酸转醋反应和水解反应的功能.诺贝尔奖金得主T.Cech首次把四膜虫的这

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