| | | | | 锰——超氧化物歧化酶活力测定的五种方法比较研究 | | | 赵厚安,方允中 | | | 本文分别以CN~-抑制和SDS处理区分Mn-SOD与CuZn-SOD,对五种SOD活力测定方法进行了比较研究。结果表明:(1)化学发光法和光化学扩增法不适用于Mn-SOD活力测定,CN~-和SDS对这两种方法有明显的干扰作用。(2)NBT还原、Cyt c还原和亚硝酸盐形成法都能用于Mn-SOD活力测定,用这三种方法测得Mn-SOD每活力单位相当于酶的含量分别为2.93μg、0.11μg和0.028μg。说明NBT还原法灵敏度最低,其次是Cyt c还原法。亚硝酸盐形成法灵敏度高,专一性强,为五种测定方法之首。 【作者单位】:军事医学科学院放射医学研究所 北京
(赵厚安);军事医学科学院放射医学研究所 北京(方允中) 【关键词】:Mn-SOD;SDS;氰化物;NBT还原法;Cyt c还原法;化学发光法;光化学扩增法;亚硝酸盐形成法 【基金】:国家自然科学基金 【DOI】:cnki:ISSN:1007-7626.0.1988-01-003 | | | 推荐 CAJ下载 PDF下载 | | | CAJViewer7.0阅读器支持所有CNKI文件格式,AdobeReader仅支持PDF格式 | | | | COMPARATIVE STUDY ON THE FIVE METHODS FOR THE ESTIMATION OF MANGANESE SUPEROXIDE DISMUTASE ACTIVITY | | | Zhao;Hou-an Fang;Yun-zhong(Institute of Radiation Medicine;Academy of Military Medical Sciences;Beijing) | | | For finding out a more suitable method for routine determination of manganese superoxide dismutase (Mn-SOD) activity, five methods (cytochrome c reduction, nitroblue tetrazolium reduction, chemiluminescence, photochemical augmentation and nitrite formation) have been comparatively studied and the main results were shown as follows.1, Neither cyanide inhibition nor sodium dodecyl sulfate (SDS) treatment in chemiluminescence and photochemical augmentation method could be adopted for distinguishing Mn-SOD from CuZn-SOD, since both cyanide and SDS would cause distinct interference with the accuracy and sensitivity of the enzyme activity assay)2. By using the procedure of cyanide inhibition or SDS treatment in nitro blue tetrazolium (NBT) reduction, cytochrome c redaction and nitrite formation, three approaches were proved to be suitable for the estimation of Mn-SOD activity as shown by recovery tests, but the sensitivity of those methods were quite different, as indicated by the concentration required for 50 % inhibition in NBT reduction, cytochrome c reduction and nitrite formation were 2.93 μg/ml, 0.11 μg/ml and 0.028 μg/ml respectively. It has been proved that the nitrite formation method is the best among the three methods, with the advantages of higher sensitivity, better accuracy and simpler manipulation. 【Keyword】:Manganese superoxice dismutase (Mn-SOD) , Sodium dodecyl sulfate (SDS) , Cyanide, Cytochrome c reduction method, Chemiluminescence method, Photochemical augmentation method, Nitrite formation method, Nitroblue tetrazolium (NBT) reduction method |
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